| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-22页 |
| ·前言 | 第14页 |
| ·中国酿造用酒曲的起源与发展 | 第14-16页 |
| ·酒曲的起源 | 第14-15页 |
| ·酒曲的分类体系和应用 | 第15-16页 |
| ·酯化酶相关研究进展 | 第16-21页 |
| ·酯化酶在白酒发酵中的作用 | 第16-17页 |
| ·酯化酶与产酯化酶微生物 | 第17页 |
| ·酯化酶的作用机理及分类 | 第17-18页 |
| ·酯化酶酶学性质研究 | 第18页 |
| ·酯化酶酶活测定方法 | 第18-19页 |
| ·中和滴定法 | 第19页 |
| ·等电位滴定法 | 第19页 |
| ·比色法 | 第19页 |
| ·色谱法 | 第19页 |
| ·酯化酶应用现状 | 第19-21页 |
| ·在乳品工业中的应用 | 第20页 |
| ·在白酒发酵中的应用 | 第20页 |
| ·在环境保护方面的应用 | 第20-21页 |
| ·研究意义 | 第21-22页 |
| 第二章 酒曲中产酯化酶细菌的分离及生理生化鉴定 | 第22-38页 |
| ·实验材料与仪器 | 第22-24页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·主要实验仪器及药品 | 第22-24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·实验方法 | 第24-28页 |
| ·产酯化酶菌种的筛选 | 第24-25页 |
| ·中、高温大曲的预处理 | 第24页 |
| ·产酯化酶菌种的初筛 | 第24-25页 |
| ·产酯化酶菌种的复筛 | 第25页 |
| ·酶活测定 | 第25-26页 |
| ·酶活力的比色测定法 | 第25页 |
| ·酶活力的滴定测定法 | 第25-26页 |
| ·发酵液的气相色谱分析 | 第26页 |
| ·复筛菌株的形态生理生化及16S rDNA鉴定 | 第26-28页 |
| ·革兰氏染色 | 第26页 |
| ·芽孢染色 | 第26页 |
| ·淀粉水解实验 | 第26-27页 |
| ·蛋白水解实验 | 第27页 |
| ·吲哚实验 | 第27页 |
| ·接触酶实验 | 第27页 |
| ·卵黄水解实验 | 第27页 |
| ·复筛菌株的16S rDNA鉴定 | 第27-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-36页 |
| ·对硝基苯酚吸光度扫描及标准曲线 | 第28-29页 |
| ·酯化酶产生菌的初筛结果 | 第29-31页 |
| ·初筛各菌株菌落形态照片 | 第29-30页 |
| ·初筛各菌株透明圈直径(D)与菌落直径(d)比值 | 第30-31页 |
| ·酯酶产生菌的复筛结果 | 第31-33页 |
| ·对上述15株菌进行酶活测定结果 | 第31-32页 |
| ·代谢产物检测 | 第32-33页 |
| ·10~#菌株的形态生理生化实验及16S rDNA鉴定 | 第33-36页 |
| ·10~#菌株的形态生理生化实验结果 | 第33-34页 |
| ·10~#菌株16S rDNA鉴定 | 第34-36页 |
| ·10~#菌株系统发育树 | 第36页 |
| ·小结 | 第36-38页 |
| 第三章 高产酯化酶菌株的诱变选育 | 第38-45页 |
| ·实验材料与仪器 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·主要实验仪器及药品 | 第38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-40页 |
| ·菌株的的等离子诱变 | 第38-39页 |
| ·菌体生长曲线 | 第38-39页 |
| ·诱变菌悬液的制备 | 第39页 |
| ·等离子诱变方法 | 第39页 |
| ·致死率计算及诱变筛子的建立 | 第39页 |
| ·酶活及总酯测定测定 | 第39-40页 |
| ·酯化酶酶活测定 | 第39页 |
| ·发酵液总酯测定(皂化中和滴定法) | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-44页 |
| ·菌体生长曲线的绘制 | 第40页 |
| ·诱变筛子的建立 | 第40-41页 |
| ·等离子诱变致死率及正突变率 | 第41-42页 |
| ·重复等离子诱变后各菌株酶活及总酯 | 第42-43页 |
| ·诱变前后菌株菌落形态对比 | 第43-44页 |
| ·小结 | 第44-45页 |
| 第四章 产酯化酶菌株的基因组改组 | 第45-53页 |
| ·实验材料与仪器 | 第45-46页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·实验仪器及药品 | 第45页 |
| ·培养基与试剂 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| ·原生质体的制备 | 第46页 |
| ·原生质体致死时间 | 第46页 |
| ·基因组改组 | 第46-47页 |
| ·融合子产酶稳定性实验 | 第47页 |
| ·酶活测定 | 第47页 |
| ·发酵液的气相色谱分析 | 第47页 |
| ·结果与分析 | 第47-52页 |
| ·原生质体最佳制备条件 | 第47-48页 |
| ·原生质体致死时间 | 第48-49页 |
| ·原生质体融合 | 第49-50页 |
| ·菌株发酵液色谱分析 | 第50-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第五章 融合子产酶条件优化 | 第53-66页 |
| ·实验材料与仪器 | 第53页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·仪器和药品 | 第53页 |
| ·培养基 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-55页 |
| ·酶活测定方法 | 第53页 |
| ·不同C源对菌体酶活的影响 | 第53-54页 |
| ·不同氮源对菌体酶活的影响 | 第54页 |
| ·发酵液初始pH值对菌体酶活的影响 | 第54页 |
| ·发酵温度对菌体酶活的影响 | 第54页 |
| ·摇床转速对菌体酶活的影响 | 第54页 |
| ·接种量对菌体酶活的影响 | 第54-55页 |
| ·培养时间对菌体酶活的影响 | 第55页 |
| ·结果分析 | 第55-65页 |
| ·碳源对菌体酶活的影响 | 第55-56页 |
| ·氮源对菌体酶活的影响 | 第56-57页 |
| ·发酵液初始pH值对菌体酶活的影响 | 第57-58页 |
| ·发酵温度对菌体酶活的影响 | 第58-59页 |
| ·摇床转速对菌体酶活的影响 | 第59-60页 |
| ·接种量对菌体酶活的影响 | 第60页 |
| ·培养时间对菌体酶活的影响 | 第60-61页 |
| ·响应面和水平的确定及其结 | 第61-62页 |
| ·响应面模型的建立与显著性检验 | 第62-63页 |
| ·响应面分析图和验证性试验 | 第63-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 第六章 融合子混合发酵及制曲研究 | 第66-75页 |
| ·实验材料与仪器 | 第66-67页 |
| ·实验材料 | 第66页 |
| ·主要实验仪器与药品 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66-67页 |
| ·实验方法 | 第67-68页 |
| ·菌株的混合发酵 | 第67页 |
| ·菌株制曲实验 | 第67-68页 |
| ·检测方法 | 第68页 |
| ·气相色谱法 | 第68页 |
| ·大曲酯化力测定方法 | 第68页 |
| ·结果分析 | 第68-73页 |
| ·接种量对复合发酵酯化酶催化活力的影响 | 第68-71页 |
| ·不同培养温度对复合发酵酯化酶催化活力的影响 | 第71-73页 |
| ·融合子6~#制曲性能考查 | 第73页 |
| ·小结 | 第73-75页 |
| 第七章 结论与下一步工作计划 | 第75-77页 |
| ·结论 | 第75-76页 |
| ·下一步工作计划 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-83页 |
| 本人在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |