| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-21页 |
| 1 植物线虫和植物寄生线虫防治 | 第11-17页 |
| ·植物寄生线虫概述 | 第11页 |
| ·植物寄生线虫的发现及其病害 | 第11-12页 |
| ·植物寄生线虫病的防治 | 第12-13页 |
| ·物理、农业防治 | 第12页 |
| ·选用抗性品种 | 第12-13页 |
| ·化学防治 | 第13页 |
| ·植物寄生线虫病的生物防治 | 第13-17页 |
| ·杀线虫真菌 | 第13-14页 |
| ·杀线虫真菌的分类 | 第13-14页 |
| ·生防细菌 | 第14-16页 |
| ·杀线虫细菌种类 | 第14-15页 |
| ·寄生细菌—巴氏杆菌(Pasteruria spp.) | 第15页 |
| ·根际细菌 | 第15-16页 |
| ·其他杀线虫细菌 | 第16页 |
| ·杀线虫放线菌 | 第16-17页 |
| 2 苏云金芽胞杆菌及杀线虫晶体蛋白 | 第17-20页 |
| ·杀线虫Bt菌株的发现 | 第17页 |
| ·杀线虫Bt的活性成分及其作用机理 | 第17-19页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的活性成分 | 第17-19页 |
| ·伴胞晶体蛋白(ICPs) | 第18-19页 |
| ·β-外毒素 | 第19页 |
| ·Bt对植物寄生线虫的作用机理 | 第19-20页 |
| ·Bt杀线虫基因及基因工程 | 第20页 |
| 3 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 第二章 产芽胞杆状细菌的纯化和鉴定 | 第21-28页 |
| 1 实验材料与方法 | 第21-23页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·菌株 | 第21页 |
| ·待鉴定菌株的预培养 | 第21页 |
| ·培养基及试剂 | 第21-22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·实验方法 | 第22-23页 |
| ·YC-10的纯化 | 第22页 |
| ·YC-10的分子鉴定 | 第22-23页 |
| ·YC-10的总DNA的提取 | 第22页 |
| ·YC-10的16S rRNA鉴定 | 第22-23页 |
| ·YC-10生长曲线的测定 | 第23页 |
| ·YC-10的生理化学鉴定 | 第23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-26页 |
| ·YC-10的形态学鉴定 | 第23-24页 |
| ·YC-10的菌体特征 | 第23-24页 |
| ·YC-10的16S rRNA的同源性比对 | 第24页 |
| ·YC-10生长过程的对比鉴定 | 第24-25页 |
| ·YC-10的生理化学鉴定 | 第25-26页 |
| 3 小结与讨论 | 第26-28页 |
| 第三章 YC-10摇瓶发酵条件和培养基筛选 | 第28-40页 |
| 1 实验材料与方法 | 第28-31页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·主要培养基和试剂 | 第28页 |
| ·实验菌株 | 第28页 |
| ·主要仪器设备 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·摇瓶发酵条件筛选 | 第29-30页 |
| ·YC-10初始摇瓶发酵体积的筛选 | 第29页 |
| ·YC-10生长曲线和pH值曲线的测定 | 第29页 |
| ·正交试验设计筛选YC-10的发酵条件 | 第29-30页 |
| ·YC-10培养基成分的筛选 | 第30页 |
| ·实验数据的统计 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·YC-10培养条件的筛选 | 第31-33页 |
| ·YC-10初始摇瓶发酵体积的确定 | 第31页 |
| ·YC-10生长曲线的测定 | 第31-32页 |
| ·YC-10培养条件的正交试验设计筛选结果 | 第32-33页 |
| ·YC-10的培养基成分筛选 | 第33-37页 |
| ·显著影响YC-10产胞量的培养基组分的PB实验筛选 | 第33-34页 |
| ·最陡爬坡实验 | 第34-35页 |
| ·响应面实验筛选YC-10培养基成分的最优搭配 | 第35-37页 |
| ·对最优培养基组分的验证 | 第37-38页 |
| 3 小结与讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 ICPS杀线虫作用和蛋白特性研究 | 第40-46页 |
| 1 实验材料与方法 | 第40-43页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·实验材料 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·主要仪器设备 | 第40页 |
| ·实验方法 | 第40-43页 |
| ·伴胞晶体蛋白的制备 | 第40页 |
| ·ICPs的浓度测定 | 第40-42页 |
| ·蛋白质标准曲线的制备 | 第41页 |
| ·ICPs样品的测量 | 第41-42页 |
| ·ICPs的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第42-43页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第42页 |
| ·ICPs的电泳及凝胶染色 | 第42-43页 |
| ·ICPs对南方根结线虫J2的室内生测 | 第43页 |
| ·南方根结线虫J2的获得 | 第43页 |
| ·ICPs对南方根结线虫的毒性试验 | 第43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-45页 |
| ·蛋白质检测结果 | 第43-44页 |
| ·南方根结线虫形态、行为的观察结果 | 第44-45页 |
| 3 小结与讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 ICPS合成基因的克隆与原核表达 | 第46-54页 |
| 1 实验材料与方法 | 第46-51页 |
| ·实验材料 | 第46页 |
| ·质粒与菌种 | 第46页 |
| ·试剂 | 第46页 |
| ·仪器 | 第46页 |
| ·试剂及培养基的配制 | 第46页 |
| ·实验方法 | 第46-51页 |
| ·cry基因片段的获得 | 第46-47页 |
| ·YC-10总DNA的提取 | 第46-47页 |
| ·YC-10的cry4基因的PCR扩增 | 第47页 |
| ·cry基因片段的全长基因克隆 | 第47-50页 |
| ·TAIL-PCR引物设计 | 第47-48页 |
| ·TAIL-PCR第一次PCR | 第48页 |
| ·TAIL-PCR第二次PCR | 第48-49页 |
| ·TAIL-PCR第三次PCR | 第49-50页 |
| ·TAIL-PCR产物的鉴定 | 第50页 |
| ·cry基因完整开放阅读框的获得 | 第50页 |
| ·cry基因的ORF与pQE30的重组及其表达 | 第50-51页 |
| ·ICPs的合成基因与pQE30质粒的重组 | 第50-51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-52页 |
| ·ICPs合成基因完整序列的扩增结果 | 第51页 |
| ·cry-pQE30重组质粒的检测 | 第51-52页 |
| 3 小结与讨论 | 第52-54页 |
| ·cry基因全长序列的PCR扩增 | 第52-53页 |
| ·cry基因的原核表达 | 第53-54页 |
| 论文总结与创新点 | 第54-56页 |
| 1 论文总结 | 第54-55页 |
| ·苏云金芽胞杆菌的鉴定研究 | 第54页 |
| ·发酵条件的筛选 | 第54-55页 |
| ·ICPs的毒性及合成基因克隆 | 第55页 |
| 2 创新点 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 附录A 论文所用重要缩写词及中文全称 | 第63-65页 |
| 附录B 常用缓冲液及培养基配方 | 第65-67页 |
| 附录C 常用生化试剂及仪器 | 第67-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 发表论文附录 | 第70页 |
