摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
缩略语表 | 第11-16页 |
引言 | 第16-19页 |
第一部分 羊布鲁杆菌Omp31诱导BV-2小胶质细胞自噬 | 第19-45页 |
材料与方法 | 第19-33页 |
1.材料 | 第19-22页 |
1.1 细胞株 | 第19页 |
1.2 羊布鲁杆菌Omp31 | 第19页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第19-20页 |
1.4 主要实验仪器 | 第20-21页 |
1.5 主要溶液配制 | 第21-22页 |
2. 方法 | 第22-33页 |
2.1 BV-2 细胞的培养 | 第23-24页 |
2.2 Omp31 处理BV-2 细胞 | 第24页 |
2.3 免疫印迹法(Western blot法)检测LC3B蛋白的表达 | 第24-27页 |
2.4 RT-q PCR检测BV-2 细胞LC3B m RNA相对表达 | 第27-30页 |
2.5 透射电镜观察BV-2 细胞自噬体 | 第30-31页 |
2.6 ELISA检测BV-2 细胞培养液中TNF-α、IL-6、IL-10 的含量 | 第31-33页 |
2.7 统计学分析与图像处理 | 第33页 |
结果 | 第33-41页 |
1.不同浓度Omp31对LC3B蛋白含量的影响 | 第33-34页 |
2.不同浓度Omp31对LC3B mRNA表达的影响 | 第34-35页 |
3.不同浓度Omp31对BV-2 细胞自噬体形成的影响 | 第35-36页 |
4.不同浓度组BV-2细胞表达TNF-α、IL-6、IL-10 的变化 | 第36-37页 |
5.Omp31 处理BV-2细胞不同时间LC3B蛋白含量的变化 | 第37-38页 |
6.Omp31 处理BV-2细胞不同时间LC3B mRNA相对表达量的变化 | 第38-39页 |
7.Omp31 处理BV-2细胞不同时间对其自噬体形成的影响 | 第39-40页 |
8.不同时间组BV-2细胞表达TNF-α、IL-6、IL-10 的变化 | 第40-41页 |
讨论 | 第41-44页 |
结论 | 第44-45页 |
第二部分 Omp31 诱导的自噬对BV-2细胞NF-κB(P65)通路的作用 | 第45-70页 |
材料与方法 | 第45-55页 |
1.材料 | 第45-49页 |
1.1 细胞株 | 第45页 |
1.2 羊布鲁杆菌Omp31 | 第45页 |
1.3 主要试剂及耗材 | 第45-47页 |
1.4 主要实验仪器 | 第47-48页 |
1.5 主要溶液配制 | 第48-49页 |
2. 方法 | 第49-55页 |
2.1 BV-2 细胞的培养 | 第50页 |
2.2 BV-2 细胞分组与处理 | 第50-51页 |
2.3 Western blot法检测自噬相关蛋白、NF-κB信号通路蛋白的表达 | 第51-52页 |
2.4 RT-q PCR检测BV-2 细胞(LC3B、Beclin-1、TNF-α) m RNA的相对表达 | 第52页 |
2.5 透射电镜观察BV-2 细胞自噬体 | 第52页 |
2.6 ELISA检测各组BV-2 细胞培养液中TNF-α 的含量 | 第52页 |
2.7 免疫荧光技术检测Phospho-NF-κB(P65)蛋白入核 | 第52-55页 |
2.8 统计学分析与图像处理 | 第55页 |
结果 | 第55-66页 |
1.不同浓度Rapa、3-MA对LC3BⅡ蛋白含量的影响 | 第55-56页 |
2.BV-2 细胞自噬相关蛋白表达的变化 | 第56-60页 |
2.1 LC3B蛋白含量的变化 | 第57-58页 |
2.2 Beclin-1蛋白表达的变化 | 第58-59页 |
2.3 P62 蛋白含量的变化 | 第59-60页 |
3.BV-2 细胞(LC3B、Beclin-1)m RNA表达的变化 | 第60-61页 |
4.透射电镜结果 | 第61-62页 |
5.IκBα、NF-κB(P65)蛋白含量的变化 | 第62-64页 |
6.激光共聚焦显微镜观察p-P65蛋白入核结果 | 第64页 |
7.TNF-α表达的变化 | 第64-65页 |
8.TNF-α mRNA相对表达量的变化 | 第65-66页 |
讨论 | 第66-69页 |
结论 | 第69-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
文献综述 | 第77-92页 |
综述参考文献 | 第85-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第93-94页 |
攻读硕士学位期间参与研究和申报的课题 | 第94-95页 |
攻读硕士学位期间参加的学术会议 | 第95页 |