中文摘要 | 第1-15页 |
Abstract | 第15-20页 |
1 前言 | 第20-42页 |
·二十碳二烯酸和二十碳三烯酸是超长链多不饱和脂肪酸 | 第20-21页 |
·超长链多不饱和脂肪酸在植物中的合成 | 第21页 |
·长链脂肪酸在植物中的作用 | 第21-23页 |
·贮存碳源和能量 | 第21-22页 |
·生物膜的重要组分 | 第22页 |
·参与植物信号转导 | 第22-23页 |
·VLCPUFAs 与生物胁迫 | 第23页 |
·非生物胁迫 | 第23-32页 |
·盐胁迫 | 第24-28页 |
·盐胁迫对植物的危害 | 第24-25页 |
·植物对盐胁迫的适应机制 | 第25-26页 |
·盐胁迫信号转导 | 第26-28页 |
·干旱胁迫 | 第28-32页 |
·干旱对植物的伤害 | 第29-30页 |
·植物对干旱胁迫的适应机制 | 第30-31页 |
·干旱胁迫的信号转导途径 | 第31-32页 |
·脱落酸(ABA) | 第32-38页 |
·ABA 的代谢过程 | 第32-34页 |
·ABA 的生物合成 | 第32-33页 |
·ABA 的分解代谢 | 第33-34页 |
·ABA 的信号转导 | 第34-35页 |
·ABA 的感受 | 第34页 |
·ABA 信号转导途径 | 第34-35页 |
·ABA 与植物生长发育 | 第35-38页 |
·ABA 与非生物胁迫的关系 | 第38页 |
·XB3-like 蛋白家族研究现状 | 第38-40页 |
·本实验的目的意义 | 第40-42页 |
·异源二十碳二烯酸和二十碳三烯酸对拟南芥生理影响 | 第40页 |
·植物 XB3-like 蛋白家族功能研究 | 第40-42页 |
2 材料与方法 | 第42-61页 |
·实验材料 | 第42-43页 |
·植物材料 | 第42页 |
·菌株与质粒 | 第42页 |
·酶与各种生化试剂 | 第42页 |
·主要实验仪器 | 第42-43页 |
·生物信息学工具 | 第43页 |
·生物信息分析软件 | 第43页 |
·生物信息分析网站 | 第43页 |
·本论文所用引物 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-61页 |
·植物基因组的提取与纯化(小量法) | 第43-44页 |
·植物 cNDA 的获得 | 第44-46页 |
·植物 RNA 的提取(TriZol 法) | 第44页 |
·RNA 浓度测定 | 第44-45页 |
·RNA 甲醛变性胶电泳检测 | 第45-46页 |
·RNA 的纯化 | 第46页 |
·cDNA 第一链的合成 | 第46页 |
·载体构建 | 第46-49页 |
·PCR 扩增 | 第46-47页 |
·酶切和胶回收 | 第47页 |
·去磷酸化反应 | 第47页 |
·连接反应 | 第47-48页 |
·表达载体的构建 | 第48-49页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第49-50页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第49页 |
·大肠杆菌细胞的转化 | 第49-50页 |
·大肠杆菌中质粒的提取 | 第50页 |
·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第50-51页 |
·农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备 | 第50-51页 |
·冻融法转化农杆菌感受态细胞 | 第51页 |
·拟南芥的转化及转基因植株的鉴定 | 第51-52页 |
·拟南芥的转化 | 第51页 |
·转基因拟南芥的鉴定 | 第51-52页 |
·荧光定量 PCR | 第52页 |
·转基因植物 GUS 组织化学染色分析 | 第52页 |
·植物总脂肪酸的提取及分析 | 第52-53页 |
·植物膜脂的提取及分析 | 第53页 |
·原核表达蛋白及纯化 | 第53-58页 |
·原核表达蛋白 | 第53-54页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第54-55页 |
·包涵体蛋白的提取 | 第55-56页 |
·蛋白亲和层析纯化 | 第56页 |
·蛋白复性及浓缩 | 第56-57页 |
·蛋白浓度测定(考马斯亮蓝法) | 第57-58页 |
·抗体的制备及效价检测 | 第58-59页 |
·抗体的制备 | 第58页 |
·效价检测(酶联免疫吸附法) | 第58-59页 |
·植物总蛋白的提取及检测 | 第59-61页 |
·植物总蛋白的提取 | 第59页 |
·Western Blot 检测蛋白表达 | 第59-61页 |
3 结果与分析 | 第61-95页 |
·异源二十二碳二烯酸和二十二碳三烯酸对拟南芥生理功能影响 | 第61-72页 |
·转基因拟南芥的鉴定 | 第61-62页 |
·异源长链多不饱和脂肪酸参与膜脂的组成 | 第62-63页 |
·转基因拟南芥与野生型拟南芥相比表型上有差异 | 第63-64页 |
·转基因拟南芥与野生型拟南芥相比对 ABA 更敏感 | 第64-67页 |
·转基因拟南芥耐旱能力增强 | 第67-68页 |
·转基因拟南芥通过依赖 ABA 和非依赖 ABA 两条途径增加耐旱性 | 第68-70页 |
·外源添加 EDA 和 ETrA 使野生型拟南芥对 ABA 敏感且耐旱 | 第70-72页 |
·植物 XB3-like 蛋白家族功能研究 | 第72-95页 |
·植物 XB3-like 蛋白的鉴定 | 第72-74页 |
·植物 XB3-like 基因同源性分析 | 第74-78页 |
·植物 XB3-like 蛋白的分类 | 第78-79页 |
·XB3-like 基因在拟南芥、水稻、玉米和大豆中的表达模式 | 第79-82页 |
·在拟南芥和玉米中分析 XB3-like 基因对多种激素和分生物胁迫的响应 | 第82-84页 |
·XBAT31 生物学功能的初探 | 第84-95页 |
·XBAT31 同源基因进化关系分析 | 第84-85页 |
·XBAT31 启动子分析 | 第85-86页 |
·XBAT31 组织定位和亚细胞定位 | 第86-87页 |
·XBAT31 受多种激素和模拟非生物胁迫的诱导 | 第87-88页 |
·突变体、超表达拟南芥及 XBAT31 抗体的获得 | 第88-90页 |
·XBAT31 突变体不耐盐胁迫 | 第90-93页 |
·XBAT31 泛素连接酶活性的鉴定 | 第93-95页 |
4 讨论 | 第95-100页 |
·异源二十碳二烯酸和二十碳三烯酸对拟南芥生理影响 | 第95-97页 |
·植物 XB3-like 蛋白家族功能研究 | 第97-100页 |
5 结论 | 第100-102页 |
·异源二十碳二烯酸和二十碳三烯酸对拟南芥生理影响 | 第100页 |
·植物 XB3-like 蛋白家族功能研究 | 第100-102页 |
参考文献 | 第102-112页 |
附录 | 第112-116页 |
致谢 | 第116-117页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第117页 |