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PRRSV河南株ORF7基因的克隆表达及N蛋白免疫原性分析

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
第一章 文献综述第11-24页
   ·猪繁殖与呼吸综合征研究概况第12页
   ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组和编码蛋白的功能第12-16页
     ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因结构及其相关蛋白第12-13页
     ·猪繁殖与呼吸综合征病毒基因编码的蛋白质及其功能第13-16页
   ·猪繁殖与呼吸综合征免疫学研究进展第16-21页
     ·先天免疫第17页
     ·体液免疫第17-18页
     ·细胞免疫第18-19页
     ·免疫调节和免疫逃逸第19-20页
     ·PRRSV遗传多样性及疫苗研究进展第20-21页
     ·抗体依赖增强作用研究进展第21页
   ·猪繁殖与呼吸综合征检测技术研究进展第21-23页
     ·免疫胶体金技术第21-22页
     ·免疫荧光抗体技术第22页
     ·酶联免疫吸附试验第22页
     ·核酸探针检测技术第22页
     ·反转录—集合酶链式反应技术第22-23页
     ·乳胶凝集实验第23页
   ·本研究的目的意义第23-24页
第二章 PRRSV河南分离株ORF7基因的克隆表达与纯化第24-50页
   ·材料与方法第24-26页
     ·病毒、载体、菌株第24页
     ·主要试剂盒和工具酶第24页
     ·主要仪器设备第24页
     ·培养基和主要试剂第24-26页
   ·试验方法及步骤第26-38页
     ·PRRSV的增殖第26-27页
     ·PRRSV RNA的提取第27页
     ·PRRSV的分子诊断第27-31页
     ·PRRSV ORF7表达载体的构建第31-34页
     ·目的基因序列测定及毒株进化性分析第34页
     ·重组质粒pGEX-6p-1-N的原核表达及表达条件优化和纯化第34-38页
   ·结果第38-47页
     ·PRRSV的分子诊断结果第38-42页
     ·PRRSV ORF7基因表达引物PCR结果、酶切结果第42-43页
     ·重组蛋白在大肠杆菌中的诱导表达及条件优化第43-46页
     ·表达产物的可溶性分析第46页
     ·表达产物的纯化与检测第46-47页
   ·讨论第47-50页
第三章 表达N蛋白的抗原性检测第50-54页
   ·材料与方法第50-51页
     ·实验动物及主要试剂第50页
     ·主要仪器第50页
     ·主要溶液配制第50页
     ·表达蛋白与PRRSV阳性血清的Western-blot第50-51页
     ·表达蛋白与PRRSV阳性血清的ELISA第51页
     ·动物免疫第51页
     ·效价测定第51页
   ·结果及分析第51-53页
     ·N蛋白与PRRSV血清Western-blot结果第51页
     ·N蛋白与PRRSV血清ELISA结果第51-52页
     ·N蛋白免疫小鼠后的效价测定第52-53页
   ·讨论第53-54页
第四章 研究总结第54-55页
参考文献第55-59页
附录 英文缩略词表(Abbreviations)第59-61页
作者简历第61-62页
致谢第62页

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