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团头鲂结缔组织生长因子的克隆和PB转座子、PB-Tgf2复合转座元件的构建及转基因效率研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
引言第12-15页
第一章 团头鲂结缔组织生长因子 CTGFA/CTGFB 的克隆第15-37页
   ·实验材料第15-16页
     ·实验材料第15页
     ·主要仪器第15-16页
     ·主要化学和生物试剂第16页
   ·实验方法第16-27页
     ·RNA 提取第16-17页
     ·小片段扩增及 3’RACE 和 5’RACE第17-22页
     ·逆转录 PCR(RT-PCR)第22-23页
     ·整胚原位杂交第23-26页
     ·序列分析与系统进化树的构建第26-27页
   ·实验结果第27-36页
     ·团头鲂结缔组织生长因子 Ctgfa/Ctgfb 基因的 cDNA 序列分析第27-32页
     ·同源性及分子进化分析第32-33页
     ·团头鲂结缔组织生长因子 Ctgfa/b mRNA 在团头鲂胚胎和成体组织中的表达第33-36页
   ·讨论第36-37页
第二章 PIGGYBAC 转座元件的构建及其在团头鲂基因组中的转基因效率第37-45页
   ·材料与方法第38-42页
     ·实验材料第38页
     ·主要仪器第38页
     ·主要化学和生物试剂第38页
     ·实验方法第38-42页
   ·实验结果第42-44页
     ·转基因供体质粒 pPBs-EF1α-eGFP 和转基因辅助质粒 pCS2-PBTP 的构建第42页
     ·绿色荧光的观察及 eGFP 基因的 PCR 检测第42-44页
   ·讨论第44-45页
第三章 PIGGYBAC-TGF2 复合转座元件介导的团头鲂基因组转基因效率研究第45-53页
   ·材料与方法第46-50页
     ·实验材料第46页
     ·主要仪器第46页
     ·主要化学和生物试剂第46-47页
     ·实验方法第47-50页
   ·实验结果第50-52页
     ·转基因供体质粒 pPB-Tgf2-RPrmP-eGFP 的构建第50-51页
     ·eGFP 基因的 PCR 检测第51-52页
   ·讨论第52-53页
结论与展望第53-55页
参考文献第55-59页
致谢第59-60页
在校期间论文发表情况第60页

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