| 致谢 | 第1-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-27页 |
| ·膜脂脂肪酸的组分和分类 | 第10页 |
| ·低温胁迫对植物细胞膜的影响 | 第10-12页 |
| ·膜脂组分的变化与植物抗寒性的关系 | 第12-15页 |
| ·磷脂变化与植物抗寒性的关系 | 第12-13页 |
| ·脂肪酸不饱和度的变化与植物抗寒性的关系 | 第13-15页 |
| ·脂肪酸去饱和酶基因与植物抗寒性的关系 | 第15-20页 |
| ·脂酰-ACP 去饱和酶基因研究 | 第15-16页 |
| ·脂酰-脂（Acyl-lipid）去饱和酶基因研究 | 第16-20页 |
| ·在碳链上引入第 2 个双键的脂肪酸脱饱和酶 | 第17-18页 |
| ·在碳链上引入第 3 个双键的脂肪酸脱饱和酶 | 第18-20页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的基本概述 | 第20-23页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的基本原理 | 第20-21页 |
| ·实时荧光定量 PCR 的定量方法 | 第21-22页 |
| ·内参基因的选择 | 第22-23页 |
| ·实时荧光定量 PCR 在植物中的应用 | 第23页 |
| ·菊花研究概述 | 第23-27页 |
| ·菊花冻害外部形态的变化 | 第24页 |
| ·菊花的抗寒性品种筛选 | 第24-25页 |
| ·菊花的内参基因 | 第25-27页 |
| 2 引言 | 第27-28页 |
| 3 材料与方法 | 第28-38页 |
| ·试验材料与处理 | 第28-30页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·材料处理 | 第28页 |
| ·菌株与载体 | 第28页 |
| ·工具酶及生化试剂 | 第28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·PCR 引物 | 第29页 |
| ·药品的配制 | 第29-30页 |
| ·CTAB 缓冲液配制 | 第29页 |
| ·TAE 电泳缓冲液配制 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-38页 |
| ·总 RNA 的提取与检测 | 第30-31页 |
| ·试剂和器皿的准备 | 第30页 |
| ·试验准备 | 第30页 |
| ·采用改良 CTAB 法提取 RNA | 第30页 |
| ·RNA 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第30-31页 |
| ·RNA 纯度及浓度检测 | 第31页 |
| ·RNA 反转录 | 第31页 |
| ·中间片段的获得 | 第31-32页 |
| ·3’RACE 获得 3’端序列 | 第32-33页 |
| ·5’RACE 获得 5’端序列 | 第33页 |
| ·菊花 ω-3 脂肪酸去饱和酶基因全长的克隆 | 第33-34页 |
| ·PCR 扩增产物的检测与回收纯化 | 第34-35页 |
| ·菊花 ω-3 脂肪酸去饱和酶基因的连接及转化 | 第35页 |
| ·连接 | 第35页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第35页 |
| ·基因序列分析 | 第35-36页 |
| ·ω-3 脂肪酸去饱和酶基因在低温胁迫下的表达分析 | 第36页 |
| ·菊花脂肪酸组分和含量的测定 | 第36-38页 |
| 4 结果与分析 | 第38-49页 |
| ·菊花脂肪酸去饱和酶基因的克隆 | 第38-42页 |
| ·菊花叶片 RNA 的提取及反转录 | 第38页 |
| ·ω-3 脂肪酸去饱和酶基因中间片段的克隆 | 第38-39页 |
| ·ω-3 脂肪酸去饱和酶基因 3’端的克隆 | 第39-40页 |
| ·ω-3 脂肪酸去饱和酶基因 5’端的克隆 | 第40页 |
| ·ω-3 脂肪酸去饱和酶基因全长的克隆 | 第40-42页 |
| ·菊花 ω-3 脂肪酸去饱和酶基因序列同源性分析及分子进化树构建 | 第42-44页 |
| ·菊花 CmFAD7 基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第44-46页 |
| ·菊花 CmFAD7 基因实时荧光定量表达及脂肪酸含量变化 | 第46-49页 |
| ·菊花不同处理 RNA 提取 | 第46页 |
| ·菊花叶片和根系中 CmFAD7 基因表达 | 第46-47页 |
| ·菊花叶片和根系中脂肪酸含量变化 | 第47-49页 |
| 5 结论与讨论 | 第49-51页 |
| ·结论 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| ·CmFAD7 基因序列特征分析 | 第49-50页 |
| ·CmFAD7 基因的表达及脂肪酸含量变化分析 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-61页 |
| 英文摘要 | 第61-62页 |
