| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第10-17页 |
| 1.1 研究背景 | 第10-15页 |
| 1.1.1 肿瘤多药耐药机制研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.2 外泌体的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.1.3 泛素羧基末端水解酶L1研究进展 | 第15页 |
| 1.2 研究意义 | 第15-16页 |
| 1.3 研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 泛素羧基末端水解酶L1在乳腺癌耐药机制研究 | 第17-27页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第17页 |
| 2.1.2 试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 仪器 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-23页 |
| 2.2.1 试剂配置 | 第18-19页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第19-20页 |
| 2.2.3 siRNA干扰实验 | 第20页 |
| 2.2.4 细胞药敏性检测实验 | 第20-21页 |
| 2.2.5 激光共聚焦显微镜 | 第21页 |
| 2.2.6 阿霉素分布实验 | 第21页 |
| 2.2.7 细胞免疫荧光染色 | 第21-22页 |
| 2.2.8 细胞总蛋白的提取 | 第22页 |
| 2.2.9 蛋白定量检测 | 第22页 |
| 2.2.10 蛋白免疫印迹检测 | 第22-23页 |
| 2.2.11 统计学分析 | 第23页 |
| 2.3 实验结果与讨论 | 第23-26页 |
| 2.3.1 CTB检测乳腺癌细胞对阿霉素的药物敏感性 | 第23-24页 |
| 2.3.2 阿霉素分布实验 | 第24页 |
| 2.3.3 免疫荧光染色比较UCH-L1和P-gp蛋白在两株细胞中的表达 | 第24-25页 |
| 2.3.4 蛋白免疫印迹检测UCH-L1和P-gp蛋白的表达 | 第25-26页 |
| 2.4 本章小结 | 第26-27页 |
| 第三章 含UCH-L1的外泌体在乳腺癌细胞耐药性状传递的作用 | 第27-38页 |
| 3.1 实验材料 | 第27-29页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第27页 |
| 3.1.2 试剂 | 第27-28页 |
| 3.1.3 仪器 | 第28-29页 |
| 3.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 3.2.1 细胞培养基配置 | 第29页 |
| 3.2.2 细胞培养 | 第29页 |
| 3.2.3 细胞外泌体收集 | 第29页 |
| 3.2.4 外泌体总蛋白的提取 | 第29-30页 |
| 3.2.5 蛋白定量检测 | 第30页 |
| 3.2.6 蛋白免疫印迹检测 | 第30页 |
| 3.2.7 外泌体的免疫荧光检测 | 第30页 |
| 3.2.8 PKH-67 染色示踪外泌体 | 第30-31页 |
| 3.2.9 共培养细胞药敏性检测实验 | 第31页 |
| 3.2.10 流式细胞仪检测共培养后细胞中蛋白表达变化 | 第31-32页 |
| 3.2.11 统计学分析 | 第32页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第32-37页 |
| 3.3.1 蛋白免疫印迹检测UCH-L1和P-gp在外泌体中表达水平 | 第32-33页 |
| 3.3.2 免疫荧光共定位外泌体中CD63和UCH-L1蛋白 | 第33-34页 |
| 3.3.3 PKH-67 标记外泌体的体外共培养 | 第34页 |
| 3.3.4 MCF7/WT与MCF7/ADM来源的外泌体共培养后药物敏感性 | 第34-35页 |
| 3.3.5 流式细胞仪检测共培养细胞中UCH-L1和P-gp蛋白水平 | 第35-36页 |
| 3.3.6 蛋白免疫印迹检测共培养细胞ERK1/2 磷酸化水平 | 第36-37页 |
| 3.4 本章小结 | 第37-38页 |
| 第四章 乳腺癌患者外周血外泌体与化疗疗效相关性研究 | 第38-46页 |
| 4.1 临床病例及随访 | 第38页 |
| 4.2 实验材料 | 第38-39页 |
| 4.2.1 试剂 | 第38-39页 |
| 4.2.2 仪器 | 第39页 |
| 4.3 实验方法 | 第39-41页 |
| 4.3.1 免疫组织化学 | 第39-40页 |
| 4.3.2 血浆外泌体分离 | 第40页 |
| 4.3.3 流式细胞仪检测血浆外泌体荧光标记蛋白 | 第40-41页 |
| 4.3.4 统计学分析 | 第41页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第41-45页 |
| 4.4.1 乳腺癌患者化疗疗效分析 | 第41-42页 |
| 4.4.2 免疫组织化学检测乳腺癌组织中UCH-L1表达水平 | 第42页 |
| 4.4.3 流式细胞仪检测血浆外泌体UCH-L1蛋白水平 | 第42-43页 |
| 4.4.4 外泌体UCH-L1与临床相关性分析 | 第43-45页 |
| 4.5 本章小结 | 第45-46页 |
| 主要结论与展望 | 第46-48页 |
| 主要结论 | 第46页 |
| 展望 | 第46-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第53页 |
