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小麦赤霉菌FGSGL07836基因敲除及功能研究

中文摘要第3-5页
abstract第5-6页
1 绪论第10-18页
    1.1 前言第10页
    1.2 小麦赤霉菌第10-11页
    1.3 小麦赤霉病的危害第11-12页
    1.4 小麦赤霉病发生的因素及防治第12-13页
    1.5 小麦赤霉菌毒素第13-15页
    1.6 小麦赤霉菌研究进展第15-16页
    1.7 FGSG_07836 基因研究背景第16-17页
    1.8 本研究的目的和意义第17-18页
2 小麦赤霉菌FGSG_07836 基因缺失盒的构建第18-30页
    2.1 实验材料、试剂和仪器第18-20页
        2.1.1 材料第18页
        2.1.2 试剂第18-20页
        2.1.3 仪器第20页
    2.2 实验方法第20-26页
        2.2.1 野生型小麦赤霉菌菌株PH-1 基因组DNA的提取第20-21页
        2.2.2 质粒pCB1003 DNA的提取第21-22页
        2.2.3 FGSG_07836 基因敲除盒的构建第22-26页
    2.3 结果与分析第26-29页
        2.3.1 小麦赤霉菌PH-1 基因组DNA的提取第26页
        2.3.2 pCB1003质粒DNA的提取第26-27页
        2.3.3 FGSG_07836 基因上下游序列的PCR扩增第27页
        2.3.4 hph基因上下游序列的PCR扩增第27-28页
        2.3.5 PCR扩增Split marker重叠序列第28-29页
    2.4 讨论第29-30页
3 FGSG_07836 基因的敲除及转化子的筛选鉴定第30-38页
    3.1 实验材料、试剂和仪器第30-32页
        3.1.1 材料第30页
        3.1.2 试剂第30-31页
        3.1.3 仪器第31-32页
    3.2 实验方法第32-35页
        3.2.1 原生质体的制备与转化第32-33页
        3.2.2 转化子的筛选及鉴定第33-35页
    3.3 结果与分析第35-37页
        3.3.1 转化子DNA的提取第35页
        3.3.2 转化子的PCR正负筛选第35-37页
    3.4 讨论第37-38页
4 FGSG_07836 基因缺失突变体的表型观察及致病力检测第38-51页
    4.1 实验材料、试剂和仪器第38页
        4.1.1 材料第38页
        4.1.2 试剂第38页
        4.1.3 仪器第38页
    4.2 实验方法第38-41页
        4.2.1 菌落形态的观察第38-39页
        4.2.2 菌落生长速度的测定第39页
        4.2.3 分生孢子形态观察第39页
        4.2.4 产孢量的测定第39页
        4.2.5 有性杂交实验第39-40页
        4.2.6 赤霉菌侵染玉米须的实验第40页
        4.2.7 赤霉菌侵染番茄的实验第40页
        4.2.8 菌株对温度敏感性测定第40-41页
        4.2.9 原生质体释放实验第41页
        4.2.10 不同菌株培养液颜色的比较第41页
    4.3 结果与分析第41-49页
        4.3.1 菌落形态第41-42页
        4.3.2 菌落生长速度第42-43页
        4.3.3 分生孢子形态观察第43页
        4.3.4 产孢量变化第43-44页
        4.3.5 原生质体释放情况观察第44-45页
        4.3.6 菌株对温度敏感性测定第45-47页
        4.3.7 有性杂交第47页
        4.3.8 赤霉菌侵染番茄的实验第47-48页
        4.3.9 赤霉菌侵染玉米须的实验第48-49页
        4.3.10 不同菌株培养液颜色的比较第49页
    4.4 讨论第49-51页
5 FGSG_07836 基因功能回复验证第51-70页
    5.1 实验材料、试剂和仪器第51-52页
        5.1.1 材料第51页
        5.1.2 试剂第51页
        5.1.3 仪器第51-52页
    5.2 实验方法第52-60页
        5.2.1 pZPH1(pZWH1+FGSG_07836)的构建第52-54页
        5.2.2 pZPH1的筛选第54-57页
        5.2.3 回复验证第57-60页
        5.2.4 菌种保存第60页
    5.3 结果与分析第60-68页
        5.3.1 pZPH1的构建第60-62页
        5.3.2 pZPH1的筛选第62-66页
        5.3.3 回复验证第66-68页
    5.4 讨论第68-70页
6 全文结论第70-72页
参考文献第72-77页
附录 1第77-81页
附录 2第81-82页
致谢第82-83页
攻读硕士学位期间发表的论文第83页

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