| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 大肠杆菌O157 的研究概况 | 第10-15页 |
| ·病原特征 | 第10-11页 |
| ·流行病学 | 第11-12页 |
| ·致病机理 | 第12-14页 |
| ·治疗与防控 | 第14-15页 |
| 2 噬菌体裂解酶的研究进展 | 第15-18页 |
| ·噬菌体裂解酶的分类 | 第15-16页 |
| ·裂解酶的结构域 | 第16页 |
| ·裂解酶的作用机制 | 第16页 |
| ·噬菌体裂解酶的作用特点 | 第16-17页 |
| ·噬菌体裂解酶的作用效果 | 第17-18页 |
| ·发展趋势 | 第18页 |
| 3 本文的研究目的及意义 | 第18-19页 |
| 第二章 大肠杆菌 O157 Stx 噬菌体裂解酶的表达与纯化 | 第19-41页 |
| 1 材料与方法 | 第20-29页 |
| ·材料 | 第20页 |
| ·目的片段的扩增 | 第20-22页 |
| ·载体构建和重组菌株的诱导表达 | 第22-24页 |
| ·SDS-PAGE 分析 | 第24-25页 |
| ·平板试验 | 第25-26页 |
| ·裂解酶二级结构和三级结构的生物信息学分析 | 第26页 |
| ·含pET28a-LysEC1 质粒的重组菌表达诱导条件的优化 | 第26-27页 |
| ·裂解酶的纯化 | 第27-28页 |
| ·重组蛋白LysEC1 的Western-blot 分析 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29-39页 |
| ·裂解酶蛋白的信号肽结构分析 | 第29-30页 |
| ·质粒的构建和测序鉴定 | 第30-31页 |
| ·蛋白表达产物 | 第31-32页 |
| ·平板裂解试验 | 第32页 |
| ·LysEC1 二级结构和三级结构的生物信息学分析 | 第32-34页 |
| ·含pET28a-LysEC1 质粒的重组菌表达诱导条件的优化 | 第34-37页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白浓度测定 | 第38页 |
| ·重组蛋白LysEC1 的Western-blot 分析 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章: 重组蛋白 LysEC1 的酶活性研究 | 第41-50页 |
| 1 材料与方法 | 第42-44页 |
| ·菌株和质粒 | 第42页 |
| ·主要酶和试剂 | 第42页 |
| ·平板裂解实验 | 第42页 |
| ·LysEC1 的活性单位 | 第42-43页 |
| ·最佳pH 的确定 | 第43页 |
| ·最佳温度的确定 | 第43页 |
| ·裂解谱和裂解效率的检测 | 第43-44页 |
| 2 结果 | 第44-48页 |
| ·LysEC1 的平板裂解实验 | 第44-45页 |
| ·LysEC1 的活性单位 | 第45页 |
| ·LysEC1 最佳pH 的测定 | 第45-46页 |
| ·LysEC1 最佳温度的测定 | 第46-47页 |
| ·LysEC1 对菌株的裂解谱和裂解效率 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 全文总结 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-58页 |
| 附录1 试剂配制 | 第58-60页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
