| 中文摘要 | 第14-16页 |
| ABSTRACT | 第16-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-28页 |
| 1.1 PCBs研究进展 | 第19-21页 |
| 1.1.1 PCBs的性质及应用 | 第19页 |
| 1.1.2 PCBs的毒性 | 第19-20页 |
| 1.1.3 PCB118简介 | 第20-21页 |
| 1.2 肝癌 | 第21-26页 |
| 1.2.1 肝癌简介 | 第21页 |
| 1.2.2 Warburg效应与肝癌 | 第21-23页 |
| 1.2.3 PKM2与肝癌 | 第23-24页 |
| 1.2.4 氧化应激与肝癌 | 第24-25页 |
| 1.2.5 AhR与肝癌 | 第25-26页 |
| 1.3 PCB118与肝癌 | 第26页 |
| 1.4 本课题研究的目的及意义 | 第26-28页 |
| 第二章 PCB118通过丙酮酸激酶M2介导的Warburg效应促进肝癌细胞SMMC-7721增殖 | 第28-41页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第28页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第28-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-34页 |
| 2.2.1 肝癌细胞SMMC-7721的复苏与冻存 | 第29页 |
| 2.2.2 肝癌细胞SMMC-7721的培养 | 第29页 |
| 2.2.3 药物配制 | 第29页 |
| 2.2.4 MTT法检测细胞存活 | 第29页 |
| 2.2.5 台盼蓝染色细胞计数法检测细胞增殖率 | 第29-30页 |
| 2.2.6 细胞克隆形成实验 | 第30页 |
| 2.2.7 培养基中葡萄糖含量检测 | 第30-31页 |
| 2.2.8 培养基中乳酸生成量检测 | 第31页 |
| 2.2.9 RNA干扰实验 | 第31页 |
| 2.2.10 总RNA提取 | 第31-32页 |
| 2.2.11 荧光定量PCR | 第32-33页 |
| 2.2.12 细胞蛋白提取 | 第33页 |
| 2.2.13 Western印迹 | 第33页 |
| 2.2.14 统计学分析 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-39页 |
| 2.3.1 低浓度PCB118暴露促进SMMC-7721细胞增殖 | 第34-35页 |
| 2.3.2 PCB118暴露促进Warburg效应 | 第35-36页 |
| 2.3.3 PCB118暴露促进丙酮酸激酶M2的表达和核转位 | 第36-37页 |
| 2.3.4 敲减PKM2抑制PCB118诱导的Warburg效应 | 第37页 |
| 2.3.5 敲减PKM2抑制PCB118诱导的肝癌细胞增殖 | 第37-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 PCB118通过氧化应激调节PKM2介导的Warburg效应进而促进肝癌细胞SMMC-7721增殖 | 第41-51页 |
| 3.1 实验材料 | 第41页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第41页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第41页 |
| 3.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 3.2.1 肝癌细胞SMMC-7721的复苏与冻存 | 第41页 |
| 3.2.2 肝癌细胞SMMC-7721的培养 | 第41页 |
| 3.2.3 药物的配制 | 第41页 |
| 3.2.4 ROS水平检测 | 第41-42页 |
| 3.2.5 SOD活性检测 | 第42页 |
| 3.2.6 GSH含量检测 | 第42-43页 |
| 3.2.7 MTT法检测细胞存活 | 第43页 |
| 3.2.8 台盼蓝染色细胞计数法检测细胞增殖率 | 第43页 |
| 3.2.9 培养基中葡萄糖含量检测 | 第43页 |
| 3.2.10 培养基中乳酸生成量检测 | 第43页 |
| 3.2.11 总RNA提取 | 第43页 |
| 3.2.12 荧光定量PCR | 第43-44页 |
| 3.2.13 统计学分析 | 第44页 |
| 3.3 结果 | 第44-49页 |
| 3.3.1 PCB118暴露对肝癌细胞氧化应激水平的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.2 PCB118暴露对肝癌细胞NADPH氧化酶的影响 | 第45-47页 |
| 3.3.3 PCB118通过氧化应激调节PKM2 | 第47页 |
| 3.3.4 PCB118通过氧化应激促进肝癌细胞Warburg效应 | 第47-49页 |
| 3.3.5 PCB118通过氧化应激促进肝癌细胞增殖 | 第49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 PCB118通过芳香烃受体途径调节PKM2介导的Warburg效应进而促进肝癌细胞SMMC-7721增殖 | 第51-57页 |
| 4.1 实验材料 | 第51页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第51页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-52页 |
| 4.2.1 肝癌细胞SMMC-7721的复苏与冻存 | 第51页 |
| 4.2.2 肝癌细胞SMMC-7721的培养 | 第51页 |
| 4.2.3 药物的配制 | 第51页 |
| 4.2.4 MTT法检测细胞存活 | 第51页 |
| 4.2.5 台盼蓝染色细胞计数法检测细胞增殖率 | 第51-52页 |
| 4.2.6 培养基中葡萄糖含量检测 | 第52页 |
| 4.2.7 培养基中乳酸生成量检测 | 第52页 |
| 4.2.8 RNA干扰实验 | 第52页 |
| 4.2.9 总RNA提取 | 第52页 |
| 4.2.10 荧光定量PCR | 第52页 |
| 4.2.11 细胞蛋白提取 | 第52页 |
| 4.2.12 Western印迹 | 第52页 |
| 4.2.13 统计学分析 | 第52页 |
| 4.3 结果 | 第52-55页 |
| 4.3.1 PCB118暴露促进芳香烃受体AhR表达 | 第52-53页 |
| 4.3.2 敲减AhR抑制PCB118诱导的PKM2表达 | 第53页 |
| 4.3.3 敲减AhR抑制PCB118促进Warburg效应 | 第53-55页 |
| 4.3.4 敲减AhR抑制PCB118诱导的肝癌细胞增殖 | 第55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 PCB118对人肝癌细胞BEL-7402细胞黏附的影响 | 第57-64页 |
| 5.1 实验材料 | 第57页 |
| 5.1.1 细胞株 | 第57页 |
| 5.1.2 实验试剂 | 第57页 |
| 5.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 5.2.1 肝癌细胞BEL-7402的复苏与冻存 | 第57页 |
| 5.2.2 肝癌细胞BEL-7402的培养 | 第57页 |
| 5.2.3 药物的配制 | 第57页 |
| 5.2.4 细胞与基质间黏附实验 | 第57-58页 |
| 5.2.5 细胞聚集实验 | 第58页 |
| 5.2.6 总RNA提取 | 第58页 |
| 5.2.7 荧光定量PCR | 第58页 |
| 5.2.8 细胞蛋白提取 | 第58-59页 |
| 5.2.9 Western印迹 | 第59页 |
| 5.2.10 统计学分析 | 第59页 |
| 5.3 结果 | 第59-62页 |
| 5.3.1 PCB118对人肝癌细胞BEL-7402细胞与基质间黏附的影响 | 第59页 |
| 5.3.2 PCB118对BEL-7402细胞中黏附因子CD29表达的影响 | 第59-60页 |
| 5.3.3 PCB118对人肝癌细胞BEL-7402细胞-细胞间黏附的影响 | 第60-61页 |
| 5.3.4 PCB118对BEL-7402细胞中E-cadherin与N-cadherin表达的影响 | 第61-62页 |
| 5.4 讨论 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 附录1 主要试剂配方 | 第71-72页 |
| 附录2 实验主要仪器设备 | 第72-73页 |
| 附录3 英文缩略语表 | 第73-74页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 个人简况及联系方式 | 第76-78页 |
