| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-16页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)研究进展 | 第10-13页 |
| ·传染性胃肠炎的历史背景 | 第10页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒的形态特征培养特性及理化特性 | 第10-11页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒的基因组结构及编码蛋白 | 第11页 |
| ·TGEV的S基因及其编码S蛋白的研究概况 | 第11页 |
| ·TGEV的诊断方法 | 第11-13页 |
| ·噬菌体展示技术研究进展 | 第13-15页 |
| ·噬菌体展示技术的基本原理 | 第13-14页 |
| ·噬菌体展示技术的应用 | 第14-15页 |
| ·研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-32页 |
| ·实验材料 | 第16-18页 |
| ·菌种、载体、质粒、细胞株及毒株 | 第16页 |
| ·工具酶、试剂盒、抗体等 | 第16页 |
| ·实验所需各种缓冲液和培养基的配制 | 第16-17页 |
| ·主要药品及试剂 | 第17页 |
| ·仪器设备 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-32页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第18-20页 |
| ·重组质粒pET30a-S-AD的诱导表达 | 第20-21页 |
| ·重组蛋白的纯化及复性 | 第21-22页 |
| ·噬菌体随机十二肽库对靶分子的生物淘选 | 第22-23页 |
| ·结合克隆的特征鉴定 | 第23-25页 |
| ·TGEV噬菌体ELISA检测方法建立及检测效果评价 | 第25-28页 |
| ·所选多肽配体氨基酸序列的推导 | 第28-29页 |
| ·合成多肽的抗病毒活性鉴定 | 第29-32页 |
| 3 结果 | 第32-46页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第32-34页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组质粒的双酶切鉴定 | 第33-34页 |
| ·重组蛋白的表达及活性鉴定 | 第34-36页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第34-35页 |
| ·Western-Blot检测重组蛋白 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白的纯化及复性 | 第36-37页 |
| ·噬菌体十二肽库对重组S-AD蛋白的生物淘选 | 第37-40页 |
| ·淘选产物的滴度测定结果 | 第37-38页 |
| ·噬菌体结合克隆的ELISA初步鉴定结果 | 第38页 |
| ·噬菌体结合克隆模板DNA的纯化结果 | 第38-39页 |
| ·噬菌体结合克隆的测序及编码氨基酸序列推导 | 第39-40页 |
| ·噬菌体ELISA建立及检测效果评价 | 第40-43页 |
| ·噬菌体ELISA与普通多抗ELISA及RT-PCR的敏感性比较 | 第40-42页 |
| ·噬菌体ELISA的特异性实验 | 第42-43页 |
| ·多肽的抗病毒活性检测 | 第43-46页 |
| ·病毒滴度法检测多肽的抗病毒活性 | 第43-44页 |
| ·噬斑法检测多肽的抗病毒活性 | 第44-45页 |
| ·免疫荧光法检测多肽的抗病毒活性 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-50页 |
| ·靶蛋白的选择 | 第46-47页 |
| ·以S-AD蛋白为靶分子的噬菌体筛选 | 第47-48页 |
| ·结合克隆的选择 | 第48页 |
| ·TGEV噬菌体ELISA检测方法 | 第48-49页 |
| ·S-AD蛋白亲和肽的鉴定与功能分析 | 第49-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第56页 |