中文摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
前言 | 第9-11页 |
实验研究 | 第11-44页 |
第一部分 艾灸后“足三里”穴位局部氧化磷酸化信号通路及其分子靶点的挖掘 | 第11-38页 |
1 实验材料 | 第11-14页 |
·实验动物 | 第11页 |
·主要试剂盒 | 第11-12页 |
·主要仪器 | 第12-13页 |
·使用软件 | 第13-14页 |
2 实验方法 | 第14-20页 |
·动物分组与造模 | 第14页 |
·艾灸干预和样本取材 | 第14页 |
·RNA提取和质检 | 第14-16页 |
·RNA提取 | 第14-15页 |
·RNA质检 | 第15页 |
·RNA纯化 | 第15-16页 |
·RNA荧光标记 | 第16-18页 |
·合成1st-strand cDNA | 第16页 |
·合成2nd-strand cDNA | 第16页 |
·体外转录合成cRNA | 第16-17页 |
·反转录合成cDNA | 第17页 |
·荧光标记反应 | 第17-18页 |
·杂交前芯片预处理和芯片杂交 | 第18-19页 |
·杂交前处理 | 第18页 |
·芯片杂交 | 第18-19页 |
·芯片清洗 | 第19页 |
·芯片扫描 | 第19页 |
·芯片数据分析 | 第19-20页 |
·对差异基因进行信号通路筛选 | 第20页 |
3 结果和分析 | 第20-38页 |
·动物总体情况观察和足趾容积检测 | 第20-21页 |
·差异基因筛选 | 第21-33页 |
·温和灸组与模型组相比筛选出的差异基因 | 第21-25页 |
·隔附灸组与模型组相比筛选出的差异基因 | 第25-33页 |
·“足三里”穴位局部对温和灸和隔附灸刺激响应的的共表达差异基因筛选 | 第33-36页 |
·“足三里”穴位对温和灸和隔附灸刺激响应的共同上调基因 | 第33-34页 |
·“足三里”穴位对温和灸和隔附灸刺激响应的共同下调基因 | 第34-36页 |
·“足三里”穴位局部对温和灸和隔附灸刺激响应共表达差异基因信号通路筛选 | 第36-38页 |
第二部分 艾灸后“足三里”穴位局部氧化磷酸化信号通路相关基因的生物学重复实验 | 第38-44页 |
1 材料和方法 | 第38-41页 |
·实验动物 | 第38页 |
·主要试剂、仪器及耗材 | 第38页 |
·动物分组与造模方法 | 第38页 |
·艾灸干预与取材 | 第38页 |
·RNA提取 | 第38-39页 |
·RNA质检 | 第39页 |
·实时荧光定量聚合酶链式反应步骤 | 第39-40页 |
·基因的引物设计 | 第39页 |
·以RNA为模板合成cDNA | 第39页 |
·退火温度 | 第39-40页 |
·各基因的qPCR反应程序 | 第40页 |
·统计分析 | 第40-41页 |
2 结果 | 第41-44页 |
·动物总体情况观察和足趾容积检测 | 第41页 |
·qPCR实验结果 | 第41-42页 |
·qPCR与芯片结果对比 | 第42-44页 |
讨论 | 第44-53页 |
1 基因芯片技术选择与运用 | 第44-45页 |
2 选穴依据 | 第45-46页 |
3 氧化磷酸化可能是艾灸作用的重要参与信号通路 | 第46-49页 |
4. COX7A2、ATP6VOD2、ATP5J可能是艾灸后穴位局部氧化磷酸化通路的潜在分子靶点 | 第49-53页 |
结论 | 第53-54页 |
问题与展望 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
附件一 | 第62-69页 |
附件二:综述 | 第69-76页 |
参考文献 | 第73-76页 |
附件三:在读期间公开发表的学术论文 | 第76-77页 |