| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 1 前言 | 第12-32页 |
| ·小G 蛋白的种类 | 第12-13页 |
| ·植物小G 蛋白的结构与调节机制 | 第13-15页 |
| ·植物小G 蛋白的结构 | 第13-14页 |
| ·植物小G 蛋白调节机制 | 第14-15页 |
| ·ROP 的系统进化分析 | 第15-16页 |
| ·植物中ROP 的功能及研究方法 | 第16-21页 |
| ·ROP 功能的研究方法 | 第16-17页 |
| ·ROP 控制花粉管的生长 | 第17页 |
| ·ROP 调节根毛的发育 | 第17-18页 |
| ·ROP 参与细胞表面激素信号的传导 | 第18-19页 |
| ·ROP 调节H202 的产生 | 第19页 |
| ·ROP 调节植物防御应答反应 | 第19-20页 |
| ·分化组织中的ROPs 与细胞的增长 | 第20-21页 |
| ·其他小G 蛋白及其功能 | 第21-23页 |
| ·Rab GTPase | 第21-22页 |
| ·Arf GTPase | 第22页 |
| ·Ran GTPase | 第22-23页 |
| ·植物基因工程技术与应用 | 第23-27页 |
| ·植物遗传转化方法 | 第23-24页 |
| ·马铃薯转化再生系统外植体选择 | 第24-26页 |
| ·影响马铃薯再生体系建立的因素 | 第26-27页 |
| ·马铃薯晚疫病的研究现状 | 第27-31页 |
| ·晚疫病的发生与危害 | 第27-29页 |
| ·马铃薯晚疫病抗性遗传学研究 | 第29页 |
| ·植物抗病的生理生化机制 | 第29-31页 |
| ·研究意义 | 第31-32页 |
| 2 马铃薯活体与离体叶片中防御酶系活性变化的比较 | 第32-36页 |
| ·前言 | 第32页 |
| ·材料与方法 | 第32-33页 |
| ·材料 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-35页 |
| ·活体和离体叶片SOD 活性变比较 | 第33-34页 |
| ·活体和离体叶片POD 活性变化比较 | 第34页 |
| ·活体和离体叶片CAT 活性变化比较 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-36页 |
| 3 马铃薯不同品种叶片再生体系的研究 | 第36-44页 |
| ·前言 | 第36页 |
| ·材料和方法 | 第36-37页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·培养基和培养条件 | 第36页 |
| ·愈伤组织的诱导和不定芽的分化 | 第36-37页 |
| ·结果统计 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-42页 |
| ·愈伤组织诱导 | 第37-40页 |
| ·不定芽的分化 | 第40-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 4 植物表达载体的构建及AtROP1 在马铃薯中功能的初步研究 | 第44-58页 |
| ·前言 | 第44页 |
| ·材料与方法 | 第44-45页 |
| ·菌株和载体 | 第44页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·马铃薯晚疫病病原菌 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·引物序列 | 第44-45页 |
| ·常用培养基和溶液的配制 | 第45-46页 |
| ·常用培养基配制 | 第45页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化所需试剂 | 第45页 |
| ·质粒DNA 的提取所需试剂 | 第45页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化所需试剂 | 第45页 |
| ·马铃薯晚疫病菌培养所需的培养基 | 第45页 |
| ·农杆菌介导的瞬时表达所需试剂 | 第45-46页 |
| ·DAB 染色所需试剂 | 第46页 |
| ·台盼蓝染色所需试剂 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-49页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第46页 |
| ·质粒DNA 提取 | 第46-47页 |
| ·质粒酶切体系 | 第47页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第47-48页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第48页 |
| ·PCR 体系及程序 | 第48-49页 |
| ·接种晚疫病菌 | 第49页 |
| ·农杆菌介导的瞬时表达 | 第49页 |
| ·DAB 染色 | 第49页 |
| ·台盼蓝染色 | 第49页 |
| ·遗传表达载体的构建 | 第49-52页 |
| ·表达载体p1300-GDR(GFP-DNROP1)的构建 | 第49-50页 |
| ·表达载体pBIG-CAROP1/DNROP1/ROP1 的构建 | 第50-51页 |
| ·拟南芥AtROP1 的三种突变体 | 第51-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-57页 |
| ·表达载体p1300-GDR(GFP-DNROP1)的构建 | 第52页 |
| ·表达载体pBIG-CAROP1/DNROP1/ROP1 的构建 | 第52-53页 |
| ·质粒转化农杆菌及PCR 鉴定 | 第53-54页 |
| ·农杆菌介导的瞬时表达 | 第54-57页 |
| ·讨论 | 第57-58页 |
| 5 农杆菌转化马铃薯及转基因植株的分子鉴定 | 第58-68页 |
| ·前言 | 第58页 |
| ·材料和方法 | 第58-60页 |
| ·供试材料 | 第58页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第58页 |
| ·酶和试剂 | 第58-59页 |
| ·PCR 引物 | 第59页 |
| ·常用试剂及配置 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-62页 |
| ·根癌农杆菌转化马铃薯 | 第60页 |
| ·植物组织DNA 提取 | 第60-61页 |
| ·植物组织总RNA 提取 | 第61页 |
| ·PCR-Southern 杂交 | 第61-62页 |
| ·植物组织蛋白质提取 | 第62页 |
| ·Western 印迹分析 | 第62页 |
| ·结果与分析 | 第62-67页 |
| ·转基因马铃薯的获得 | 第62-63页 |
| ·转基因马铃薯的分子检测 | 第63-67页 |
| ·讨论 | 第67-68页 |
| 6 拟南芥AtRop1 基因在马铃薯中的功能研究 | 第68-75页 |
| ·前言 | 第68页 |
| ·材料与方法 | 第68-70页 |
| ·实验材料 | 第68页 |
| ·试剂配置 | 第68-69页 |
| ·实验方法 | 第69-70页 |
| ·结果与分析 | 第70-73页 |
| ·转基因马铃薯中StROP1 的功能分析 | 第70-73页 |
| ·讨论 | 第73-75页 |
| 7 马铃薯中小G 蛋白StRac1 的表达及其表达载体的构建 | 第75-84页 |
| ·前言 | 第75页 |
| ·材料与方法 | 第75-77页 |
| ·菌种与载体 | 第75页 |
| ·酶和试剂 | 第75页 |
| ·PCR 引物 | 第75页 |
| ·pLG-CARac/DNRac/Rac 的构建策略 | 第75-77页 |
| ·表达载体p1300-GFP-CARac/DNRac/Rac 的构建策略 | 第77页 |
| ·结果与分析 | 第77-83页 |
| ·马铃薯StRac1 的cDNA 序列聚类分析 | 第77-78页 |
| ·马铃薯中StRac1 的克隆及其与植物中已知的小G 蛋白的同源性比较 | 第78-80页 |
| ·马铃薯中StRac1 基因的表达谱分析 | 第80-81页 |
| ·StRac1 遗传转化中间载体pLG-CARac/DNRac/Rac 的酶切鉴定 | 第81-82页 |
| ·表达载体p1300-GFP-CARac/DNRac/Rac 的酶切鉴定 | 第82页 |
| ·农杆菌质粒p1300-GFP-CARac/DNRac/Rac 的PCR 鉴定 | 第82-83页 |
| ·讨论 | 第83-84页 |
| 全文讨论 | 第84-87页 |
| 结论 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-102页 |
| 作者简介 | 第102页 |
