英文缩略词表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
1 前言 | 第13-16页 |
2 材料与方法 | 第16-32页 |
2.1 材料 | 第16-18页 |
2.2 方法 | 第18-32页 |
2.2.1 溶液配制 | 第18-20页 |
2.2.2 病毒增殖及病毒滴度测定 | 第20页 |
2.2.3 细胞转染 | 第20-22页 |
2.2.4 实验分组情况与细胞标本的收集 | 第22页 |
2.2.5 TLR7和NS2在各组不同感染时间点mRNA的表达 | 第22-25页 |
2.2.5.1 RNA提取准备工作 | 第22页 |
2.2.5.2 A549细胞总RNA提取 | 第22-23页 |
2.2.5.3 RNA定性与定量分析 | 第23页 |
2.2.5.4 逆转录 | 第23-24页 |
2.2.5.5 Real-time PCR反应 | 第24-25页 |
2.2.5.6 结果计算分析 | 第25页 |
2.2.6 A549细胞蛋白提取 | 第25-30页 |
2.2.6.1 A549细胞总蛋白的提取 | 第25-26页 |
2.2.6.2 Lowry法蛋白定量 | 第26-27页 |
2.2.6.3 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第27-28页 |
2.2.6.4 转移电泳 | 第28-29页 |
2.2.6.5 底物显色反应及图像分析 | 第29-30页 |
2.2.7 酶联免疫吸附法 (ELISA)检测各组A549细胞培养上清液中IFN-α,IFN-β | 第30-32页 |
2.2.7.1 原理 | 第30页 |
2.2.7.2 样本的收集 | 第30页 |
2.2.7.3 操作步骤 | 第30-32页 |
2.3 统计学方法 | 第32页 |
3 结果 | 第32-40页 |
3.1 Real-time PCR检测各组不同时间点TLR7、RSV NS2的mRNA转录水平 | 第32-34页 |
3.1.1 TLR7的mRNA在各组不同时间点的表达量 | 第32-33页 |
3.1.2 RSV NS2的mRNA在各组不同时间点的表达量 | 第33-34页 |
3.2 Western-Blot检测各组A549细胞中TRIF、TRAF6、p-IκB-α蛋白表达量的变化 | 第34-38页 |
3.2.1 TRIF在各组不同处理条件下蛋白表达变化 | 第34-35页 |
3.2.2 TRAF6在各组不同处理条件下蛋白表达变化 | 第35-37页 |
3.2.3 p-IκB-α在各组不同处理条件下蛋白表达变化 | 第37-38页 |
3.3 ELISA检测培养上清液中IFN-α、IFN-β水平的改变 | 第38-40页 |
3.3.1 各组不同时间点A549细胞培养上清液中IFN-α水平的改变 | 第38-39页 |
3.3.2 各组不同时间点A549细胞培养上清液中IFN-β水平的改变 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
5 结论 | 第43-44页 |
6 参考文献 | 第44-48页 |
附录 | 第48-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
综述 | 第50-63页 |
参考文献 | 第58-63页 |