| 中文摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 符号说明 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-28页 |
| ·幽门螺杆菌的特点 | 第15-16页 |
| ·幽门螺杆菌的致病机理 | 第16-17页 |
| ·H.pylori感染与上消化道疾病的关系 | 第17-19页 |
| ·H.pylori感染与慢性胃炎 | 第17页 |
| ·H.pylori感染与消化性溃疡 | 第17-18页 |
| ·H.pylori感染与非溃疡性消化不良 | 第18页 |
| ·H.pylori感染与胃部恶性肿瘤 | 第18-19页 |
| ·H.pylori感染与非消化道疾病的关系 | 第19页 |
| ·关于H.pylori感染的免疫疗法 | 第19-22页 |
| ·H.pylori疫苗的发展前景及研究意义 | 第19-20页 |
| ·抗原的选择 | 第20-22页 |
| ·H.pylori疫苗的免疫途径 | 第22页 |
| ·H.pylori疫苗的免疫佐剂 | 第22页 |
| ·H.pylori疫苗研究的动物模型 | 第22-24页 |
| ·老鼠模型 | 第23页 |
| ·限菌猪模型 | 第23页 |
| ·罗猴模型 | 第23页 |
| ·雪豹模型 | 第23-24页 |
| ·植物生物反应器 | 第24页 |
| ·烟草 | 第24页 |
| ·胡萝卜 | 第24页 |
| ·抗原基因在酵母中的表达 | 第24-26页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
| 第二章 幽门螺杆菌HspA基因的克隆及其在烟草中的遗传转化与表达 | 第28-51页 |
| ·植物材料和菌株、质粒及生化试剂 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-42页 |
| ·幽门螺杆菌的培养 | 第28-29页 |
| ·幽门螺杆菌基因组DNA的提取 | 第29页 |
| ·幽门螺杆菌HspA序列的克隆 | 第29-30页 |
| ·克隆载体的构建 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第31页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA及酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·HspA序列的测定 | 第32页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第32-35页 |
| ·农杆菌侵染烟草叶片及其培养和植株再生 | 第35-36页 |
| ·转基因烟草植株的PCR检测 | 第36-37页 |
| ·转基因烟草植株的Northern杂交检测 | 第37-39页 |
| ·Western杂交检测 | 第39-41页 |
| ·转基因烟草中HspA蛋白的免疫原性鉴定 | 第41-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-49页 |
| ·幽门螺杆菌抗原基因HspA的克隆 | 第42页 |
| ·克隆载体pGEM-HspA的双酶切鉴定与序列分析 | 第42-44页 |
| ·植物表达载体pBI121-HspA的构建 | 第44-45页 |
| ·转基因烟草植株的获得 | 第45-46页 |
| ·转基因烟草植株的PCR检测 | 第46-47页 |
| ·转基因烟草植株的Northern的检测 | 第47页 |
| ·转基因烟草植株的Western检测 | 第47-48页 |
| ·转基因烟草表达的HspA蛋白的免疫原性鉴定 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第三章 幽门螺杆菌HspA-UreB融合基因植物表达载体的构建及其在胡萝卜中的表达 | 第51-87页 |
| ·植物材料、载体、菌株及生化试剂 | 第51页 |
| ·实验方法 | 第51-69页 |
| ·幽门螺杆菌基因组DNA的提取 | 第51页 |
| ·HspA、UreB基因的克隆 | 第51-53页 |
| ·克隆载体的构建 | 第53-55页 |
| ·测序 | 第55页 |
| ·HspA、UreB基因的融合 | 第55-57页 |
| ·重组表达载体pBI121-HspA-UreB的构建 | 第57-62页 |
| ·胡萝卜外植体的遗传转化 | 第62-68页 |
| ·转基因胡萝卜表达的HspA-UreB蛋白的免疫原性鉴定 | 第68-69页 |
| ·结果与分析 | 第69-82页 |
| ·幽门螺杆菌HspA、UreB基因的克隆 | 第69-70页 |
| ·克隆载体pGEM-HspA、pGEM-UreB的双酶切鉴定与序列分析 | 第70-72页 |
| ·HspA基因与UreB基因的融合 | 第72-74页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第74-75页 |
| ·转基因胡萝卜的获得 | 第75-78页 |
| ·转基因胡萝卜植株的PCR检测 | 第78-79页 |
| ·转基因胡萝卜植株的Northern检测 | 第79页 |
| ·转基因胡萝卜植株的Western检测 | 第79页 |
| ·转基因胡萝卜中表达的HspA-UreB融合蛋白含量的测定 | 第79-81页 |
| ·转基因胡萝卜表达的HspA-UreB蛋白的免疫原性鉴定 | 第81-82页 |
| ·讨论 | 第82-87页 |
| 第四章 HspA-UreB融合基因在酵母中的表达及其抗体的制备 | 第87-96页 |
| ·实验菌株、质粒与主要试剂 | 第87页 |
| ·实验方法 | 第87-91页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第87-88页 |
| ·酵母感受态的制备与转化方法 | 第88-89页 |
| ·HspA-UreB融合基因在酵母中的高效表达 | 第89页 |
| ·凝胶电泳分离蛋白质 | 第89-90页 |
| ·用酵母表达的HspA-UreB融合蛋白免疫家兔制备抗体 | 第90页 |
| ·酵母表达的HspA-UreB融合蛋白的定量 | 第90-91页 |
| ·结果与分析 | 第91-93页 |
| ·HspA-UreB融合基因酵母表达载体的构建 | 第91页 |
| ·HspA-UreB融合基因在酵母中的表达 | 第91-92页 |
| ·抗体制备 | 第92-93页 |
| ·酵母表达的HspA-UreB融合蛋白的定量 | 第93页 |
| 图4.4.标准曲线 | 第93页 |
| ·讨论 | 第93-96页 |
| 第五章 结论 | 第96-98页 |
| 附录 | 第98-100页 |
| 参考文献 | 第100-109页 |
| 致谢 | 第109-110页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第110-111页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第111页 |
