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白木香茉莉酸类物质合成途径关键酶AOS1基因的克隆与表达研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
1 引言第12-24页
   ·白木香简介第12-17页
     ·概述第12-14页
     ·白木香研究现状第14-17页
   ·茉莉酸类物质生物合成途径的分子生物学研究进展第17-20页
     ·茉莉酸类物质生物合成途径及其关键酶第17-19页
     ·茉莉酸类化合物生物合成调控的分子机理及其信号通路第19-20页
   ·茉莉酸类物质对植物次生代谢调控方面的分子生物学研究进展第20-22页
     ·茉莉酸类物质诱导调控植物次生代谢产物第20-21页
     ·展望第21-22页
   ·本研究的目的与意义第22-23页
   ·技术路线第23-24页
2 材料与方法第24-41页
   ·材料与试剂第24-25页
     ·植物材料第24页
     ·购买的实验试剂及试剂盒第24页
     ·实验仪器和设备第24-25页
     ·自配的主要标准试剂第25页
     ·菌种与载体第25页
   ·实验方法第25-41页
     ·白木香愈伤组织的诱导第25-26页
     ·Monotrap法萃取茉莉酸甲酯处理后的白木香愈伤组织挥发性成分的优化第26-27页
     ·白木香叶片总RNA的提取第27页
     ·RNA的质量检测第27-28页
     ·白木香基因组DNA的提取第28-29页
     ·白木香茉莉酸生物合成途径丙二烯氧化物合酶AsAOS1基因的克隆第29-31页
     ·白木香内参GAPDH基因的克隆第31-35页
     ·生物信息学分析第35页
     ·AsAOS1基因表达分析第35-37页
     ·植物表达载体的构建第37-39页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化和筛选第39-40页
     ·转基因拟南芥PCR检测第40-41页
3 结果与分析第41-70页
   ·Monotrap萃取茉莉酸甲酯处理的白木香愈伤组织挥发性成分的GC-MS检测第41-45页
     ·Monotrap法萃取茉莉酸甲酯处理的白木香愈伤组织挥发性成分最佳条件的确定第41页
     ·白木香愈伤组织挥发性成分的分析第41-45页
   ·白木香总RNA及基因组DNA的提取第45页
   ·白木香AsAOS1基因全长的克隆及生物信息学分析第45-56页
     ·白木香AsAOS1基因全长的克隆和性质分析第45-48页
     ·推导的AsAOS1氨基酸序列的分析第48-52页
     ·AsAOS1蛋白理化性质分析第52-54页
     ·AsAOS1蛋白二级结构预测第54页
     ·AsAOS1蛋白三级结构预测第54-55页
     ·白木香AsAOS1基因氨基酸序列的系统进化分析第55-56页
   ·GAPDH全长的克隆及生物信息学分析第56-61页
     ·GAPDH基因cDNA全长的扩增第56页
     ·AsGAPDH基因的生物信息学分析第56-61页
   ·白木香AsAOS1基因的表达分析第61-65页
     ·白木香AsAOS1基因及倍半萜生物合成途径关键酶基因DXPS、HMGR、FPS及ASS1的组织特异性表达分析第61-63页
     ·白木香AsAOS1基因及倍半萜生物合成途径关键酶基因的诱导表达分析第63-65页
   ·白木香AsAOS1植物表达载体的构建第65-70页
     ·质粒DNA的提取及质粒的酶切反应第65-66页
     ·白木香AsAOS1基因pXCS-AsAOS1植物表达载体的构建第66-67页
     ·白木香AsAOS1基因pXCS-AsAOS1植物表达载体的鉴定第67-68页
     ·转基因拟南芥的分子检测第68-70页
4 讨论第70-75页
   ·白木香丙二烯氧化物合成酶AsAOS1基因的克隆第70页
   ·白木香内参GAPDH基因全长的克隆第70-71页
   ·白木香茉莉酸合成途径AsAOS1基因与沉香特异性物质形成相关基因的表达分析第71-73页
   ·茉莉酸甲酯(MeJA)诱导子与白木香次生代谢产物形成的关系第73-75页
5 结论第75-77页
6 本文创新点第77-78页
参考文献第78-84页
缩略词表第84-85页
硕士在读期间发表的相关论文第85-86页
致谢第86-87页

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