| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 研究现状、成果 | 第13-15页 |
| 研究目的、方法 | 第15-17页 |
| 一、NUPR1在肺癌的表达 | 第17-30页 |
| 1.1 对象和方法 | 第17-27页 |
| 1.1.1 细胞系 | 第17-18页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第18页 |
| 1.1.3 主要试剂与耗材 | 第18-19页 |
| 1.1.4 实时定量PCR | 第19-22页 |
| 1.1.5 Western blot与抗体 | 第22-25页 |
| 1.1.6 免疫组织化学染色 | 第25-26页 |
| 1.1.7 统计分析 | 第26-27页 |
| 1.2 结果 | 第27-28页 |
| 1.2.1 NUPR1在肺癌组织中高表达 | 第27-28页 |
| 1.3 讨论 | 第28-29页 |
| 1.3.1 NUPR1在肺癌高表达 | 第28-29页 |
| 1.3.2 NUPR1在肺癌中高表达的意义 | 第29页 |
| 1.4 小结 | 第29-30页 |
| 二、下调NUPR1诱导肺癌细胞发生自噬性囊泡 | 第30-55页 |
| 2.1 对象和方法 | 第30-40页 |
| 2.1.1 细胞系 | 第30页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.3 主要试剂与耗材 | 第31-32页 |
| 2.1.4 质粒构建 | 第32-34页 |
| 2.1.5 包装病毒 | 第34页 |
| 2.1.6 实时定量PCR | 第34-35页 |
| 2.1.7 Western blot与抗体 | 第35-37页 |
| 2.1.8 活细胞染色 | 第37-38页 |
| 2.1.9 BrdU增殖实验 | 第38-39页 |
| 2.1.10 β-半乳糖苷酶染色实验 | 第39页 |
| 2.1.11 软琼脂克隆形成实验 | 第39-40页 |
| 2.1.12 细胞周期检测 | 第40页 |
| 2.2 结果 | 第40-49页 |
| 2.2.1 下调NUPR1诱导肺癌细胞出现囊泡 | 第40-41页 |
| 2.2.2 下调NUPR1诱导肺癌细胞产生的囊泡是细胞内的酸性结构 | 第41-43页 |
| 2.2.3 下调NUPR1诱导肺癌细胞产生的囊泡来源于自噬溶酶体 | 第43-44页 |
| 2.2.4 抑制自噬能消除下调NUPR1诱导肺癌细胞产生的囊泡 | 第44-45页 |
| 2.2.5 下调NUPR1诱导肺癌细胞发生细胞周期阻滞 | 第45-46页 |
| 2.2.6 下调NUPR1诱导早熟性衰老，削弱细胞增殖能力和成克隆能力 | 第46-48页 |
| 2.2.7 下调NUPR1削弱肺癌细胞体内成瘤能力 | 第48-49页 |
| 2.3 讨论 | 第49-54页 |
| 2.3.1 下调NUPR1打破肺癌细胞自噬功能的平衡 | 第49-51页 |
| 2.3.2 下调NUPR1诱导肺癌细胞早熟性衰老 | 第51-52页 |
| 2.3.3 下调NUPR1降低肺癌细胞的恶性能力 | 第52-54页 |
| 2.4 小结 | 第54-55页 |
| 三、NUPR1通过直接调控SNAP25干预自噬途径 | 第55-77页 |
| 3.1 对象和方法 | 第55-63页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第55页 |
| 3.1.2 配制试剂 | 第55-56页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第56-57页 |
| 3.1.4 Western blot | 第57页 |
| 3.1.5 荧光素酶报告基因分析 | 第57-58页 |
| 3.1.6 蛋白免疫沉淀 | 第58-59页 |
| 3.1.7 染色质免疫沉淀 | 第59-61页 |
| 3.1.8 PLA实验 | 第61-62页 |
| 3.1.9 银染实验 | 第62-63页 |
| 3.2 结果 | 第63-72页 |
| 3.2.1 下调NUPR1后基因表达谱变化 | 第63-64页 |
| 3.2.2 下调SNAP25诱导肺癌细胞出现自噬相关囊泡 | 第64-66页 |
| 3.2.3 下调SNAP25诱导肺癌细胞发生细胞周期阻滞，诱导细胞早熟性衰老，削弱肺癌细胞增殖能力 | 第66-68页 |
| 3.2.4 SNAP25是NUPR1的靶基因 | 第68-69页 |
| 3.2.5 SNAP25通过结合VAMP8完成自噬溶酶体外排释放功能 | 第69-72页 |
| 3.3 讨论 | 第72-76页 |
| 3.3.1 SNAP25可部分恢复下调NUPR1诱导的自噬性囊泡 | 第72-73页 |
| 3.3.2 VAMP8协助SNAP25完成自噬溶酶体途径的外排功能 | 第73-74页 |
| 3.3.3 自噬激活与自噬溶酶体消融之间平衡的重要意义 | 第74-76页 |
| 3.4 小结 | 第76-77页 |
| 全文结论 | 第77-78页 |
| 论文创新点 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-87页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第87-88页 |
| 综述 细胞自噬在肿瘤发生发展中的研究进展 | 第88-113页 |
| 综述参考文献 | 第105-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 个人简历 | 第114页 |
