| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 缩略词 | 第13-14页 |
| 1 绪论 | 第14-23页 |
| ·引言 | 第14页 |
| ·研究背景 | 第14-18页 |
| ·真菌染色体核型分析的研究 | 第14-17页 |
| ·有丝分裂行为动态观察的研究 | 第17-18页 |
| ·荧光原位杂交技术的研究 | 第18页 |
| ·课题的立题依据与实验目的 | 第18-19页 |
| ·立题依据 | 第18-19页 |
| ·实验目的 | 第19页 |
| ·本课题研究内容 | 第19-20页 |
| ·绿僵菌染色体的核型分析 | 第19-20页 |
| ·Pgpd-H1-GFP 表达载体的构建 | 第20页 |
| ·Pgpd-H1-GFP/绿僵菌阳性转化子的获得 | 第20页 |
| ·Pgpd-H1-GFP/绿僵菌有丝分裂行为观察 | 第20页 |
| ·荧光原位杂交 | 第20页 |
| ·技术路线 | 第20-21页 |
| ·绿僵菌 H1-GFP 融合表达菌株的构建及其有丝分裂行为的动态观察 | 第20-21页 |
| ·改进的染色体制片方法与绿僵菌核型分析 | 第21页 |
| ·绿僵菌 Ma102 的 rDNA 荧光原位杂交 | 第21页 |
| ·本课题创新之处 | 第21-23页 |
| 2 绿僵菌 H1-GFP 融合表达菌株的建立及其有丝分裂行为的动态观察 | 第23-37页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验所用菌株 | 第23页 |
| ·主要培养基及配制方法 | 第23页 |
| ·实验所需主要试剂 | 第23-24页 |
| ·主要实验试剂的配制 | 第24页 |
| ·主要设备 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-32页 |
| ·真菌基因组的大量提取 | 第25页 |
| ·Pgpd-H1-GFP 载体的构建 | 第25-30页 |
| ·电激转化农杆菌 | 第30-31页 |
| ·农杆菌介导的绿僵菌转化实验 | 第31页 |
| ·Pgpd-H1-GFP/绿僵菌阳性转化子的鉴定 | 第31-32页 |
| ·荧光显微观察 Pgpd-H1-GFP/绿僵菌的有丝分裂行为 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-36页 |
| ·Pgpd 和 H1 目的基因片段的克隆 | 第32-33页 |
| ·Pgpd-H1-GFP 质粒的鉴定 | 第33页 |
| ·Pgpd-H1-GFP/绿僵菌阳性克隆的鉴定 | 第33-34页 |
| ·Pgpd-H1-GFP/绿僵菌阳性转化子的显微观察 | 第34-35页 |
| ·H1-GFP 在绿僵菌有丝分裂中的行为观察 | 第35-36页 |
| ·实验讨论 | 第36-37页 |
| 3 绿僵菌染色体核型分析 | 第37-47页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验所用菌株 | 第37页 |
| ·主要培养基及配制方法 | 第37页 |
| ·实验所需主要试剂 | 第37页 |
| ·主要实验试剂的配制 | 第37页 |
| ·主要设备 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·菌丝的固定 | 第38页 |
| ·改良的胚芽管爆裂制片（GTBM） | 第38-39页 |
| ·图像采集与核型分析 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-45页 |
| ·载玻片上原生质体的制备 | 第39-40页 |
| ·染色体的显微观察 | 第40-41页 |
| ·绿僵菌染色体条数统计 | 第41页 |
| ·核型分析 | 第41-44页 |
| ·核型模式图 | 第44-45页 |
| ·实验讨论 | 第45-47页 |
| 4 绿僵菌 rDNA 荧光原位杂交 | 第47-54页 |
| ·实验材料 | 第47-48页 |
| ·实验所用菌株 | 第47页 |
| ·主要培养基及配制方法 | 第47页 |
| ·实验所需主要试剂 | 第47页 |
| ·主要实验试剂的配制 | 第47-48页 |
| ·主要设备 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·rDNA 片段的获取 | 第48-49页 |
| ·缺口平移法制作 rDNA 探针 | 第49页 |
| ·抗地高辛抗原结合片段的制备 | 第49页 |
| ·荧光原位杂交 | 第49-51页 |
| ·结果与分析 | 第51-53页 |
| ·rDNA PCR 扩增结果 | 第51-52页 |
| ·rDNA 探针的制备 | 第52页 |
| ·荧光原位杂交 | 第52-53页 |
| ·实验讨论 | 第53-54页 |
| 5 主要结论 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 1 | 第60-63页 |
| 附录 2 | 第63页 |
