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变形链球菌及其耐氟菌株耐酸基因hrcA的测序及甲基化水平分析

中文摘要第1-7页
Abstract第7-12页
英文缩略词表第12-13页
第1章 引言第13-15页
第2章 文献回顾第15-19页
   ·龋病及变形链球菌耐氟菌株的概述第15页
   ·S.mutans耐氟菌株的鉴定第15-16页
   ·S.mutans耐氟菌株耐酸相关基因hrcA的研究意义第16-17页
   ·DNA甲基化的研究进展第17页
   ·DNA甲基化的检测方法第17-19页
第3章 实验第19-31页
   ·材料第19-21页
     ·细菌第19页
     ·仪器第19页
     ·培养基与试剂盒第19-20页
     ·常用培养基的配制第20-21页
   ·实验方法第21-31页
     ·变形链球菌(UA159)及其耐氟菌株(UA159-FR)的复苏和培养第21页
     ·变形链球菌(UA159)及其耐氟菌株(UA159-FR)的鉴定第21-24页
     ·目的基因引物的设计与合成第24-25页
     ·PCR扩增第25页
     ·琼脂糖凝胶电泳(AGE)鉴定PCR产物第25页
     ·PCR产物回收第25页
     ·琼脂糖凝胶电泳(AGE)鉴定回收后PCR产物第25-26页
     ·PCR产物的酶切第26页
     ·酶切后PCR产物的纯化第26-27页
     ·连接第27页
     ·转化第27页
     ·接种到LB液体培养基第27页
     ·提取重组质粒第27-28页
     ·鉴定重组质粒第28-29页
     ·hrcA甲基化水平检测第29-31页
第4章 结果第31-42页
   ·S.mutans UA159及其耐氟菌株UA159-FR的复苏和培养第31页
   ·S.mutans UA159及其耐氟菌株UA159-FR的鉴定第31-32页
   ·目的基因hrcA的PCR产物及鉴定第32页
   ·PCR纯化产物的鉴定第32-33页
   ·感受态细胞(E.coli DH5α)的培养第33页
   ·重组质粒的鉴定第33-34页
   ·重组质粒酶切产物的鉴定第34页
   ·目的基因hrcA的测序结果第34-39页
   ·hrcA甲基化水平检测结果第39-42页
     ·甲基化碱基覆盖深度第39-40页
     ·甲基化测序位点偏向性第40-41页
     ·甲基化差异性分析第41-42页
第5章 讨论第42-44页
第6章 结论第44-45页
参考文献第45-50页
导师简介第50-51页
作者简介第51-52页
致谢第52页

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