莱克多巴胺残留ELISA检测试剂盒的研制
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一部分 绪论 | 第9-25页 |
| 1. 兽药残留的现状与危害 | 第9-11页 |
| ·兽药残留现状 | 第9-10页 |
| ·兽药残留的危害 | 第10-11页 |
| 2. 莱克多巴胺的性质及残留现状 | 第11-14页 |
| ·莱克多巴胺结构与性质 | 第11-12页 |
| ·莱克多巴胺的作用机理 | 第12-13页 |
| ·莱克多巴胺的危害 | 第13-14页 |
| 3. 莱克多巴胺残留的主要检测方法 | 第14-18页 |
| ·色谱分析技术 | 第14-15页 |
| ·免疫分析技术 | 第15-18页 |
| 4. 免疫检测试剂盒的技术要点 | 第18-23页 |
| ·小分子抗原的合成与鉴定 | 第18-20页 |
| ·莱克多巴胺样品预处理方法 | 第20-22页 |
| ·免疫检测试剂盒的质量控制 | 第22-23页 |
| 5. 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 6. 实验路线 | 第24-25页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第25-41页 |
| 1 试剂材料与仪器 | 第25-29页 |
| ·主要试剂与材料 | 第25-26页 |
| ·主要仪器设备 | 第26-27页 |
| ·主要溶液的配制方法 | 第27-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-41页 |
| ·莱克多巴胺完全抗原RAC-BSA 的合成与鉴定 | 第29-31页 |
| ·莱克多巴胺完全抗原 RAC-BSA 的合成 | 第29-30页 |
| ·莱克多巴胺完全抗原 RAC-BSA 的鉴定 | 第30-31页 |
| ·抗莱克多巴胺单克隆抗体的制备与鉴定 | 第31-35页 |
| ·抗 RAC 单克隆抗体的制备 | 第31-33页 |
| ·抗 RAC 单克隆抗体的鉴定 | 第33-35页 |
| ·间接竞争 ELISA 条件优化和方法的建立 | 第35-38页 |
| ·酶标板的选择 | 第35页 |
| ·包被缓冲液的选择 | 第35页 |
| ·包被温度和时间的选择 | 第35-36页 |
| ·封闭液的选择 | 第36页 |
| ·封闭时间的选择 | 第36页 |
| ·反应缓冲液的选择 | 第36页 |
| ·体系反应的时间选择 | 第36-37页 |
| ·棋盘滴定摸索抗原抗体的最佳反应浓度 | 第37页 |
| ·方法的检测灵敏度及检测限 | 第37-38页 |
| ·方法的准确性实验 | 第38页 |
| ·间接竞争 ELISA 检测方法的应用 | 第38-41页 |
| ·不同有机溶剂对 ELISA 反应的影响 | 第38页 |
| ·样品前处理方法的选择 | 第38-40页 |
| ·样品检出限试验 | 第40页 |
| ·样品添加回收率试验 | 第40页 |
| ·批内差和批间差测试 | 第40页 |
| ·ELISA 方法的稳定性实验 | 第40页 |
| ·ELISA 方法与仪器法的比对试验 | 第40-41页 |
| 第三部分 结果与讨论 | 第41-62页 |
| 1 完全抗原 RAC-BSA 的鉴定 | 第41-43页 |
| ·抗原中蛋白浓度的确定 | 第41页 |
| ·抗原 SDS-PAGE 鉴定 | 第41-42页 |
| ·抗原紫外光谱扫描分析 | 第42-43页 |
| 2. 抗 RAC 单克隆抗体的制备与鉴定 | 第43-45页 |
| ·克隆化细胞培养上清的检测 | 第43页 |
| ·腹水中抗体效价的测定 | 第43-44页 |
| ·抗体亚类的鉴定 | 第44页 |
| ·抗体的特异性鉴定 | 第44-45页 |
| 3. 间接竞争 ELISA 方法的优化和建立 | 第45-54页 |
| ·酶标板的选择 | 第45-46页 |
| ·包被缓冲液的选择 | 第46-47页 |
| ·包被温度和时间的选择 | 第47-48页 |
| ·封闭液的选择 | 第48-49页 |
| ·封闭时间的选择 | 第49页 |
| ·反应缓冲液的选择 | 第49-50页 |
| ·体系反应的时间选择 | 第50-51页 |
| ·棋盘滴定摸索抗原抗体的最佳反应浓度 | 第51-52页 |
| ·方法的检测灵敏度及检测限 | 第52-53页 |
| ·方法的准确性实验 | 第53-54页 |
| 4. 间接竞争 ELISA 检测方法的应用 | 第54-58页 |
| ·不同有机溶剂对 ELISA 反应的影响 | 第54页 |
| ·样品前处理方法的选择 | 第54-55页 |
| ·样品检出限试验 | 第55-56页 |
| ·样品添加回收率试验 | 第56-57页 |
| ·批内差和批间差测试 | 第57页 |
| ·ELISA 方法的稳定性试验 | 第57-58页 |
| ·ELISA 方法与仪器法的比对试验 | 第58页 |
| 5. 讨论 | 第58-62页 |
| ·小分子抗原合成 | 第58-59页 |
| ·细胞克隆化技术 | 第59-60页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第60页 |
| ·ELISA 检测方法的条件选择 | 第60-61页 |
| ·ELISA 试剂盒的评判标准 | 第61-62页 |
| 第四部分 结论与展望 | 第62-64页 |
| 结论 | 第62页 |
| 展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 在读期间发表论文和学术交流情况 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |