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拟南芥RNA POLⅡ的最大亚基(RPB1)的CTD磷酸化调控开花时间及茎尖分生组织活性

中文摘要第8-9页
Abstract第9页
1 前言第10-28页
    1.1 植物茎尖干细胞池的维持第10-16页
        1.1.1 植物顶端分生组织的组成第10-11页
        1.1.2 植物顶端分生组织维持机理第11-16页
            1.1.2.1 WUS是茎尖分生组织干细胞池维持必须的正向调节因子第11-12页
            1.1.2.2 STM参与维持茎尖分生组织的干细胞功能第12-13页
            1.1.2.3 参与茎尖分生组织形态建成和维持的其它正向调节子第13页
            1.1.2.4 CLV3负向调节茎尖分生组织形态建成和维持第13-14页
            1.1.2.5 ARRs负向调控茎尖分生组织的大小第14页
            1.1.2.6 参与茎尖分生组织干细胞池维持的其它负向调节子第14-15页
            1.1.2.7 茎尖分生组织受小分子信号的调控第15页
            1.1.2.9 茎尖分生组织信号调控途径网络模型第15-16页
    1.2 植物开花时间的调节第16-26页
        1.2.1 春化途径第17页
        1.2.2 自主途径第17-18页
        1.2.3 光周期途径第18-24页
            1.2.3.1 光受体光敏色素和隐花色素第19-21页
            1.2.3.2 光周期调控开花时间的关键调节子第21页
            1.2.3.3 开花关键调节子FT的下游调控网络第21-22页
            1.2.3.4 开花关键调节子FT的上游调控网络第22-24页
        1.2.4 赤霉素途径第24-25页
        1.2.5 植物开花调控信号途径间相互联系第25-26页
    1.3 RNA聚合酶Ⅱ的最大亚基RPB1第26-28页
2 材料与方法第28-43页
    2.1 实验材料第28-34页
        2.1.1 植物材料第28页
        2.1.2 质粒及菌株第28页
        2.1.3.抗体第28页
        2.1.4 各种酶及生化试剂第28-29页
        2.1.5 各种缓冲液及培养基配方第29-34页
            2.1.5.1 菌株培养所用LB固体培养基第29页
            2.1.5.2 植物培养所用培养基及营养液等配方第29-31页
            2.1.5.3 拟南芥侵染液配方第31页
            2.1.5.4 Western blot实验所用缓冲液第31-33页
            2.1.5.5 植物染色试剂配方第33页
            2.1.5.6 激素配方第33-34页
    2.2 实验方法第34-43页
        2.2.1 拟南芥的栽培第34页
        2.2.2 植物转基因表达载体的构建第34-38页
            2.2.2.1 PCR引物设计第34-35页
            2.2.2.2 目的片段的PCR扩增第35-36页
            2.2.2.3 DNA产物的回收第36页
            2.2.2.4 目的片段与表达载体质粒的酶切回收第36页
            2.2.2.5 目的片段与表达载体的连接第36-37页
            2.2.2.6 大肠杆菌DH5α 感受态细胞的制备第37页
            2.2.2.7 热激法进行大肠杆菌的转化第37-38页
            2.2.2.8 菌落PCR鉴定大肠杆菌转化结果第38页
            2.2.2.9 质粒DNA的提取第38页
            2.2.2.10 质粒DNA的酶切验证及测序第38页
        2.2.3 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备及转化第38-39页
            2.2.3.1 根癌农杆菌GV3101的制备第38-39页
            2.2.3.2 低温冷冻法转化农杆菌第39页
        2.2.4 拟南芥的转化及阳性克隆的筛选第39-40页
            2.2.4.1 拟南芥的转化第39-40页
            2.2.4.2 转基因拟南芥阳性植株的筛选第40页
        2.2.5 植物总DNA的提取第40页
        2.2.6 植物总RNA的提取、反转录及定量分析第40-41页
            2.2.6.1 植物总RNA的提取第40页
            2.2.6.2 植物总RNA的反转录第40-41页
        2.2.7 GUS染色第41-42页
        2.2.8 Western blot实验方法第42页
        2.2.9 card1-1 突变体响应不同激素的磷酸化差异实验第42页
        2.2.10 拟南芥的杂交第42-43页
3 结果与分析第43-57页
    3.1 突变体的表型分析第43-44页
    3.2 CTD突变后其磷酸化水平发生变化第44-46页
    3.3 card1-1 突变体对各种激素的响应第46-50页
        3.3.1 突变体对ABA不敏感第46-48页
        3.3.2 突变体对 6-BA不敏感第48-49页
        3.3.3 突变体对GA_3和ACC超敏感第49-50页
    3.4 CTD调控茎尖分生组织及茎尖发育第50-52页
    3.5 card1-1 突变体及其磷酸酶突变体开花时间差异分析第52-54页
    3.6 CTD调控开花调节关键因子FLC和FT的表达第54-57页
4 讨论第57-59页
5 结论第59-60页
参考文献第60-72页
致谢第72页

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