侵染我国烟草的野生番茄花叶病毒分离株(WTMV-XC-1)的鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-27页 |
| ·引言 | 第11-12页 |
| ·Potyvirus 研究进展 | 第12-19页 |
| ·Potyviruse 的分类标准 | 第12-13页 |
| ·普通生物学 | 第13-16页 |
| ·基因组结构 | 第16-18页 |
| ·Potyviruses 复制机制 | 第18-19页 |
| ·病毒的运动 | 第19页 |
| ·WTMV 研究进展 | 第19页 |
| ·植物病毒的检测方法 | 第19-24页 |
| ·生物学检测法 | 第20页 |
| ·血清学检测 | 第20-21页 |
| ·电子显微镜检测法 | 第21页 |
| ·分子生物学检测法 | 第21-24页 |
| ·实验研究内容、目的意义与技术路线 | 第24-27页 |
| ·研究内容 | 第24页 |
| ·研究目的与意义 | 第24页 |
| ·技术路线 | 第24-27页 |
| 第二章 病毒分离株的纯化与普通生物学特征 | 第27-35页 |
| ·材料与方法 | 第27-30页 |
| ·烟草样品 | 第27页 |
| ·病毒 | 第27页 |
| ·蚜虫 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27页 |
| ·摩擦接种 | 第27页 |
| ·介体传播 | 第27-28页 |
| ·病毒粗提纯 | 第28页 |
| ·电子显微镜观察 | 第28页 |
| ·RNA 的提取 | 第28-29页 |
| ·反转录 | 第29页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第29-30页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-33页 |
| ·病毒分离株的采集 | 第30页 |
| ·病毒分离株的纯化 | 第30-31页 |
| ·病毒提纯及电镜观察 | 第31页 |
| ·寄主范围与症状 | 第31页 |
| ·介体传播 | 第31-33页 |
| ·小结 | 第33-35页 |
| 第三章 病毒分离株的鉴定与全基因组测序 | 第35-55页 |
| ·材料与方法 | 第35-37页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·引物设计 | 第35页 |
| ·RT-PCR | 第35页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| ·DNA 片段的凝胶回收 | 第35-36页 |
| ·T 载体连接 | 第36页 |
| ·转化和筛选 | 第36-37页 |
| ·序列测定 | 第37页 |
| ·cDNA 末端快速扩增技术 | 第37页 |
| ·序列分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-50页 |
| ·分离株的 PCR 鉴定 | 第37-38页 |
| ·病毒全基因组序列的测定 | 第38-46页 |
| ·基因组结构 | 第46-47页 |
| ·系统进化树分析 | 第47页 |
| ·剪切位点及保守基序分析 | 第47-49页 |
| ·相似性比对 | 第49-50页 |
| ·XC1 与 WTMV 各个分离株的相似性分析 | 第50页 |
| ·小结 | 第50-55页 |
| 第四章 WTMV 荧光定量检测体系的建立 | 第55-63页 |
| ·材料与方法 | 第55-58页 |
| ·烟草样品 | 第55页 |
| ·病毒 | 第55页 |
| ·蚜虫 | 第55-56页 |
| ·主要试剂 | 第56页 |
| ·主要仪器 | 第56页 |
| ·荧光定量检测引物的设计 | 第56页 |
| ·标准品的制备 | 第56页 |
| ·荧光定量检测体系的优化 | 第56页 |
| ·标准曲线的建立 | 第56-57页 |
| ·灵敏度分析 | 第57页 |
| ·特异性分析 | 第57页 |
| ·重复性分析 | 第57页 |
| ·荧光定量检测体系检测蚜虫中 WTMV | 第57-58页 |
| ·荧光定量检测体系检测烟样中 WTMV | 第58页 |
| ·RT-PCR 检测烟样中 WTMV | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-61页 |
| ·标准品的制备 | 第58页 |
| ·荧光定量 PCR 的优化 | 第58页 |
| ·标准曲线的建立 | 第58-59页 |
| ·灵敏度分析 | 第59页 |
| ·特异性分析 | 第59-61页 |
| ·重复性分析 | 第61页 |
| ·荧光定量检测体系检测蚜虫中 WTMV | 第61页 |
| ·荧光定量检测体系检测烟草中 WTMV | 第61页 |
| ·RT-PCR 检测烟样中 WTMV | 第61页 |
| ·小结 | 第61-63页 |
| 第五章 结论与讨论 | 第63-65页 |
| ·结论 | 第63页 |
| ·讨论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 个人简历 | 第79页 |