| 中文摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 缩略语/符号说明 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 研究现状、成果 | 第15-16页 |
| 研究目的、方法 | 第16-17页 |
| 一、二甲双胍对人乳腺癌细胞MCF-7 作用的实验研究 | 第17-25页 |
| 1.1 对象和方法 | 第17-19页 |
| 1.1.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 1.1.1.1 细胞系 | 第17页 |
| 1.1.1.2 主要试剂 | 第17页 |
| 1.1.1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 1.1.2 实验方法 | 第18-19页 |
| 1.1.2.1 细胞培养方法 | 第18-19页 |
| 1.1.2.2 MTT法检测二甲双胍对MCF-7 细胞增殖的影响 | 第19页 |
| 1.1.3 统计学方法 | 第19页 |
| 1.2 结果 | 第19-21页 |
| 1.2.1 二甲双胍干预后MCF-7 细胞形态学的变化 | 第19-20页 |
| 1.2.2 二甲双胍抑制乳腺癌细胞生长具有浓度依赖性 | 第20页 |
| 1.2.3 二甲双胍抑制乳腺癌细胞生长具有时间依赖性 | 第20-21页 |
| 1.3 讨论 | 第21-24页 |
| 1.3.1 二甲双胍对MCF-7 细胞的增殖作用的影响 | 第21-22页 |
| 1.3.2 二甲双胍治疗乳腺癌的可能机制 | 第22-24页 |
| 1.4 小结 | 第24-25页 |
| 二、mi R-27a及AMPKα2 在二甲双胍干预人乳腺癌细胞MCF-7 增殖中的作用 | 第25-46页 |
| 2.1 对象和方法 | 第25-33页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1.1 主要试剂 | 第25-26页 |
| 2.1.1.2 主要仪器 | 第26页 |
| 2.1.1.3 试剂的配置 | 第26-27页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第27-33页 |
| 2.1.2.1 二甲双胍干预MCF-7 细胞 | 第27页 |
| 2.1.2.2 总RNA提取的步骤 | 第27-28页 |
| 2.1.2.3 实时荧光定量PCR检测miR-27a表达的变化 | 第28页 |
| 2.1.2.4 实时荧光定量PCR检测AMPKα2 mRNA表达的变化 | 第28-29页 |
| 2.1.2.5 总蛋白的提取及浓度测定 | 第29-30页 |
| 2.1.2.6 Western Blotting检测步骤 | 第30-32页 |
| 2.1.2.7 不同的RNA oligo片段转染MCF-7 细胞 | 第32页 |
| 2.1.2.8 MTT法检测转染不同RNA oligo片段后MCF-7 增殖情况 | 第32-33页 |
| 2.1.3 统计学方法 | 第33页 |
| 2.2 结果 | 第33-40页 |
| 2.2.1 二甲双胍可使mi R-27a表达降低，AMPKα2 在m RNA和蛋白水平表达升高 | 第33-34页 |
| 2.2.2 二甲双胍可激活caspase-3 分解，使裂解的caspase-3 表达增多 | 第34-35页 |
| 2.2.3 转染效率检测 | 第35-36页 |
| 2.2.4 转染miR-27a mimics片段使得AMPKα2 因子表达降低；转染mi R-27ainhibitor片段，使AMPKα2 因子表达上调 | 第36页 |
| 2.2.5 转染阴性对照并未引起miR-27a表达变化，也未引起AMPKα2 表达的变化 | 第36-37页 |
| 2.2.6 各组AMPKα2 在蛋白质水平的变化与mRNA变化结果相一致 | 第37-38页 |
| 2.2.7 过表达miR-27a，caspase-3 表达减少；沉默miR-27a则caspase-3 表达高 | 第38-39页 |
| 2.2.8 MTT结果表明，过表达miR-27a能够促进MCF-7 细胞的生长 | 第39-40页 |
| 2.3 讨论 | 第40-45页 |
| 2.3.1 mi RNAs与肿瘤 | 第40-41页 |
| 2.3.1.1 miRNAs概述 | 第40页 |
| 2.3.1.2 miR-27a与乳腺癌 | 第40-41页 |
| 2.3.2 AMPKα2 与肿瘤 | 第41-43页 |
| 2.3.2.1 AMPK通路的概述 | 第41页 |
| 2.3.2.2AMPKα2 在乳腺癌细胞增殖和细胞凋亡中的研究 | 第41-43页 |
| 2.3.3 caspase家族与肿瘤 | 第43-44页 |
| 2.3.4 P53与肿瘤 | 第44-45页 |
| 2.4 小结 | 第45-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第51-52页 |
| 综述 miR-27a研究进展 | 第52-65页 |
| 综述参考文献 | 第60-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
