| 摘要(I) | 第1-6页 |
| Abstract (I) | 第6-7页 |
| 摘要(II) | 第7-8页 |
| Abstract (II) | 第8-13页 |
| 第一部分 P2X受体ATP结合位点结构和功能的研究 | 第13-77页 |
| 第一章 P2X受体研究背景 | 第13-35页 |
| ·离子通道概述 | 第13-15页 |
| ·分子模拟(Molecular Modeling)是研究离子通道的必要工具 | 第13-14页 |
| ·离子通道分类 | 第14-15页 |
| ·ATP信号通路的发现及生理作用 | 第15-18页 |
| ·ATP信号通路的发现 | 第15-16页 |
| ·ATP信号通路参与的主要生理活动 | 第16-17页 |
| ·ATP在感官形成中的作用 | 第16页 |
| ·ATP信号在疼痛传递中的作用 | 第16-17页 |
| ·ATP信号参与的其它生理过程 | 第17页 |
| ·疾病治疗 | 第17-18页 |
| ·P2X受体概述 | 第18-29页 |
| ·P2X受体结构 | 第20-22页 |
| ·离子通透 | 第22-24页 |
| ·ATP结合区域(Nucleotide Binding Domains,NBDs) | 第24-29页 |
| ·P2X4受体功能概述 | 第29-31页 |
| ·P2X4受体生理作用 | 第29-30页 |
| ·激动剂 | 第30页 |
| ·调节剂 | 第30页 |
| ·拮抗剂 | 第30页 |
| ·失敏 | 第30-31页 |
| ·运输 | 第31页 |
| ·膜片钳技术 | 第31-33页 |
| ·膜片钳技术概述 | 第31-32页 |
| ·膜片钳技术的应用主要集中于对离子通道的研究 | 第32-33页 |
| ·与钙离子成像技术或分子克隆相结合进行结构功能研究 | 第32页 |
| ·与PCR技术的结合从单个细胞上进行功能研究 | 第32页 |
| ·近年来发展起来的全自动膜片钳系统对药物筛选起着重要作用 | 第32-33页 |
| ·课题研究目的和意义 | 第33-35页 |
| 第二章 实验材料、仪器与方法 | 第35-49页 |
| ·实验材料与仪器 | 第35-38页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·细胞 | 第35页 |
| ·质粒 | 第35页 |
| ·菌株 | 第35页 |
| ·实验仪器 | 第35-36页 |
| ·实验试剂 | 第36-38页 |
| ·实验方法 | 第38-48页 |
| ·细胞培养 | 第38-39页 |
| ·细胞复苏 | 第38页 |
| ·细胞培养 | 第38-39页 |
| ·支原体的检测 | 第39页 |
| ·细胞传代 | 第39页 |
| ·细胞冻存 | 第39页 |
| ·分子模拟 | 第39-40页 |
| ·突变体构建 | 第40-44页 |
| ·引物设计 | 第40-41页 |
| ·定点突变 | 第41-42页 |
| ·质粒转化 | 第42-44页 |
| ·细胞转染 | 第44页 |
| ·膜片钳实验 | 第44-48页 |
| ·实验前准备 | 第44-46页 |
| ·膜片钳实验 | 第46-47页 |
| ·参数记录 | 第47-48页 |
| ·数据分析 | 第48-49页 |
| 第三章 实验结果 | 第49-67页 |
| ·分子模拟 | 第49-50页 |
| ·214位亮氨酸参与ATP的结合 | 第50-61页 |
| ·大鼠P2X4受体电流的记录 | 第50-52页 |
| ·背鳍部单突变改变了受体对ATP的敏感性 | 第52-53页 |
| ·第214位亮氨酸突变体对受体功能的影响 | 第53-56页 |
| ·MTS化合物对214位半胱氨酸突变体的作用 | 第56-60页 |
| ·L214与TNP-ATP的相互作用 | 第60-61页 |
| ·214位亮氨酸突变影响受体的失敏过程 | 第61-67页 |
| ·L214突变体改变了受体失敏过程 | 第61-63页 |
| ·共表达L214I和L214M突变体电流特征记录 | 第63-64页 |
| ·大鼠P2X1受体和P2X3受体对应突变失敏研究 | 第64-67页 |
| 第四章 实验讨论 | 第67-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 第二部分 IPS多能性鉴定及分化为神经元后电生理功能鉴定 | 第77-115页 |
| 第五章 研究背景 | 第77-91页 |
| ·动物细胞多能性的探索 | 第77-80页 |
| ·多能干细胞特征 | 第80-81页 |
| ·干细胞分化为神经元 | 第81-86页 |
| ·病人特异的iPSCs模拟帕金森症(PD) | 第83-84页 |
| ·病人特异的iPSCs模拟阿尔兹海默症(AD) | 第84-86页 |
| ·神经元功能鉴定 | 第86-91页 |
| ·动作电位 | 第87-88页 |
| ·突触后电流 | 第88-91页 |
| 第六章 实验材料、仪器与方法 | 第91-101页 |
| ·实验材料与仪器 | 第91-93页 |
| ·实验材料 | 第91页 |
| ·细胞 | 第91页 |
| ·小鼠 | 第91页 |
| ·实验仪器 | 第91页 |
| ·实验试剂 | 第91-93页 |
| ·实验方法 | 第93-101页 |
| ·干细胞多能性鉴定 | 第93-97页 |
| ·碱性磷酸酶染色(AP染色) | 第93页 |
| ·多能性标记蛋白免疫荧光染色 | 第93-94页 |
| ·内源多能性基因表达鉴定 | 第94-96页 |
| ·外源多能性基因表达鉴定 | 第96页 |
| ·畸胎瘤形成分析 | 第96-97页 |
| ·核型分析 | 第97页 |
| ·膜片钳实验鉴定神经元功能 | 第97-101页 |
| ·配置实验过程中内外液 | 第97-98页 |
| ·膜片钳实验 | 第98-101页 |
| 第七章 实验结果 | 第101-107页 |
| ·人源IPS细胞(HIPSCs)多能性鉴定 | 第101-104页 |
| ·碱性磷酸酶(AP)染色 | 第101页 |
| ·核型分析 | 第101-102页 |
| ·人胚胎干细胞表面特异抗原表达 | 第102-103页 |
| ·内源多能性转录因子表达激活 | 第103页 |
| ·外源多能性转录因子表达沉默 | 第103-104页 |
| ·病人iPS细胞形成畸胎瘤 | 第104页 |
| ·神经元电生理记录 | 第104-107页 |
| 第八章 实验讨论 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-115页 |
| 缩略词表 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117-119页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第119页 |