| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 HPS LPS的基因特征和在致病过程中的作用 | 第15-23页 |
| 1. 副猪嗜血杆菌的LPS的结构及基因特征 | 第16-19页 |
| 2. 副猪嗜血杆菌LPS的致病性 | 第19-22页 |
| ·LPS在细菌对宿主细胞黏附和入侵中的作用 | 第19-20页 |
| ·LPS在细菌对补体介导的抗血清杀菌中的作用 | 第20页 |
| ·LPS的致炎作用 | 第20-22页 |
| 3. 小结与展望 | 第22-23页 |
| 第二章 HPS SC096株rfaE基因缺失株及互补株的构建 | 第23-35页 |
| 1 材料与方法 | 第24-29页 |
| ·材料 | 第24-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第25页 |
| ·主要仪器 | 第25页 |
| ·主要培养基和试剂的配制 | 第25-26页 |
| ·引物 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-29页 |
| ·副猪嗜血杆菌的复苏 | 第27页 |
| ·rfaE基因上臂和下臂的扩增 | 第27页 |
| ·rfaE基因上下臂的连接 | 第27页 |
| ·重组自杀性质粒的构建 | 第27-28页 |
| ·HPS SC096株 ΔrfaE缺失株的构建 | 第28页 |
| ·互补质粒的构建 | 第28页 |
| ·HPS SC096株cΔrfaE互补株的构建 | 第28-29页 |
| 2 结果 | 第29-33页 |
| ·rfaE基因上下臂片段的扩增 | 第29页 |
| ·重组自杀性质粒的构建 | 第29-31页 |
| ·互补质粒的构建 | 第31页 |
| ·构建 ΔrfaE缺失株 | 第31-32页 |
| ·构建cΔrfaE互补株 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-34页 |
| 4 结论 | 第34-35页 |
| 第三章 HPS SC096株 ΔrfaE缺失株的生物学特性的研究 | 第35-46页 |
| 1 材料与方法 | 第36-40页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·菌株和细胞系 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36页 |
| ·试剂的配制 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-40页 |
| ·副猪嗜血杆菌的复壮及培养 | 第37页 |
| ·生长曲线的初步测定 | 第37页 |
| ·脂多糖糖型变化的观察 | 第37-39页 |
| ·黏附入侵实验 | 第39页 |
| ·抗血清杀菌作用 | 第39-40页 |
| 2 结果 | 第40-43页 |
| ·ΔrfaE缺失株生长特性的研究 | 第40页 |
| ·菌株LPS糖型的变化 | 第40-41页 |
| ·黏附入侵实验 | 第41-42页 |
| ·抗血清杀菌实验 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 4 小结 | 第45-46页 |
| 第四章 HPS SC096株 ΔrfaE缺失株LPS促炎性因子表达的研究 | 第46-56页 |
| 1 材料与方法 | 第46-50页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·菌株和细胞系 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·主要仪器 | 第47页 |
| ·试剂的配制 | 第47页 |
| ·方法 | 第47-50页 |
| ·副猪嗜血杆菌的复壮及培养 | 第47页 |
| ·脂多糖的提取及浓度的测定 | 第47-48页 |
| ·炎性因子引物的合成 | 第48页 |
| ·猪肺泡巨噬细胞(PAMs)的培养及处理 | 第48-49页 |
| ·总RNA的提取与反转录 | 第49页 |
| ·Real-Time PCR测定PAMs炎性因子mRNA转录水平 | 第49-50页 |
| ·BALB/c小鼠的腹腔注射、血液的采集及血清的分离 | 第50页 |
| ·ELISA检测小鼠血清中炎性因子的表达量 | 第50页 |
| 2 结果 | 第50-54页 |
| ·LPS对PAMs炎性因子的mRNA转录水平的影响 | 第50-52页 |
| ·LPS对BALB/c小鼠炎性因子表达的影响 | 第52-54页 |
| 3 讨论 | 第54-55页 |
| 4 小结 | 第55-56页 |
| 第五章 HPS SC096株 ΔrfaE缺失株LPS诱导NF-κB和MAPKs信号通路的研究 | 第56-68页 |
| 1 材料与方法 | 第56-61页 |
| ·材料 | 第56-58页 |
| ·菌株和细胞系 | 第56-57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57页 |
| ·试剂的配制 | 第57-58页 |
| ·方法 | 第58-61页 |
| ·副猪嗜血杆菌的复壮及培养 | 第58页 |
| ·脂多糖的提取及浓度的测定 | 第58-59页 |
| ·信号通路分子引物的设计和合成 | 第59-60页 |
| ·猪肺泡巨噬细胞(PAMs)的培养及处理 | 第60页 |
| ·总RNA的提取与反转录 | 第60-61页 |
| ·Real-Time PCR测定PAMs信号通路分子mRNA转录水平 | 第61页 |
| ·western blot检测NF-κB和MAPK信号通路相关蛋白的表达 | 第61页 |
| 2 结果 | 第61-66页 |
| ·LPS对PAMs信号通路分子的mRNA转录水平的影响 | 第61-64页 |
| ·LPS对NF-κB和MAPK p38信号通路的影响 | 第64-66页 |
| 3 讨论 | 第66-67页 |
| 4 小结 | 第67-68页 |
| 结论与创新点 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 硕士期间已发表的文章 | 第82-83页 |
