| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-18页 |
| 1.1 研究背景 | 第11页 |
| 1.2 WRKY转录因子概述 | 第11-13页 |
| 1.2.1 WRKY转录因子的研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2.2 WRKY转录因子的结构特点及分类 | 第12页 |
| 1.2.3 WRKY转录因子与W-box结合机制 | 第12-13页 |
| 1.3 WRKY转录因子的功能概述 | 第13-17页 |
| 1.3.1 WRKY转录因子在生物胁迫中的功能研究 | 第13-15页 |
| 1.3.2 WRKY转录因子在非生物胁迫中的功能研究 | 第15-16页 |
| 1.3.3 WRKY转录因子在植物生长发育过程中的功能研究 | 第16-17页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-24页 |
| 2.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.2 主要菌株、载体及试剂 | 第18页 |
| 2.3 目的基因的扩增及序列分析 | 第18页 |
| 2.4 ShWRKY6 的组织及诱导表达分析 | 第18-19页 |
| 2.5 ShWRKY6 超量表达载体构建 | 第19-20页 |
| 2.6 转基因植株的阳性检测及表达量检测 | 第20页 |
| 2.7 转基因植株苗期抗逆性鉴定 | 第20-21页 |
| 2.7.1 转基因植株苗期干旱胁迫实验 | 第20-21页 |
| 2.7.2 转基因植株苗期耐盐胁迫实验 | 第21页 |
| 2.7.3 转基因植株苗期低温胁迫实验 | 第21页 |
| 2.8 抗逆性相关生理指标测定 | 第21-22页 |
| 2.8.1 离体叶片失水率的测定 | 第21页 |
| 2.8.2 叶绿素含量的测定 | 第21页 |
| 2.8.3 电导率的测定 | 第21-22页 |
| 2.8.4 MDA含量的测定 | 第22页 |
| 2.8.5 脯氨酸含量的测定 | 第22页 |
| 2.8.6 可溶性糖含量的测定 | 第22页 |
| 2.9 叶片下表皮气孔的观察 | 第22-23页 |
| 2.10 酵母双杂交实验 | 第23-24页 |
| 2.10.1 pGBKT7 重组载体的构建 | 第23页 |
| 2.10.2 小量法转化酵母 | 第23页 |
| 2.10.3 载体的自激活实验 | 第23页 |
| 2.10.4 ShWRKY6 酵母双杂交钓库 | 第23页 |
| 2.10.5 点对点互作验证 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-39页 |
| 3.1 ShWRKY6 的克隆以及及序列分析 | 第24-25页 |
| 3.2 转基因植株的阳性检测及表达量检测 | 第25页 |
| 3.3 ShWRKY6 组织及诱导表达分析 | 第25-27页 |
| 3.4 超表达ShWRKY6 转基因植株抗旱性分析 | 第27-30页 |
| 3.4.1 超量表达ShWRKY6 提高了番茄苗期抗旱性 | 第27-29页 |
| 3.4.2 超量表达ShWRKY6 在干旱胁迫下改变了抗逆相关基因的表达 | 第29-30页 |
| 3.5 超表达ShWRKY6 转基因植株抗氧化胁迫分析 | 第30-31页 |
| 3.6 超表达ShWRKY6 转基因植株耐盐性分析 | 第31-33页 |
| 3.6.1 离体叶盘法分析转基因植株耐盐性 | 第31-32页 |
| 3.6.2 转基因植株苗期耐盐性分析 | 第32-33页 |
| 3.7 超表达ShWRKY6 转基因植株耐低温性分析 | 第33-35页 |
| 3.8 酵母双杂交结果分析 | 第35-37页 |
| 3.8.1 pGBKT7-ShWRKY6 重组载体的构建 | 第35页 |
| 3.8.2 钓饵蛋白的自激活验证 | 第35-36页 |
| 3.8.3 酵母双杂交挑斑凝胶电泳检测 | 第36页 |
| 3.8.4 钓库序列分析 | 第36-37页 |
| 3.8.5 点对点互作验证 | 第37页 |
| 3.9 ShWRKY6 在酵母中的转录激活分析 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 4.1 在番茄中超量表达ShWRKY6 提高了植株的抗逆性 | 第39-41页 |
| 4.2 后续工作设想 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-51页 |
| 附录 | 第51-54页 |
| 附录一：RNA提取及反转录 | 第51-52页 |
| 附录二：CTAB法提取植物总DNA | 第52-53页 |
| 附录三：实验所需引物 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
