| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-42页 |
| 第一节 慢病毒概述 | 第14-16页 |
| ·慢病毒基本特征 | 第14-15页 |
| ·慢病毒的分子生物学特征 | 第15-16页 |
| 第二节 HIV概述 | 第16-25页 |
| ·HIV基本结构 | 第16-18页 |
| ·HIV生活周期 | 第18-20页 |
| ·HIV蛋白结构研究 | 第20-25页 |
| 第三节 EIAV概述 | 第25-30页 |
| ·EIAV病毒颗粒结构 | 第26页 |
| ·EIAV基因组结构和生活周期 | 第26-28页 |
| ·EIAV感染的临床特征 | 第28-29页 |
| ·EIAV疫苗研究进展 | 第29-30页 |
| 第四节 病毒-细胞融合(结构方面) | 第30-39页 |
| ·流感病毒融合过程 | 第32-33页 |
| ·黄病毒E融合过程 | 第33-35页 |
| ·VSV-G(水疱性口腔炎病毒G)融合过程 | 第35-36页 |
| ·融合过程中应注意的几个问题 | 第36-39页 |
| 第五节 本研究的目的和意义 | 第39-42页 |
| 第二章 材料和方法 | 第42-75页 |
| 第一节 实验材料 | 第42-51页 |
| ·细胞 | 第42页 |
| ·菌株 | 第42-44页 |
| ·质粒 | 第44-46页 |
| ·试剂、酶类和耗材 | 第46-47页 |
| ·仪器及设备 | 第47-48页 |
| ·主要溶液配制 | 第48-51页 |
| 第二节 实验方法 | 第51-75页 |
| ·基因克隆 | 第51-56页 |
| ·蛋白质的表达和纯化 | 第56-58页 |
| ·晶体生长 | 第58-62页 |
| ·数据收集、结构的解析和修正 | 第62-69页 |
| ·圆二色(CD)原理和方法 | 第69-72页 |
| ·细胞培养及相关实验方法 | 第72-73页 |
| ·细胞融合相关实验 | 第73页 |
| ·萤火虫荧光素酶活性测定(Luciferase Assay) | 第73-74页 |
| ·western blot实验 | 第74-75页 |
| 第三章 结果与分析-EIAV部分 | 第75-103页 |
| 第一节 EIAV gp45表达纯化 | 第75-82页 |
| ·EIAV gp45基本信息预测 | 第75-77页 |
| ·EIAV gp45克隆构建 | 第77页 |
| ·EIAV gp45蛋白表达纯化 | 第77-82页 |
| 第二节 EIAV gp45WT晶体生长和优化 | 第82-84页 |
| ·EIAV gp45WT晶体生长 | 第82-83页 |
| ·EIAV gp45WT晶体的优化和处理 | 第83-84页 |
| ·晶体的冻存和防冻剂的选择 | 第84页 |
| 第三节 EIAV gp45WT结构解析 | 第84-89页 |
| ·衍射数据的收集 | 第84-85页 |
| ·衍射数据的处理 | 第85-86页 |
| ·EIAV gp45_(WT)晶体相位的确定 | 第86页 |
| ·EIAV gp45_(WT)结构的修正 | 第86-89页 |
| 第四节 EIAV gp45_(VACCINE)晶体生长和结构解析 | 第89-94页 |
| ·EIAV gp45_(VACCINE)晶体生长 | 第89-90页 |
| ·gp45_(VACCINE)结构解析及修正 | 第90-94页 |
| 第五节 EIAV gp45结构分析 | 第94-97页 |
| 第六节 EIAV功能研究 | 第97-103页 |
| ·EIAV gp45热稳定性研究 | 第97-99页 |
| ·EIAV复制曲线 | 第99-102页 |
| ·EIAV温度敏感性试验 | 第102-103页 |
| 第四章 结果与分析-HIV部分 | 第103-118页 |
| 第一节 CRF07-BC gp41结构解析 | 第103-106页 |
| 第二节 CRF07-BC gp41结构分析 | 第106-108页 |
| 第三节 CRF07-BC gp41功能分析 | 第108-118页 |
| ·CRF07-BC与B亚型gp41介导融合能力比较 | 第108-110页 |
| ·CRF07-BC gp41高突变区融合能力分析 | 第110-112页 |
| ·CRF07-BC gp41高突变区结构分析 | 第112-114页 |
| ·CRF07-BC gp41 562位点突变体的筛选 | 第114-115页 |
| ·CRF07-BC gp41 d位点突变体的筛选 | 第115-116页 |
| ·CRF07-BC gp41 a位点突变体的筛选 | 第116-118页 |
| 第五章 讨论 | 第118-124页 |
| 第一节 HIV gp41晶体学研究进展 | 第118页 |
| 第二节 EIAV gp45结构研究 | 第118-119页 |
| 第三节 HIV fusion过程中gp41变构过程 | 第119-121页 |
| 第四节 EIAV疫苗株免疫机制的研究 | 第121-122页 |
| 第五节 gp41分子内氨基酸的协同进化 | 第122-124页 |
| 第六章 结论和展望 | 第124-126页 |
| 第一节 结论 | 第124页 |
| 第二节 展望 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-136页 |
| 致谢 | 第136-138页 |
| 附录A:术语表 | 第138-139页 |
| 附录B: PMT/BiP/V5-HisA载体改造方案 | 第139-140页 |
| 个人简历 | 第140页 |
