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‘红阳猕猴桃果实发育转录组及花青素累积机理研究

中文摘要第1-7页
ABSTRACT第7-15页
1 前言第15-37页
   ·‘红阳’猕猴桃概述第15-16页
   ·转录组研究概述第16-19页
     ·转录组及转录组测序(RNA-Seq)第16-17页
     ·RNA-Seq的应用第17-19页
   ·RNA-Seq在果树分子生物学研究中的应用第19-21页
     ·RNA-Seq在果实发育与品质研究中的应用第19-20页
     ·RNA-Seq在果实应对环境胁迫研究中的应用第20-21页
   ·果实发育分子生物学研究第21-33页
     ·果实发育中激素变化研究第21-27页
     ·果实发育中糖-淀粉合成代谢研究第27-28页
     ·果实发育中维生素C合成代谢研究第28-30页
     ·花青素生物合成研究进展第30-33页
       ·花青素合成基因研究第30-32页
       ·花青素合成的调控因子第32-33页
   ·研究的目的和意义第33-34页
   ·主要研究内容第34-35页
   ·技术路线第35-37页
2 材料与方法第37-52页
   ·材料与试剂第37-40页
     ·植物材料第37页
     ·载体及菌株第37页
     ·酶及试剂第37-38页
     ·培养基及试剂配制第38页
     ·寡核苷酸引物第38-40页
   ·仪器设备第40-41页
   ·方法和步骤第41-52页
     ·猕猴桃RNA-Seq测序方法第41-44页
       ·cDNA文库构建和测序第41页
       ·转录组测序质量评估第41-42页
       ·转录组基因功能注释和表达量分析第42页
       ·差异基因表达分析第42页
       ·基因差异表达pathway及基因表达聚类分析第42-43页
       ·基因结构优化和新转录本注释第43页
       ·可变剪接和SNP分析第43-44页
     ·分子生物学实验方法第44-49页
       ·RNA样品的制备和检测第44-45页
       ·RNA反转录反应第45页
       ·实时荧光定量PCR反应第45-46页
       ·基因克隆转化大肠杆菌第46页
       ·农杆菌感受态细胞的制备(冻融法)第46-47页
       ·农杆菌转化法(冻融法)第47页
       ·拟南芥转化法(滴液法)第47页
       ·拟南芥抗性株系的筛选第47-48页
       ·拟南芥单拷贝株系的筛选第48页
       ·烟草叶片表皮细胞瞬时表达检测第48-49页
       ·AcMYB10转基因拟南芥功能验证第49页
     ·猕猴桃生理学实验第49-52页
       ·猕猴桃内源激素HPLC测定法第49-50页
       ·猕猴桃果实维生素C的HPLC测定法第50页
       ·猕猴桃果实可溶性糖及淀粉测定第50-51页
       ·猕猴桃原花青素测定第51页
       ·猕猴桃花青素提取和测定第51-52页
3 结果与分析第52-92页
   ·猕猴桃果实发育第52-53页
   ·RNA-Seq分析结果第53-62页
     ·RNA质量及浓度检测第53-54页
     ·猕猴桃RNA-Seq质量分析第54-55页
     ·转录组中基因结构优化、新转录及SNP分析第55-57页
     ·差异基因表达分析第57-62页
   ·猕猴桃发育相关基因表达分析第62-76页
     ·激素发育与基因表达分析第62-70页
       ·AUX合成候选基因与基因表达水平第62-63页
       ·CK合成候选基因与基因表达水平第63-65页
       ·ABA合成候选基因与基因表达水平第65-67页
       ·GA合成候选基因与基因表达水平第67-68页
       ·ET合成候选基因与基因表达水平第68-70页
     ·猕猴桃果实糖、淀粉相关基因表达分析第70-74页
     ·猕猴桃果实Vc候选基因及表达分析第74-76页
   ·类黄酮合成相关基因及转录调控因子功能研究第76-85页
     ·类黄酮合成候选基因第76-79页
     ·类黄酮合成候选基因在果实发育过程中的表达水平第79-82页
     ·类黄酮合成转录调控因子研究第82-84页
     ·转录调控因子的转录水平分析第84-85页
   ·转录因AcMYB10功能研究第85-92页
     ·转录因子AcMYB10序列克隆及生物信息学分析第85-86页
     ·AcMYB10植物表达载体的构建及亚细胞定位第86-88页
     ·AcMYB10功能验证第88-92页
       ·AcMYB10在转基因拟南芥中的表达量分析第88-89页
       ·AcMYB10过表达拟南芥表型分析第89-90页
       ·AcMYB10过表达拟南芥花青素合成基因表达分析第90-92页
4 讨论第92-98页
   ·‘红阳’猕猴桃转录组测序特点第92页
   ·猕猴桃果实内源激素相关基因发掘第92-94页
   ·猕猴桃果实中糖及淀粉积累相关基因第94-95页
   ·猕猴桃果实中Vc合成及代谢相关基因第95-96页
   ·猕猴桃果实花青素累积机理第96-98页
参考文献第98-109页
附录第109-117页
作者简介及在学期间发表的学术论文与研究成果第117-118页
致谢第118页

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