| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略词 | 第8-12页 |
| 1. 绪论 | 第12-26页 |
| ·油菜菌核病的相关研究 | 第12-16页 |
| ·油菜菌核病害 | 第12-13页 |
| ·油菜菌核病的致病机理 | 第13-15页 |
| ·油菜对菌核病的抗性机制 | 第15页 |
| ·抗菌核病的研究现状 | 第15-16页 |
| ·ERF转录因子 | 第16-20页 |
| ·植物抗病反应机制 | 第17页 |
| ·ERF转录因子的特点 | 第17页 |
| ·ERF转录因子在植物抗病信号传递途径中的作用 | 第17-18页 |
| ·ERF转录因子在作物抗病反应中的作用 | 第18-20页 |
| ·转基因技术在油菜中的应用 | 第20-24页 |
| ·农杆菌介导法 | 第21-23页 |
| ·基因枪轰击转化法 | 第23页 |
| ·花粉管通道转化法 | 第23-24页 |
| ·本研究的主要目的及意义 | 第24-26页 |
| 2. 载体pBI121-TiERF1的构建 | 第26-42页 |
| ·材料与方法 | 第26-34页 |
| ·质粒与菌株 | 第26页 |
| ·酶、试剂及仪器 | 第26页 |
| ·LBA4404的验证 | 第26-27页 |
| ·pA20-TiERF1质粒转化大肠杆菌DH5α及检测 | 第27-30页 |
| ·TiERFl基因的扩增及回收 | 第30-32页 |
| ·植物表达载体pBI121-TiERF1的构建 | 第32-33页 |
| ·pBI121-TiERF1表达载体转化农杆菌 | 第33-34页 |
| ·菌种的保存 | 第34页 |
| ·结果与分析 | 第34-39页 |
| ·TiERFl基因PCR扩增体系的建立及优化 | 第34-36页 |
| ·LBA4404、pA20-TiERF1质粒的验证结果 | 第36-37页 |
| ·TiERF1基因连接T载体的检测 | 第37-38页 |
| ·重组质粒pBI121-TiERF1的检测 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pBI121-TiERF1转化根癌农杆菌LBA4404的检测 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-42页 |
| 3. 甘蓝型油菜的遗传转化及转基因油菜的获得 | 第42-54页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·植物材料 | 第42页 |
| ·菌种与质粒 | 第42页 |
| ·试剂与仪器 | 第42页 |
| ·培养基 | 第42-43页 |
| ·油菜再生体系的构建 | 第43页 |
| ·外植体的处理及预培养 | 第43页 |
| ·卡那霉素临界值的确定 | 第43-44页 |
| ·LBA4404工程菌侵染液的制备 | 第44页 |
| ·共培养及共培养时间选择 | 第44页 |
| ·延迟筛选培养 | 第44页 |
| ·生根培养 | 第44页 |
| ·炼苗及移栽 | 第44页 |
| ·结果及分析 | 第44-51页 |
| ·油菜子叶再生体系的构建 | 第44-47页 |
| ·卡那霉素浓度对子叶节分化的影响 | 第47-48页 |
| ·菌液浓度及侵染时间对转化的影响 | 第48页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第48-50页 |
| ·抗性芽的梯度筛选与植株再生 | 第50-51页 |
| ·湘油15号和中双9号再生苗 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| ·外植体的选择 | 第52页 |
| ·延迟筛选对转化的影响 | 第52-53页 |
| ·AS对转化的影响 | 第53页 |
| ·AgNO_3对转化的影响 | 第53-54页 |
| 4. 转化苗的分子检测 | 第54-60页 |
| ·材料与方法 | 第54-57页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·溶液与试剂 | 第54-55页 |
| ·油菜基因组DNA的提取 | 第55-56页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-58页 |
| ·油菜基因组DNA提取 | 第57页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| 5. 结论与展望 | 第60-62页 |
| ·主要结论 | 第60-61页 |
| ·成功构建双子叶植物表达载体pBI121-TiERF1 | 第60页 |
| ·甘蓝型油菜子叶节农杆菌介导转化体系的建立 | 第60-61页 |
| ·卡那霉素抗性植株PCR检测 | 第61页 |
| ·展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 附录A TiERF1基因连接T载体后与原有序列的比对情况 | 第71-73页 |
| 附录B 攻读学位期间的主要学术成果 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
