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棉花脱落酸8-羟化酶基因的功能分析

摘要第1-12页
Abstract第12-17页
第一章 文献综述第17-29页
   ·棉花纤维发育研究进展第17-22页
     ·棉纤维的分化起始期第17-18页
     ·棉纤维的伸长期第18-19页
     ·棉纤维的次生壁增厚期第19页
     ·棉纤维的脱水成熟期第19页
     ·植物激素对于棉花纤维发育的影响第19-22页
   ·ABA的研究进展第22-29页
     ·ABA的发现第22页
     ·ABA合成途径第22-23页
     ·ABA合成途径关键酶NCED第23-24页
     ·ABA代谢途径第24-25页
     ·ABA代谢途径关键酶ABA8'-羟化酶第25-26页
     ·ABA生物功能研究第26-29页
第二章 引言第29-33页
   ·立论依据第29-30页
   ·技术路线第30-33页
第三章 材料与方法第33-45页
   ·材料第33-38页
     ·植物材料第33页
     ·菌株和载体第33页
     ·主要试剂和耗材第33-34页
     ·主要仪器设备第34-35页
     ·主要溶液和培养基配方第35-38页
   ·方法第38-45页
     ·植物基因组DNA的提取第38页
     ·植物总RNA的提取第38-39页
     ·cDNA一链的合成第39页
     ·DNA片段的回收、连接第39-40页
     ·大肠杆菌的转化第40页
     ·农杆菌感受态的制备第40页
     ·农杆菌的转化第40页
     ·Quantitative Real-Time PCR分析第40-41页
     ·烟草的遗传转化第41页
     ·番茄的遗传转化第41-42页
     ·棉花的遗传转化第42页
     ·GUS组织化学染色第42页
     ·GhABAH转基因植株的鉴定第42页
     ·转基因植株表型变异观察第42-43页
     ·转基因植株胁迫实验第43页
     ·胚珠离体培养第43页
     ·转基因植株叶片中ABA的提取和检测第43页
     ·叶片叶绿素含量的检测第43-44页
     ·石蜡切片第44页
     ·纤维素测定第44-45页
第四章 结果与分析第45-77页
   ·GhABAH的克隆和序列分析第45-49页
     ·GhABAH基因cDNA的克隆第45-46页
     ·推导的GhABAH氨基酸序列的同源性分析第46-48页
     ·GhABAH跨膜结构分析第48-49页
     ·GhABAH基因组结构分析第49页
   ·GhABAH基因在棉花器官组织和纤维细胞中的表达特征第49-51页
   ·GhABAH基因的生物功能鉴定第51-57页
     ·超量表达和反义抑制GhABAH基因植物表达载体的构建第51页
     ·通过转基因番茄验证GhABAH基因的功能第51-57页
   ·超量表达GhABAH基因对棉花植株生长发育的影响第57-62页
     ·超量表达GhABAH转基因棉花的鉴定第57-58页
     ·超量表达GhABAH转基因棉花ABA含量变化第58-59页
     ·超量表达GhABAH对棉花生长发育的影响第59-60页
     ·超量表达GhABAH转基因棉花抗逆分析第60-62页
   ·超量表达GhABAH对棉花纤维生长发育的影响第62-65页
     ·超量表达GhABAH抑制棉花纤维细胞起始和伸长第62-63页
     ·超量表达GhABAH对成熟纤维和次生壁沉积的影响第63-65页
   ·外施ABA、ABA合成抑制剂和ABAH抑制剂对棉花纤维生长发育的影响第65-67页
     ·超量表达GhABAH基因促进纤维伸长第65页
     ·超量表达GhABAH基因降低了纤维细胞对ABA的敏感性第65页
     ·抑制ABA的合成促进纤维生长第65-67页
     ·抑制GhABAH的活性抑制胚珠和纤维生长第67页
   ·超量表达GhABAH转基因棉花纤维中植物激素相关基因的表达变化第67-69页
   ·反义抑制GhABAH基因对棉花生长发育的影响第69-74页
     ·反义抑制GhABAH转基因棉花的鉴定第69页
     ·反义抑制GhABAH转基因棉花ABA含量测定第69-70页
     ·反义抑制GhABAH转基因棉花表型分析第70-71页
     ·反义抑制GhABAH转基因棉花对纤维发育的影响第71-72页
     ·反义抑制GhABAH转基因棉花抗逆性分析第72-74页
   ·GhABAH启动子第74-77页
     ·GhABAH启动子的克隆和序列分析第74-75页
     ·GhABAH启动子表达载体构建第75页
     ·GhABAH启动子特异性分析第75-77页
第五章 讨论与结论第77-81页
   ·讨论第77-79页
     ·GhABAH的生物功能第77页
     ·GhABAH和ABA在棉花植株生长发育中的作用及调控第77-78页
     ·GhABAH和ABA在纤维细胞发育中的功能及其机制第78-79页
   ·结论第79-81页
     ·克隆了棉花中ABAH的同源基因GhABAH第79页
     ·分析了GhABAH基因的表达特征第79页
     ·分析了GhABAH基因启动子的功能第79-80页
     ·鉴定了GhABAH的生物学功能第80页
     ·GhABAH表达水平的变化影响了棉花植株的发育第80页
     ·GhABAH表达水平的变化对棉花纤维生长发育的影响第80-81页
参考文献第81-91页
附录1 缩略词表第91-93页
附录2 攻读硕士学位期间参加的主要科研项目第93页
附录3 攻读硕士学位期间发表的文章第93-95页
致谢第95页

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