| 硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 | 第3-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-24页 |
| 1.1 DEHP在环境中的分布 | 第13-14页 |
| 1.2 DEHP的危害 | 第14-15页 |
| 1.3 DEHP相关法规 | 第15页 |
| 1.4 DEHP的降解 | 第15-23页 |
| 1.4.1 PAES降解 | 第15-16页 |
| 1.4.2 PAES降解基因（簇） | 第16-19页 |
| 1.4.3 DEHP的降解途径 | 第19-20页 |
| 1.4.4 DEHP降解资源的分离 | 第20-22页 |
| 1.4.5 DEHP降解酶 | 第22-23页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 邻苯二甲酸酯降解菌的分离与鉴定 | 第24-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.1.1 环境材料 | 第24页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.1.4 培养基 | 第25页 |
| 2.2 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.2.1 DEHP降解菌的富集与纯化 | 第25-26页 |
| 2.2.1.1 降解菌株的富集驯化 | 第25-26页 |
| 2.2.1.2 降解菌株的筛选分离 | 第26页 |
| 2.2.1.3 PAEs物质的GC检测 | 第26页 |
| 2.2.2 DEHP降解菌的鉴定 | 第26页 |
| 2.2.3 菌株的系统发育鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.3.1 菌株 16S rDNA序列的获得 | 第26-27页 |
| 2.2.3.2 菌株的系统发育分析 | 第27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-30页 |
| 2.3.1 DEHP降解菌的富集 | 第27页 |
| 2.3.2 PAES的GC检测 | 第27-28页 |
| 2.3.3 降解菌YC-JH1的形态鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.4 菌株的系统发育鉴定 | 第29-30页 |
| 2.4 本章小结 | 第30-32页 |
| 第三章 菌株YC-JH1的降解特性及代谢产物 | 第32-41页 |
| 3.1 实验材料 | 第32页 |
| 3.1.1 实验仪器 | 第32页 |
| 3.1.2 相关溶液的配制 | 第32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-33页 |
| 3.2.1 影响菌株YC-JH1降解活性的环境因素 | 第32页 |
| 3.2.2 菌株YC-JH1对DEHP的最大耐受 | 第32-33页 |
| 3.2.3 菌株YC-JH1的降解底物谱 | 第33页 |
| 3.2.4 菌株YC-JH1降解DEHP中间产物的HPLC-MS检测 | 第33页 |
| 3.3 结果与分析 | 第33-39页 |
| 3.3.1 温度对YC-JH1降解DEHP的影响 | 第33-34页 |
| 3.3.2 PH对YC-JH1降解DEHP的影响 | 第34-36页 |
| 3.3.3 盐度对YC-JH1降解DEHP的影响 | 第36页 |
| 3.3.4 YC-JH1对DEHP的最大耐受 | 第36-38页 |
| 3.3.5 YC-JH1的降解底物谱 | 第38页 |
| 3.3.6 YC-JH1对DEHP降解途径推测 | 第38-39页 |
| 3.4 本章小结 | 第39-41页 |
| 第四章 菌株YC-JH1的酯酶研究 | 第41-53页 |
| 4.1 实验仪器与耗材 | 第41页 |
| 4.2 缓冲液配制 | 第41-42页 |
| 4.2.1 酶促反应缓冲液配制 | 第41页 |
| 4.2.2 AKTA蛋白纯化缓冲液和SDS-PAGE胶配制 | 第41-42页 |
| 4.3 实验方法 | 第42-46页 |
| 4.3.1 胞外粗酶液和胞质提取液的降解能力比较 | 第42页 |
| 4.3.2 PAES酯酶表达的诱导 | 第42页 |
| 4.3.3 YC-JH1基因组提取 | 第42-43页 |
| 4.3.4 YC-JH1基因组中可能存在的酯酶扩增 | 第43页 |
| 4.3.5 YC-JH1基因组文库构建 | 第43-44页 |
| 4.3.6 YC-JH1中MEHP水解酶基因的克隆和原核表达 | 第44-46页 |
| 4.3.6.1 YC-JH1中MEHP水解酶基因的全序列获得 | 第44-45页 |
| 4.3.6.2 YC-JH1的MEHP水解酶的克隆和原核表达 | 第45-46页 |
| 4.3.7 重组MEHP水解酶的纯化和功能鉴定 | 第46页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第46-52页 |
| 4.4.1 菌株YC-JH1中PAES酯酶的定位 | 第46页 |
| 4.4.2 菌株YC-JH1中酯酶的底物诱导表达 | 第46-47页 |
| 4.4.3 YC-JH1基因组提取 | 第47-48页 |
| 4.4.4 YC-JH1基因组中可能存在的酯酶扩增 | 第48-49页 |
| 4.4.5 YC-JH1的基因组文库构建以及酯酶基因筛选 | 第49页 |
| 4.4.5.1 最佳酶切反应条件摸索以及片段切胶回收 | 第49页 |
| 4.4.5.2 YC-JH1基因组文库构建以及酯酶基因筛选 | 第49页 |
| 4.4.6 YC-JH1中MEHP水解酶基因的克隆与原核表达 | 第49-51页 |
| 4.4.7 重组MEHP水解酶功能鉴定 | 第51-52页 |
| 4.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第五章 全文结论 | 第53-55页 |
| 5.1 研究结果 | 第53页 |
| 5.2 创新点 | 第53-54页 |
| 5.3 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简历 | 第64页 |
