| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 第一章 引言 | 第9-14页 |
| 1.1 多环芳烃的性质及污染性 | 第9页 |
| 1.2 多环芳烃——萘的降解机理分析 | 第9-11页 |
| 1.3 铬的性质及污染性和毒性 | 第11-12页 |
| 1.4 可还原六价铬的微生物 | 第12-13页 |
| 1.5 可还原六价铬的相关酶 | 第13页 |
| 1.6 在微生物中六价铬铬还原的机理 | 第13-14页 |
| 1.7 本次研究的立题依据及研究目的 | 第14页 |
| 第二章 材料和方法 | 第14-21页 |
| 2.1 土样的采集 | 第14-15页 |
| 2.2 筛选,富集及生长培养基的配置 | 第15页 |
| 2.3 菌株的富集及筛选 | 第15-16页 |
| 2.4 单菌株的再培养 | 第16页 |
| 2.5 单菌株的鉴定及生理生化特性的测性 | 第16页 |
| 2.5.1 单菌株的形态及生理生化测定 | 第16页 |
| 2.5.2 单菌株的16S rRNA测序及系统发育树的构建 | 第16页 |
| 2.6 LZ-4号菌株的Cr6+的还原实验 | 第16-17页 |
| 2.7 电子供体实验和化学反应实验 | 第17页 |
| 2.7.1 电子供体实验 | 第17页 |
| 2.7.2 化学反应实验 | 第17页 |
| 2.8 铬含量的检测以及利用高效液相色谱(HPLC)检测萘的降解 | 第17-18页 |
| 2.8.1 铬含量的检测方法及步骤 | 第17页 |
| 2.8.2 萘含量的检测 | 第17-18页 |
| 2.9 LZ-4号菌株全基因组的测序和功能基因的注释 | 第18页 |
| 2.9.1 LZ-4号菌株的基因组DNA的提取 | 第18页 |
| 2.9.2 LZ-4号菌株的全基因组测序及基因注释 | 第18页 |
| 2.10 Nah E蛋白和Nah G蛋白的纯化和结晶 | 第18-20页 |
| 2.10.1 Nah E和Nah G表达载体的构建 | 第18页 |
| 2.10.2 His_6-Nah E和Nah G-His_6蛋白的表达 | 第18-19页 |
| 2.10.3 His_6-Nah E和Nah G-His_6蛋白的纯化 | 第19页 |
| 2.10.4 His_6-Nah E和Nah G-His_6蛋白的结晶 | 第19页 |
| 2.10.5 Nah E蛋白的结晶数据收集 | 第19-20页 |
| 2.11 Nah G蛋白还原Cr6+的相关实验 | 第20页 |
| 2.11.1 Nah G蛋白促进大肠杆菌还原Cr6~+实验 | 第20页 |
| 2.11.2 Nah G蛋白酶活还原Cr6~+实验 | 第20页 |
| 2.12 实时定量PCR检测nahG基因的表达情况 | 第20-21页 |
| 2.12.1 LZ-4号菌株的总RNA的提取 | 第20页 |
| 2.12.2 实时定量PCR | 第20-21页 |
| 第三章 结果 | 第21-37页 |
| 3.1 萘降解及铬抗性菌的富集及分离 | 第21页 |
| 3.2 LZ-4号菌株的进化分析及表型特征分析 | 第21-23页 |
| 3.3 LZ-4号菌株还原Cr6+的相关实验 | 第23-25页 |
| 3.3.1 LZ-4号菌株在以萘和葡萄糖分别为碳源的BH培养基中生长情况 | 第23页 |
| 3.3.2 LZ-4号菌株利用不同碳源还原200μ M Cr6~+的能力 | 第23-24页 |
| 3.3.3 LZ-4号菌株利用不同碳源还原500μM Cr~(6+)的能力 | 第24页 |
| 3.3.4 LZ-4号菌株利用不同碳源还原1mM Cr~(6+)的能力 | 第24-25页 |
| 3.4 LZ-4号菌株的萘降解情况 | 第25-26页 |
| 3.5 不同电子供体与铬还原的关系 | 第26-28页 |
| 3.5.1 不同中间产物与Cr~(6+)的化学反应 | 第26-27页 |
| 3.5.2 电子供体对LZ-4号菌株还原的Cr~(6+)影响 | 第27-28页 |
| 3.6 LZ-4号菌的全基因组测序 | 第28-30页 |
| 3.7 萘降解相关蛋白的表达与纯化 | 第30-35页 |
| 3.7.1 Nah E蛋白的纯化,表达及结晶 | 第30-33页 |
| 3.7.2 Nah G蛋白的纯化,表达及结晶 | 第33-35页 |
| 3.8 Nah G蛋白还原Cr6+ | 第35-37页 |
| 3.8.1 NahG蛋白还原Cr~(6+)的酶活实验 | 第35-36页 |
| 3.8.2 Nah G蛋白促进大肠杆菌还原Cr~(6+)实验 | 第36-37页 |
| 第四章 讨论 | 第37-43页 |
| 第五章 结论 | 第43页 |
| 第六章 硕士期间完成的其它课题(已发表) | 第43-51页 |
| 6.1 研究课题 | 第43页 |
| 6.2 研究背景 | 第43-45页 |
| 6.2.1 硫酸盐还原菌背景介绍 | 第43-44页 |
| 6.2.2 Desulfovibrio vulgaris Hildenborough的背景介绍 | 第44页 |
| 6.2.3 Desulfovibrio vulgaris Hildenborough对电子供体的选择性 | 第44-45页 |
| 6.2.4 本课题的立体依据和方法 | 第45页 |
| 6.3 实验方法及材料 | 第45-47页 |
| 6.3.1 菌株和培养基 | 第45页 |
| 6.3.2 连续培养发生器 | 第45-46页 |
| 6.3.3 细菌生长,氢气和乳酸消耗的分析 | 第46-47页 |
| 6.4 实验结果 | 第47-49页 |
| 6.4.1 乳酸作为单独电子供体 | 第47-48页 |
| 6.4.2 氢气作为唯一的电子供体 | 第48页 |
| 6.4.3 乳酸与氢气共同作为电子供体 | 第48-49页 |
| 6.5 实验讨论 | 第49-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 在学期间的研究成果 | 第61页 |
