| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-19页 |
| ·禾谷孢囊线虫概述 | 第10页 |
| ·禾谷孢囊线虫分布及危害 | 第10页 |
| ·禾谷孢囊线虫的生活史及传播方式 | 第10页 |
| ·禾谷孢囊线虫的分类及鉴定方法 | 第10-12页 |
| ·禾谷孢囊线虫的种类 | 第10-11页 |
| ·禾谷孢囊线虫的鉴定方法 | 第11-12页 |
| ·荧光定量PCR的原理及应用 | 第12-17页 |
| ·实时荧光定量PCR的原理 | 第12-13页 |
| ·常用的实时荧光定量PCR方法及原理 | 第13-16页 |
| ·绝对定量与相对定量 | 第16页 |
| ·实时荧光定量PCR在线虫检测中的应用 | 第16-17页 |
| ·、提取土壤总DNA方法的研究进展 | 第17-19页 |
| ·细胞裂解 | 第17-18页 |
| ·核酸抽提 | 第18页 |
| ·核酸纯化 | 第18-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-32页 |
| ·材料 | 第20-22页 |
| ·线虫材料 | 第20页 |
| ·仪器 | 第20页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第20页 |
| ·缓冲溶液 | 第20-21页 |
| ·其他溶液 | 第21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·供试菌种 | 第21页 |
| ·引物资料 | 第21-22页 |
| ·方法 | 第22-32页 |
| ·real-time PCR引物及探针设计 | 第22页 |
| ·real-time PCR标准品的制备 | 第22-25页 |
| ·单重real-time PCR反应体系的建立及优化 | 第25-26页 |
| ·两种孢囊线虫双重real-time PCR检测体系的建立及优化 | 第26-27页 |
| ·土壤中孢囊线虫real-time PCR标准曲线的构建方法的探索 | 第27-30页 |
| ·河南省小麦孢囊线虫主要发生地的CCN种类的分子检测 | 第30-32页 |
| 4 结果与分析 | 第32-53页 |
| ·三种孢囊线虫单重检测体系的建立及优化 | 第32-38页 |
| ·单重real-time PCR反应体系的建立及优化 | 第32-34页 |
| ·单重real-time PCR检测体系的特异性 | 第34-36页 |
| ·单重real-time PCR检测体系的灵敏性、动态范围及标准曲线 | 第36-38页 |
| ·燕麦孢囊线虫和菲利普孢囊线虫双重检测体系的建立及优化 | 第38-42页 |
| ·双重real-time PCR体系的建立及优化 | 第38-40页 |
| ·检测体系的灵敏性、动态范围及标准曲线 | 第40-41页 |
| ·双重real-time PCR不交叉反应的试验结果 | 第41-42页 |
| ·质粒和线虫标准品的构建 | 第42-44页 |
| ·质粒标准品的构建 | 第42-43页 |
| ·线虫标准曲线的构建 | 第43-44页 |
| ·土壤中孢囊线虫real-time PCR标准曲线构建方法的探索 | 第44-50页 |
| ·土壤总DNA提取方法比较 | 第44-47页 |
| ·采用预处理结合试剂盒法提取土壤中孢囊线虫基因组DNA的结果 | 第47-48页 |
| ·土壤中孢囊线虫real-time PCR标准曲线构建方法的探索 | 第48-50页 |
| ·河南省小麦孢囊线虫主要发生地的CCN种类的分子检测 | 第50-53页 |
| ·样品采集 | 第50页 |
| ·real-time PCR检测结果 | 第50-51页 |
| ·混合群体种群比例检测 | 第51-53页 |
| 5 结论与讨论 | 第53-57页 |
| ·TaqMan-MGB选择与设计 | 第53页 |
| ·实时荧光定量PCR体系的建立及优化 | 第53-54页 |
| ·标准品的构建 | 第54-55页 |
| ·从土壤中直接提取孢囊线虫DNA方法的探索 | 第55页 |
| ·河南省小麦孢囊线虫主要发生地的CCN种类的分子检测 | 第55页 |
| ·下一步工作设想 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| ABSTRACT | 第64-65页 |
