英文缩略表 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第一部分 IL-1β 通过c-Src蛋白激酶增加胃腺癌细胞存活作用的初步研究 | 第16-32页 |
引言 | 第16页 |
材料和方法 | 第16-22页 |
1. 实验材料 | 第16-17页 |
·细胞株及细胞培养所需要的材料 | 第16页 |
·抗体、试剂及其他材料 12 | 第16-17页 |
·主要仪器 | 第17页 |
2. 实验方法 | 第17-22页 |
·Annexin V+PI染色后流式细胞仪测定IL-1β 的刺激在胃腺癌MKN-45 细胞凋亡中的作用 | 第17-18页 |
·免疫印迹法(Western blot)检测胃腺癌细胞中IL-1β对c-Src蛋白激酶的激活作用 | 第18-21页 |
·Annexin V+PI染色后流式细胞仪初步测定c-Src蛋白激酶在IL-1β 促进胃腺癌MKN-45 细胞存活中的作用 | 第21页 |
·结果的统计学分析 | 第21-22页 |
结果 | 第22-29页 |
1. IL-1β 刺激后可减少血清饥饿诱导的MKN-45 细胞的凋亡 | 第22-24页 |
2. IL-1β 可以激活胃腺癌中c-Src蛋白激酶 | 第24-26页 |
3. c-Src抑制剂PP1 可抑制IL-1β 刺激所降低的血清饥饿诱导的胃腺癌MKN-45 细胞的凋亡 | 第26-29页 |
讨论 | 第29-31页 |
小结 | 第31-32页 |
第二部分 c-Src低表达细胞株的获得以及抑制c-Src的表达对IL-1β促进胃腺癌细胞存活作用的影响 | 第32-45页 |
引言 | 第32页 |
材料和方法 | 第32-37页 |
1. 实验材料 | 第32-33页 |
·细胞株及细胞培养所需要的材料 | 第32页 |
·抗体、试剂及其他材料 | 第32页 |
·主要仪器 | 第32-33页 |
2. 实验方法 | 第33-37页 |
·pGPU6/GFP/Neo-c-Src shRNA表达载体和siRNA阴性对照shRNA(scramble shRNA)载体 | 第33-35页 |
·c-Src低表达的胃腺癌MKN-45 细胞稳定克隆的获得 31 | 第35页 |
·免疫印迹法(Western blot)检测稳定转染MKN-45细胞克隆中c-Src shRNA对胃腺癌MKN-45细胞中c-Src的表 达抑制 | 第35-36页 |
·Annexin V+PI染色后流式细胞仪测定抑制c-Src蛋白表达后对IL-1β 促进胃腺癌MKN-45 细胞存活作用的影响 | 第36页 |
·结果的统计学分析 | 第36-37页 |
结果 | 第37-43页 |
1. c-Src shRNA表达载体的测序结果 | 第37-38页 |
2. 成功地获得了pGPU6/GFP/Neo-c-SRC shRNA1、pGPU6/GFP/Neo-c-SRC shRNA2 低表达和siRNA阴性对照pGPU6/GFP/ Neo-Scramble shRNA稳定转染的MKN-45 细胞 | 第38-40页 |
3. 抑制c-Src的表达可降低IL-1β 诱导的MKN-45 细胞的存活 | 第40-43页 |
讨论 | 第43-44页 |
小结 | 第44-45页 |
第三部分 初步探究IL-1β 激活c-Src蛋白激酶增加胃腺癌细胞存活的机制 | 第45-58页 |
引言 | 第45页 |
材料和方法 | 第45-49页 |
1. 实验材料 | 第45-46页 |
·细胞株及细胞培养所需要的材料 | 第45-46页 |
·抗体、试剂及其他材料 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46页 |
2. 实验方法 | 第46-49页 |
·免疫共沉淀试验 | 第46-47页 |
·Western-blot法分析MKN-45 细胞接受IL-1β 刺激后Stat3 的活化 | 第47页 |
·Annexin V+PI染色后流式细胞仪测定抑制Stat3 活性后对IL-1β 降低胃腺癌MKN-45 细胞凋亡作用的影响. | 第47-48页 |
·结果的统计学分析 | 第48-49页 |
结果 | 第49-55页 |
1. IL-1β激活c-Src是通过TRAF6与c-Src相互作用 | 第49-50页 |
2. IL-1β可以激活胃腺癌MKN-45细胞中的Stat3 | 第50-52页 |
3. IL-1β 增加胃腺癌MKN-45 细胞存活的作用涉及到Stat3 | 第52-55页 |
讨论 | 第55-57页 |
小结 | 第57-58页 |
结论 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
综述 | 第65-76页 |
参考文献 | 第72-76页 |
致谢 | 第76页 |