摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-15页 |
一、杜氏盐藻类钙调素蛋白1.6 A晶体结构研究 | 第15-63页 |
1 引言 | 第15-19页 |
2 材料与方法 | 第19-57页 |
·材料 | 第19-21页 |
·主要仪器设备 | 第19-20页 |
·主要试剂及材料 | 第20-21页 |
·常用培养基及液体试剂的配置 | 第21页 |
·方法 | 第21-31页 |
·生物信息学计算与预测 | 第21-22页 |
·表达载体构建 | 第22页 |
·DSCLP表达 | 第22-23页 |
·DSCLP纯化 | 第23-25页 |
·DSCLP结晶 | 第25-28页 |
·晶体的捞取与衍射 | 第28页 |
·数据处理 | 第28-29页 |
·相角的确定 | 第29-30页 |
·结构解析 | 第30-31页 |
·合理性检查 | 第31页 |
·DSCLP同其他CaM结构的比较 | 第31页 |
·结果与讨论 | 第31-57页 |
·生物信息学预测 | 第31-33页 |
·载体构建 | 第33-34页 |
·DSCLP表达 | 第34页 |
·DSCLP纯化 | 第34-36页 |
·DSCLP结晶 | 第36页 |
·晶体的捞取与衍射 | 第36-38页 |
·数据处理 | 第38-43页 |
·相角确定 | 第43页 |
·结构解析 | 第43-46页 |
·合理性检查 | 第46-50页 |
·DSCLP结构的分析讨论及与其他CaM的对比 | 第50-57页 |
3 小结与展望 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
二、杜氏盐藻KCBP马达区及其与类钙调素蛋白复合物的表达、纯化和结晶 | 第63-106页 |
1 引言 | 第63-64页 |
2 KMD表达、纯化及结晶条件搜索 | 第64-78页 |
·材料与方法 | 第64-66页 |
·材料 | 第64-66页 |
·方法 | 第66-72页 |
·生物信息学对目的蛋白预测 | 第66-67页 |
·载体构建与KMD的表达 | 第67页 |
·KMD的纯化及稳定性检测 | 第67-71页 |
·结晶条件搜索 | 第71-72页 |
·结果 | 第72-77页 |
·KMD生物信息学预测 | 第72页 |
·载体构建与KMD表达 | 第72-74页 |
·KMD纯化 | 第74-77页 |
·KMD结晶条件搜索 | 第77页 |
·小结与讨论 | 第77-78页 |
3 KMDC表达、纯化和结晶条件搜索 | 第78-86页 |
·材料与方法 | 第78-80页 |
·材料 | 第78-80页 |
·方法 | 第80-82页 |
·生物信息学对目的蛋白预测 | 第80-81页 |
·KMDC表达载体构建 | 第81页 |
·KMDC表达与纯化 | 第81页 |
·KMDC结晶条件搜索 | 第81-82页 |
·结果 | 第82-86页 |
·生物信息学预测 | 第82页 |
·载体构建 | 第82-84页 |
·KMDC表达与纯化 | 第84-86页 |
·结晶条件搜索 | 第86页 |
·小结与讨论 | 第86页 |
4 KMDC与DSCLP相互作用验证、共纯化和结晶条件搜索 | 第86-95页 |
·材料与方法 | 第87-89页 |
·材料 | 第87-89页 |
·方法 | 第89-91页 |
·KMDC与DSCLP的表达 | 第89页 |
·KMDC与DSCLP相互作用验证 | 第89-90页 |
·KMDC与DSCLP共纯化 | 第90-91页 |
·结晶条件搜索 | 第91页 |
·结果 | 第91-93页 |
·KMDC与DSCLP表达 | 第91页 |
·KMDC与DSCLP相互作用验证 | 第91-92页 |
·KMDC与DSCLP共纯化 | 第92-93页 |
·结晶条件搜索 | 第93页 |
·小结与讨论 | 第93-95页 |
5 KMDC突变体载体构建、表达、纯化及结晶条件搜索 | 第95-104页 |
·材料与方法 | 第97-99页 |
·材料 | 第97-99页 |
·方法 | 第99-100页 |
·生物信息学对目的蛋白预测 | 第99页 |
·突变体表达载体构建 | 第99页 |
·表达与纯化 | 第99-100页 |
·结晶条件搜索 | 第100页 |
·结果 | 第100-103页 |
·生物信息学分析结果 | 第100页 |
·突变体载体构建 | 第100-102页 |
·表达与纯化 | 第102-103页 |
·结晶条件搜索 | 第103页 |
·小结与讨论 | 第103-104页 |
参考文献 | 第104-106页 |
综述 | 第106-120页 |
参考文献 | 第117-120页 |
附录 | 第120-122页 |
后记 | 第122-123页 |
致谢 | 第123-125页 |
个人简历 | 第125页 |
发表论文 | 第125页 |