摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
缩写词中英文对照 | 第13-15页 |
前言 | 第15-18页 |
1.材料与方法 | 第18-32页 |
1.1 体外培养H446细胞系 | 第18-21页 |
1.1.1 复苏细胞 | 第18页 |
1.1.2 细胞传代 | 第18-19页 |
1.1.3 冻存细胞 | 第19页 |
1.1.4 干细胞培养 | 第19-21页 |
1.2 H446细胞分组成球实验 | 第21-22页 |
1.2.1 细胞成球实验 | 第21-22页 |
1.3 实时荧光定量Real-time PCR与半定量RT-PCR | 第22-25页 |
1.3.1 细胞总RNA的提取 | 第22页 |
1.3.2 检测总RNA的质量与浓度 | 第22页 |
1.3.3 合成c DNA | 第22-23页 |
1.3.4 实时定量Real-time PCR实验 | 第23-24页 |
1.3.5 半定量RT-PCR | 第24-25页 |
1.4 蛋白质免疫印迹实验(Western-blot)检测抗凋亡蛋白 | 第25-28页 |
1.4.1 提取细胞总蛋白 | 第25-26页 |
1.4.2 蛋白浓度的测定 | 第26-27页 |
1.4.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western-blot实验 | 第27-28页 |
1.5 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第28-29页 |
1.5.1 流式细胞仪实验 | 第28-29页 |
1.6 酶联免疫吸附测定检测细胞凋亡 | 第29-30页 |
1.6.1 酶联免疫吸附测定实验 | 第29-30页 |
1.7 慢病毒细胞转染 | 第30-32页 |
1.7.1 慢病毒转染预实验 | 第30-31页 |
1.7.2 慢病毒正式转染试验 | 第31-32页 |
2.结果 | 第32-40页 |
2.1 干细胞的体外培养、扩增及成球能力 | 第32页 |
2.2 Casticin与TRAIL单独及联合作用于H446干细胞样细胞减弱其成球能力 | 第32-33页 |
2.3 Casticin与TRAIL单独及联合作用于H446干细胞样细胞促进其凋亡 | 第33-34页 |
2.4 慢病毒在普通H446细胞系中的表达效率及在H446干细胞样细胞中的过敲除效率都达 90% | 第34页 |
2.5 Fox M1是Casticin诱导H446干细胞凋亡的关键基因 | 第34-40页 |
3.讨论 | 第40-43页 |
4.结论 | 第43-44页 |
5.参考文献 | 第44-48页 |
6.综述 肿瘤干细胞与EMT的关系 | 第48-56页 |
参考文献 | 第52-56页 |
本课题受以下基金项目资助 | 第56页 |
硕士期间的成果 | 第56-57页 |
致谢 | 第57页 |