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膜蛋白质组学研究中样品制备与净化方法的发展与应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
缩写表第10-15页
第一章 膜蛋白质组学研究进展第15-27页
   ·细胞质膜的结构与功能概述第16-18页
   ·膜蛋白质的分离纯化、酶解与鉴定第18-22页
     ·膜的富集第18-20页
     ·膜蛋白质的抽提第20页
     ·膜蛋白质的分离与鉴定第20-22页
   ·膜蛋白质组学研究中样品制备与净化方法的研究进展第22-25页
     ·样品制备与净化的意义第22-23页
     ·样品制备与净化方法的研究进展第23-25页
   ·本研究的目的和意义第25-27页
第二章 膜蛋白质组学分析中基于凝胶电泳的样品制备和净化方法的发展与应用第27-48页
   ·前言第27-29页
   ·实验材料与试剂第29页
   ·实验方法第29-36页
     ·大鼠肝脏细胞膜样品的制备第29-30页
     ·膜蛋白的抽提与溶解第30页
     ·膜蛋白样品的三种不同处理方法第30-33页
     ·分光光度法测定电泳驱动的SDS去除效率第33-34页
     ·胶内酶解与CapLC-MS/MS分析第34-35页
     ·数据分析第35-36页
   ·实验结果第36-45页
     ·特殊梯度凝胶电泳系统的建立与优化第36-37页
     ·GGE系统分级分离效果的评估第37-38页
     ·电泳驱动的SDS去除效果的定量评估第38-40页
     ·三种方法鉴定到的总蛋白质的比较第40-42页
     ·三种方法鉴定到的膜蛋白质理化性质的比较第42-45页
   ·讨论第45-47页
   ·小结第47-48页
第三章 膜蛋白质组学分析中基于丙酮沉淀的样品制备和净化方法的发展与应用第48-71页
   ·前言第48-51页
   ·实验材料第51-52页
   ·实验方法第52-58页
     ·大鼠肝脏质膜的制备与富集第52-53页
     ·直接溶液酶解第53页
     ·预冷丙酮沉淀(CAP)实验条件的优化第53-54页
     ·丙酮沉淀法去除SDS效果的定量评估第54-55页
     ·优化CAP法沉淀蛋白的溶液酶解第55-56页
     ·CapLC-MS/MS分析第56-57页
     ·数据分析和生物信息学分析第57-58页
   ·实验结果第58-67页
     ·预冷丙酮的添加比例对SDS去除效果和蛋白质回收率的影响第58-60页
     ·SDS-PAGE比较分析不同方法的蛋白质酶解效果第60-62页
     ·基于四种不同酶解方法鉴定的蛋白质第62-67页
   ·讨论第67-70页
   ·小结第70-71页
参考文献第71-86页
附录第86-87页
附表第87-109页
致谢第109-110页

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