| 中文摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 文献综述 | 第11-20页 |
| 1 鱼类弧菌病的研究进展 | 第11-17页 |
| 1.1 主要的致病弧菌及其危害 | 第11-12页 |
| 1.2 鱼类弧菌病的临床症状 | 第12页 |
| 1.3 鱼类弧菌病的组织病理学损伤 | 第12-13页 |
| 1.4 弧菌感染对鱼类血液学相关指标影响 | 第13页 |
| 1.5 弧菌感染对鱼类免疫水平和激素水平影响 | 第13-14页 |
| 1.6 弧菌主要致病因子的研究进展 | 第14-17页 |
| 1.7 弧菌感染的侵染途径 | 第17页 |
| 2 黄颡鱼的生物学特性与常见疾病 | 第17-18页 |
| 3 研究目的与意义 | 第18-20页 |
| 实验研究 | 第20-52页 |
| 1 实验材料及试剂仪器 | 第20-21页 |
| 1.1 实验菌株 | 第20页 |
| 1.2 实验动物 | 第20页 |
| 1.3 主要试剂 | 第20-21页 |
| 1.4 主要仪器 | 第21页 |
| 2 试验方法 | 第21-31页 |
| 2.1 细菌培养 | 第21-22页 |
| 2.2 人工感染 | 第22页 |
| 2.2.1 预感染 | 第22页 |
| 2.2.2 正式感染 | 第22页 |
| 2.3 样品采集 | 第22-23页 |
| 2.4 临床症状观察 | 第23页 |
| 2.5 病理组织学观察 | 第23-24页 |
| 2.6 qPCR及免疫组织化学法检测细菌在组织中的分布 | 第24-31页 |
| 2.6.1 溶血素(Vmh)基因的扩增 | 第24-25页 |
| 2.6.2 溶血素(Vmh)T克隆 | 第25-27页 |
| 2.6.3 标准曲线的制备以及灵敏度的检测 | 第27-28页 |
| 2.6.3.1 Vmh-T的浓度测定以及拷贝数计算 | 第27页 |
| 2.6.3.2 灵敏度的测定以及标准曲线的建立 | 第27-28页 |
| 2.6.4 QPCR法检测各组织中的拟态弧菌 | 第28页 |
| 2.6.4.1 组织中DNA的提取 | 第28页 |
| 2.6.4.2 组织中细菌量的检测 | 第28页 |
| 2.6.5 兔抗拟态弧菌全菌抗体的制备 | 第28-30页 |
| 2.6.5.1 全菌抗原制备及免疫流程 | 第28-29页 |
| 2.6.5.2 兔抗IgG的提取和纯化 | 第29页 |
| 2.6.5.3 兔抗IgG的鉴定 | 第29-30页 |
| 2.6.6 免疫组化切片的制作 | 第30-31页 |
| 2.6.7 免疫组化结果判定 | 第31页 |
| 3 试验结果 | 第31-47页 |
| 3.0 预感染结果 | 第31-32页 |
| 3.1 临床症状 | 第32-35页 |
| 3.2 组织学病变 | 第35-41页 |
| 3.3 溶血素基因(Vmh)的扩增 | 第41页 |
| 3.4 Vmh的T克隆及PCR鉴定 | 第41-42页 |
| 3.5 Vmh-T测序结果比对 | 第42页 |
| 3.6 标准曲线的制备以及灵敏度的检测 | 第42-43页 |
| 3.7 拟态弧菌在各组织中的动态分布 | 第43-45页 |
| 3.8 兔抗高免血清的制备及特异性 | 第45-46页 |
| 3.9 拟态弧菌在皮肤肌肉中的定位 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-52页 |
| 4.1 感染浓度与感染时间的选择 | 第47-48页 |
| 4.2 黄颡鱼拟态弧菌病的临床症状 | 第48-49页 |
| 4.3 黄颡鱼拟态弧菌感染组织损伤特点 | 第49-50页 |
| 4.4 拟态弧菌的组织嗜性 | 第50-51页 |
| 4.5 免疫组织化学方法的优化 | 第51-52页 |
| 4.6 荧光定量检测方法与免疫组织化学检测方法的比较 | 第52页 |
| 结论 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-64页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第64页 |
