| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 1 绪论 | 第11-33页 |
| 1.1 转基因作物国内外发展状况 | 第11-13页 |
| 1.2 转基因玉米国内外发展状况 | 第13-15页 |
| 1.3 抗草甘膦EPSPS基因以及抗草甘膦玉米研究进展 | 第15-19页 |
| 1.3.1 草甘膦以及抗草甘膦EPSPS基因研究进展 | 第15-17页 |
| 1.3.2 抗草甘膦转基因玉米研究进展 | 第17-19页 |
| 1.4 国内外转基因作物的安全评价与管理 | 第19-21页 |
| 1.4.1 转基因作物的安全性问题 | 第19页 |
| 1.4.2 国内外转基因作物安全管理现状 | 第19-20页 |
| 1.4.3 转基因作物安全评价 | 第20-21页 |
| 1.5 转基因植物中侧翼序列分析方法的研究 | 第21-26页 |
| 1.5.1 质粒拯救法（Plasmid rescue） | 第22页 |
| 1.5.2 反向PCR(Inverse PCR, IPCR) | 第22-23页 |
| 1.5.3 单寡核苷酸巢式PCR(SON-PCR, Single oligonucleotide nested PCR) | 第23-24页 |
| 1.5.4 捕获PCR(Capture PCR) | 第24页 |
| 1.5.5 热不对称PCR（TAIL-PCR） | 第24-25页 |
| 1.5.6 高效热不对成PCR（Hi-TAIL-PCR） | 第25-26页 |
| 1.6 转基因作物检测技术及其发展 | 第26-31页 |
| 1.6.1 核酸检测技术 | 第27-29页 |
| 1.6.2 蛋白检测技术 | 第29-31页 |
| 1.7 本研究的目的、意义、主要内容和技术路线 | 第31-33页 |
| 1.7.1 研究目的 | 第31页 |
| 1.7.2 研究意义 | 第31页 |
| 1.7.3 研究内容 | 第31-32页 |
| 1.7.4 技术路线 | 第32-33页 |
| 2 转 2mG2-epsps基因玉米外源基因表达分析 | 第33-53页 |
| 2.1 材料与方法 | 第33-44页 |
| 2.1.0 实验材料 | 第33页 |
| 2.1.1 生化试剂 | 第33页 |
| 2.1.2 主要溶液配制 | 第33-36页 |
| 2.1.3 主要设备和仪器 | 第36页 |
| 2.1.4 样品DNA提取 | 第36页 |
| 2.1.5 PCR检测植株 | 第36-37页 |
| 2.1.6 玉米RNA提取 | 第37-38页 |
| 2.1.7 RT-PCR分析 | 第38-39页 |
| 2.1.8 Western Bolt分析外源蛋白表达 | 第39-41页 |
| 2.1.9 组织蛋白样品制备 | 第41-44页 |
| 2.1.10 试纸条检测抗草甘膦玉米 | 第44页 |
| 2.2 结果与分析 | 第44-51页 |
| 2.2.1 电泳检测玉米基因组提取质量 | 第44-45页 |
| 2.2.2 PCR检测提取DNA的质量 | 第45-46页 |
| 2.2.3 PCR 检测转基因植株 | 第46页 |
| 2.2.4 2mG2-epsps转录分析 | 第46-47页 |
| 2.2.5 Western Blot分析外源蛋白 2mG2-epsps表达情况 | 第47-50页 |
| 2.2.6 G2-EPSPS试纸条检测转基因玉米及其检错率分析 | 第50-51页 |
| 2.3 讨论 | 第51-53页 |
| 3 转 2mG2-epsps基因玉米外源T-DNA插入拷贝数分析 | 第53-62页 |
| 3.1 材料和方法 | 第53-59页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第53页 |
| 3.1.2 生化试剂 | 第53页 |
| 3.1.3 主要溶液配制 | 第53-55页 |
| 3.1.4 主要设备和仪器 | 第55页 |
| 3.1.5 玉米基因组的提取 | 第55页 |
| 3.1.6 ddPCR检测插入外源基因拷贝数 | 第55-57页 |
| 3.1.7 Southernbolt检测插入外源基因拷贝数 | 第57-59页 |
| 3.2 结果分析 | 第59-60页 |
| 3.2.1 转 2mG2-epsps基因玉米拷贝数分析 | 第59-60页 |
| 3.3 讨论 | 第60-62页 |
| 4 转 2mG2-epsps基因玉米T-DNA侧翼序列分析与品系特异性检测方法建立 | 第62-85页 |
| 4.1 材料与方法 | 第62-69页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第62页 |
| 4.1.2 生化试剂 | 第62页 |
| 4.1.3 hiTAIL-PCR获取T-DNA侧翼序列与长片段扩增 | 第62-69页 |
| 4.2 转基因玉米品系D特异性检测方法建立 | 第69-71页 |
| 4.2.1 转基因玉米品系D定性PCR检测方法 | 第69-71页 |
| 4.3 结果与分析 | 第71-83页 |
| 4.3.1 侧翼序列克隆与分析 | 第71-76页 |
| 4.3.2 验证获得的两个插入位点的侧翼序列 | 第76-78页 |
| 4.3.3 转基因玉米品系D定性PCR特异性检测方法建立 | 第78-83页 |
| 4.4 讨论 | 第83-85页 |
| 结论 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-99页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文及专利 | 第99-100页 |
| 附录 | 第100-111页 |
