| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 第一部分 有效siRNA的筛选及其对肿瘤细胞侵袭转移的影响 | 第15-34页 |
| 1 材料 | 第15-19页 |
| ·主要仪器 | 第15-16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·试剂和溶液的配制 | 第17-19页 |
| 2 方法 | 第19-26页 |
| ·siRNA的设计与合成 | 第19-20页 |
| ·细胞培养 | 第20页 |
| ·转染条件的优化 | 第20-21页 |
| ·有效siRNA片段的筛选 | 第21-25页 |
| ·MTT细胞增殖实验 | 第25页 |
| ·肿瘤侵袭实验 | 第25-26页 |
| ·统计学处理 | 第26页 |
| 3 结果 | 第26-31页 |
| ·FAM-siRNA检测MCF-7细胞转染效率 | 第26-27页 |
| ·RT-PCR检测乙酰肝素酶mRNA表达 | 第27-28页 |
| ·Western Blot检测乙酰肝素酶的蛋白表达 | 第28-29页 |
| ·MTT检测乙酰肝素酶特异性的siRNA对MCF-7细胞增殖的影响 | 第29-31页 |
| ·肿瘤侵袭实验 | 第31页 |
| 4 讨论 | 第31-34页 |
| 第二部分 叶酸-壳聚糖SiRNA纳米复合物抗肿瘤细胞乙酰肝素酶的靶向性研究 | 第34-48页 |
| 1 材料 | 第34-35页 |
| ·主要仪器 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·试剂和溶液的配制 | 第34-35页 |
| 2 方法 | 第35-37页 |
| ·叶酸—壳聚糖复合体的制备 | 第35-36页 |
| ·载SiRNA叶酸—壳聚糖纳米复合物(FA-CS-SiRNA)的制备 | 第36页 |
| ·细胞培养 | 第36页 |
| ·转染MCF—7细胞并检测沉默效率 | 第36-37页 |
| ·测定沉默效率 | 第37页 |
| ·MTT实验 | 第37页 |
| ·肿瘤细胞侵袭实验 | 第37页 |
| ·统计学处理 | 第37页 |
| 3 结果 | 第37-44页 |
| ·叶酸标准曲线的制备及FA-CS偶联比的计算 | 第37-38页 |
| ·FA、CS和FA-CS红外吸收光谱 | 第38-40页 |
| ·FA-CS-siRNA纳米复合物形态、粒径及zeta电位的测定 | 第40页 |
| ·FA-CS-siRNA纳米复合物包封率的测定 | 第40-41页 |
| ·RT-PCR及Western Blot检测乙酰肝素酶表达水平的变化 | 第41-42页 |
| ·MTT细胞增殖情况 | 第42-43页 |
| ·肿瘤细胞侵袭力的检测 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-48页 |
| 全文总结 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 附带综述 | 第55-67页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
