摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-24页 |
·猪繁殖与呼吸综合征研究概况 | 第12页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组和编码蛋白的功能 | 第12-16页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因结构及其相关蛋白 | 第12-13页 |
·猪繁殖与呼吸综合征病毒基因编码的蛋白质及其功能 | 第13-16页 |
·猪繁殖与呼吸综合征免疫学研究进展 | 第16-21页 |
·先天免疫 | 第17页 |
·体液免疫 | 第17-18页 |
·细胞免疫 | 第18-19页 |
·免疫调节和免疫逃逸 | 第19-20页 |
·PRRSV遗传多样性及疫苗研究进展 | 第20-21页 |
·抗体依赖增强作用研究进展 | 第21页 |
·猪繁殖与呼吸综合征检测技术研究进展 | 第21-23页 |
·免疫胶体金技术 | 第21-22页 |
·免疫荧光抗体技术 | 第22页 |
·酶联免疫吸附试验 | 第22页 |
·核酸探针检测技术 | 第22页 |
·反转录—集合酶链式反应技术 | 第22-23页 |
·乳胶凝集实验 | 第23页 |
·本研究的目的意义 | 第23-24页 |
第二章 PRRSV河南分离株ORF7基因的克隆表达与纯化 | 第24-50页 |
·材料与方法 | 第24-26页 |
·病毒、载体、菌株 | 第24页 |
·主要试剂盒和工具酶 | 第24页 |
·主要仪器设备 | 第24页 |
·培养基和主要试剂 | 第24-26页 |
·试验方法及步骤 | 第26-38页 |
·PRRSV的增殖 | 第26-27页 |
·PRRSV RNA的提取 | 第27页 |
·PRRSV的分子诊断 | 第27-31页 |
·PRRSV ORF7表达载体的构建 | 第31-34页 |
·目的基因序列测定及毒株进化性分析 | 第34页 |
·重组质粒pGEX-6p-1-N的原核表达及表达条件优化和纯化 | 第34-38页 |
·结果 | 第38-47页 |
·PRRSV的分子诊断结果 | 第38-42页 |
·PRRSV ORF7基因表达引物PCR结果、酶切结果 | 第42-43页 |
·重组蛋白在大肠杆菌中的诱导表达及条件优化 | 第43-46页 |
·表达产物的可溶性分析 | 第46页 |
·表达产物的纯化与检测 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47-50页 |
第三章 表达N蛋白的抗原性检测 | 第50-54页 |
·材料与方法 | 第50-51页 |
·实验动物及主要试剂 | 第50页 |
·主要仪器 | 第50页 |
·主要溶液配制 | 第50页 |
·表达蛋白与PRRSV阳性血清的Western-blot | 第50-51页 |
·表达蛋白与PRRSV阳性血清的ELISA | 第51页 |
·动物免疫 | 第51页 |
·效价测定 | 第51页 |
·结果及分析 | 第51-53页 |
·N蛋白与PRRSV血清Western-blot结果 | 第51页 |
·N蛋白与PRRSV血清ELISA结果 | 第51-52页 |
·N蛋白免疫小鼠后的效价测定 | 第52-53页 |
·讨论 | 第53-54页 |
第四章 研究总结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-59页 |
附录 英文缩略词表(Abbreviations) | 第59-61页 |
作者简历 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |