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木薯块根有色体类胡萝卜素积累的分子机理研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
文献综述第12-24页
    1.1 质体及有色体研究进展第12-14页
        1.1.1 质体研究进展第12页
        1.1.2 有色体研究进展第12-14页
            1.1.2.1 有色体的新陈代谢第12-13页
            1.1.2.2 有色体的形态第13页
            1.1.2.3 有色体的分化第13-14页
            1.1.2.4 有色体的分离提取第14页
    1.2 植物类胡萝卜素的代谢途径第14-18页
        1.2.1 类胡萝卜素概述第14-15页
        1.2.2 植物类胡萝卜的生物合成第15-16页
        1.2.3 类胡萝卜素的降解第16-18页
    1.3 类胡萝卜素的调控第18-19页
    1.4 不同外界条件对类胡萝卜素代谢的相关研究第19-21页
        1.4.1 ABA对类胡萝卜素的调控第20页
        1.4.2 干旱对类胡萝卜素含量的影响第20-21页
    1.5 质体蛋白质组学研究进展第21页
        1.5.1 木薯块根有色体研究进展第21页
    1.6 研究目的与意义第21-23页
    1.7 技术路线第23-24页
2. 实验材料与方法第24-37页
    2.1 实验材料第24页
    2.2 主要化学试剂第24-26页
    2.3 实验处理第26-27页
        2.3.1 干旱处理第26页
        2.3.2 外源喷施ABA及抑制剂钨酸钠第26-27页
    2.4 实验方法第27-37页
        2.4.1 β-类胡萝卜素的提取第27-28页
        2.4.2 RNA提取与实时定量PCR分析第28-29页
        2.4.3 提取的蛋白质定量及Western blot杂交分析第29-31页
        2.4.4 木薯块根有色体的提取第31-32页
            2.4.4.1 Percoll密度梯度离心法第31-32页
            2.4.4.2 Nycodenz密度梯度离心法第32页
            2.4.4.3 蔗糖密度梯度离心法第32页
        2.4.5 苯酚法抽提木薯块根有色体蛋白质第32-33页
            2.4.5.1 有色体蛋白质溶解第33页
            2.4.5.2 有色体蛋白质定量第33页
        2.4.6 SDS-PAGE凝胶电泳检测第33-34页
        2.4.7 有色体蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)第34-36页
            2.4.7.1 水化胶条第34页
            2.4.7.2 等电聚焦(IEF)第34-35页
            2.4.7.3 IPG胶条平衡第35页
            2.4.7.4 SDS-PAGE电泳第35-36页
            2.4.7.5 凝胶图像扫描及差异蛋白质点的鉴定第36页
            2.4.7.6 差异蛋白质点的鉴定第36页
        2.4.8 内源激素含量的测定第36-37页
    2.5 数据分析第37页
3 结果与分析第37-65页
    3.1 不同木薯(系)块根膨大期和成熟期β-胡萝卜素含量及类胡萝卜素代谢通路相关基因和蛋白表达水平变化研究第37-43页
        3.1.1 四个木薯品种(系)块根不同时期β-胡萝卜素含量分析第37-38页
        3.1.2 四个木薯品种(系)块根类胡萝卜素合成通路相关基因表达水平分析第38-41页
        3.1.3 四个木薯品种(系)块根不同时期类胡萝卜素合成相关酶表达水平分析第41-43页
    3.2 木薯块根有色体分离及其蛋白质组研究第43-52页
        3.2.1 Percoll、Nycodenz和蔗糖密度梯度离心法提取SC9木薯块根有色体第43-44页
        3.2.2 不同提取方法的有色体Western Blot分析第44-46页
        3.2.3 木薯块根有色体双向凝胶电泳图谱第46-50页
        3.2.4 差异蛋白质点互作调控网络的构建第50-51页
        3.2.5 差异蛋白质点Enolase 2和Elongation Factor基因表达qRT-PCR验证第51-52页
    3.3 不同处理对木薯块根类胡萝卜素的影响第52-65页
        3.3.1 干旱处理对SC9木薯块根β-胡萝卜素含量的影响第52-53页
        3.3.2 不同处理间类胡萝卜素相关酶表达水平分析第53-55页
        3.3.3 干旱和ABA处理对SC9块根β-胡萝卜素积累相关基因表达的影响第55-57页
        3.3.4 干旱胁迫处理下SC9块根内源激素的变化第57-59页
        3.3.5 干旱胁迫对木薯块根有色体蛋白质组变化的影响第59-63页
        3.3.6 干旱胁迫下差异蛋白质点互作网络的构建第63-65页
4. 讨论第65-72页
    4.1 木薯品种(系)类胡萝卜素相关基因和蛋白表达水平分析第65-66页
    4.2 外源ABA与钨酸钠对块根类胡萝卜素合成途径的影响第66-67页
    4.3 木薯块根有色体分离及有色体蛋白质组学研究第67-69页
    4.4 干旱胁迫对块根类胡萝卜素合成途径的影响第69-72页
        4.4.1 干旱胁迫处理后块根β-胡萝卜素降低第69-70页
        4.4.2 干旱胁迫对活性氧的相关酶及质体相关蛋白的影响第70-71页
        4.4.3 干旱胁迫对块根内激素含量变化的影响第71页
        4.4.4 干旱胁迫影响块根有色体蛋白质组第71-72页
5. 结论第72-74页
参考文献第74-83页
致谢第83页

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