中文摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
1 绪论 | 第10-18页 |
1.1 前言 | 第10页 |
1.2 小麦赤霉菌 | 第10-11页 |
1.3 小麦赤霉病的危害 | 第11-12页 |
1.4 小麦赤霉病发生的因素及防治 | 第12-13页 |
1.5 小麦赤霉菌毒素 | 第13-15页 |
1.6 小麦赤霉菌研究进展 | 第15-16页 |
1.7 FGSG_07836 基因研究背景 | 第16-17页 |
1.8 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
2 小麦赤霉菌FGSG_07836 基因缺失盒的构建 | 第18-30页 |
2.1 实验材料、试剂和仪器 | 第18-20页 |
2.1.1 材料 | 第18页 |
2.1.2 试剂 | 第18-20页 |
2.1.3 仪器 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-26页 |
2.2.1 野生型小麦赤霉菌菌株PH-1 基因组DNA的提取 | 第20-21页 |
2.2.2 质粒pCB1003 DNA的提取 | 第21-22页 |
2.2.3 FGSG_07836 基因敲除盒的构建 | 第22-26页 |
2.3 结果与分析 | 第26-29页 |
2.3.1 小麦赤霉菌PH-1 基因组DNA的提取 | 第26页 |
2.3.2 pCB1003质粒DNA的提取 | 第26-27页 |
2.3.3 FGSG_07836 基因上下游序列的PCR扩增 | 第27页 |
2.3.4 hph基因上下游序列的PCR扩增 | 第27-28页 |
2.3.5 PCR扩增Split marker重叠序列 | 第28-29页 |
2.4 讨论 | 第29-30页 |
3 FGSG_07836 基因的敲除及转化子的筛选鉴定 | 第30-38页 |
3.1 实验材料、试剂和仪器 | 第30-32页 |
3.1.1 材料 | 第30页 |
3.1.2 试剂 | 第30-31页 |
3.1.3 仪器 | 第31-32页 |
3.2 实验方法 | 第32-35页 |
3.2.1 原生质体的制备与转化 | 第32-33页 |
3.2.2 转化子的筛选及鉴定 | 第33-35页 |
3.3 结果与分析 | 第35-37页 |
3.3.1 转化子DNA的提取 | 第35页 |
3.3.2 转化子的PCR正负筛选 | 第35-37页 |
3.4 讨论 | 第37-38页 |
4 FGSG_07836 基因缺失突变体的表型观察及致病力检测 | 第38-51页 |
4.1 实验材料、试剂和仪器 | 第38页 |
4.1.1 材料 | 第38页 |
4.1.2 试剂 | 第38页 |
4.1.3 仪器 | 第38页 |
4.2 实验方法 | 第38-41页 |
4.2.1 菌落形态的观察 | 第38-39页 |
4.2.2 菌落生长速度的测定 | 第39页 |
4.2.3 分生孢子形态观察 | 第39页 |
4.2.4 产孢量的测定 | 第39页 |
4.2.5 有性杂交实验 | 第39-40页 |
4.2.6 赤霉菌侵染玉米须的实验 | 第40页 |
4.2.7 赤霉菌侵染番茄的实验 | 第40页 |
4.2.8 菌株对温度敏感性测定 | 第40-41页 |
4.2.9 原生质体释放实验 | 第41页 |
4.2.10 不同菌株培养液颜色的比较 | 第41页 |
4.3 结果与分析 | 第41-49页 |
4.3.1 菌落形态 | 第41-42页 |
4.3.2 菌落生长速度 | 第42-43页 |
4.3.3 分生孢子形态观察 | 第43页 |
4.3.4 产孢量变化 | 第43-44页 |
4.3.5 原生质体释放情况观察 | 第44-45页 |
4.3.6 菌株对温度敏感性测定 | 第45-47页 |
4.3.7 有性杂交 | 第47页 |
4.3.8 赤霉菌侵染番茄的实验 | 第47-48页 |
4.3.9 赤霉菌侵染玉米须的实验 | 第48-49页 |
4.3.10 不同菌株培养液颜色的比较 | 第49页 |
4.4 讨论 | 第49-51页 |
5 FGSG_07836 基因功能回复验证 | 第51-70页 |
5.1 实验材料、试剂和仪器 | 第51-52页 |
5.1.1 材料 | 第51页 |
5.1.2 试剂 | 第51页 |
5.1.3 仪器 | 第51-52页 |
5.2 实验方法 | 第52-60页 |
5.2.1 pZPH1(pZWH1+FGSG_07836)的构建 | 第52-54页 |
5.2.2 pZPH1的筛选 | 第54-57页 |
5.2.3 回复验证 | 第57-60页 |
5.2.4 菌种保存 | 第60页 |
5.3 结果与分析 | 第60-68页 |
5.3.1 pZPH1的构建 | 第60-62页 |
5.3.2 pZPH1的筛选 | 第62-66页 |
5.3.3 回复验证 | 第66-68页 |
5.4 讨论 | 第68-70页 |
6 全文结论 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-77页 |
附录 1 | 第77-81页 |
附录 2 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第83页 |