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内源二十碳二烯酸和二十碳三烯酸对拟南芥生理影响及植物XB3-like蛋白家族功能研究

中文摘要第1-15页
Abstract第15-20页
1 前言第20-42页
   ·二十碳二烯酸和二十碳三烯酸是超长链多不饱和脂肪酸第20-21页
   ·超长链多不饱和脂肪酸在植物中的合成第21页
   ·长链脂肪酸在植物中的作用第21-23页
     ·贮存碳源和能量第21-22页
     ·生物膜的重要组分第22页
     ·参与植物信号转导第22-23页
   ·VLCPUFAs 与生物胁迫第23页
   ·非生物胁迫第23-32页
     ·盐胁迫第24-28页
       ·盐胁迫对植物的危害第24-25页
       ·植物对盐胁迫的适应机制第25-26页
       ·盐胁迫信号转导第26-28页
     ·干旱胁迫第28-32页
       ·干旱对植物的伤害第29-30页
       ·植物对干旱胁迫的适应机制第30-31页
       ·干旱胁迫的信号转导途径第31-32页
   ·脱落酸(ABA)第32-38页
     ·ABA 的代谢过程第32-34页
       ·ABA 的生物合成第32-33页
       ·ABA 的分解代谢第33-34页
     ·ABA 的信号转导第34-35页
       ·ABA 的感受第34页
       ·ABA 信号转导途径第34-35页
     ·ABA 与植物生长发育第35-38页
     ·ABA 与非生物胁迫的关系第38页
   ·XB3-like 蛋白家族研究现状第38-40页
   ·本实验的目的意义第40-42页
     ·异源二十碳二烯酸和二十碳三烯酸对拟南芥生理影响第40页
     ·植物 XB3-like 蛋白家族功能研究第40-42页
2 材料与方法第42-61页
   ·实验材料第42-43页
     ·植物材料第42页
     ·菌株与质粒第42页
     ·酶与各种生化试剂第42页
     ·主要实验仪器第42-43页
     ·生物信息学工具第43页
       ·生物信息分析软件第43页
       ·生物信息分析网站第43页
     ·本论文所用引物第43页
   ·实验方法第43-61页
     ·植物基因组的提取与纯化(小量法)第43-44页
     ·植物 cNDA 的获得第44-46页
       ·植物 RNA 的提取(TriZol 法)第44页
       ·RNA 浓度测定第44-45页
       ·RNA 甲醛变性胶电泳检测第45-46页
       ·RNA 的纯化第46页
       ·cDNA 第一链的合成第46页
     ·载体构建第46-49页
       ·PCR 扩增第46-47页
       ·酶切和胶回收第47页
       ·去磷酸化反应第47页
       ·连接反应第47-48页
       ·表达载体的构建第48-49页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第49-50页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第49页
       ·大肠杆菌细胞的转化第49-50页
     ·大肠杆菌中质粒的提取第50页
     ·农杆菌感受态细胞的制备和转化第50-51页
       ·农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备第50-51页
       ·冻融法转化农杆菌感受态细胞第51页
     ·拟南芥的转化及转基因植株的鉴定第51-52页
       ·拟南芥的转化第51页
       ·转基因拟南芥的鉴定第51-52页
     ·荧光定量 PCR第52页
     ·转基因植物 GUS 组织化学染色分析第52页
     ·植物总脂肪酸的提取及分析第52-53页
     ·植物膜脂的提取及分析第53页
     ·原核表达蛋白及纯化第53-58页
       ·原核表达蛋白第53-54页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第54-55页
       ·包涵体蛋白的提取第55-56页
       ·蛋白亲和层析纯化第56页
       ·蛋白复性及浓缩第56-57页
       ·蛋白浓度测定(考马斯亮蓝法)第57-58页
     ·抗体的制备及效价检测第58-59页
       ·抗体的制备第58页
       ·效价检测(酶联免疫吸附法)第58-59页
     ·植物总蛋白的提取及检测第59-61页
       ·植物总蛋白的提取第59页
       ·Western Blot 检测蛋白表达第59-61页
3 结果与分析第61-95页
   ·异源二十二碳二烯酸和二十二碳三烯酸对拟南芥生理功能影响第61-72页
     ·转基因拟南芥的鉴定第61-62页
     ·异源长链多不饱和脂肪酸参与膜脂的组成第62-63页
     ·转基因拟南芥与野生型拟南芥相比表型上有差异第63-64页
     ·转基因拟南芥与野生型拟南芥相比对 ABA 更敏感第64-67页
     ·转基因拟南芥耐旱能力增强第67-68页
     ·转基因拟南芥通过依赖 ABA 和非依赖 ABA 两条途径增加耐旱性第68-70页
     ·外源添加 EDA 和 ETrA 使野生型拟南芥对 ABA 敏感且耐旱第70-72页
   ·植物 XB3-like 蛋白家族功能研究第72-95页
     ·植物 XB3-like 蛋白的鉴定第72-74页
     ·植物 XB3-like 基因同源性分析第74-78页
     ·植物 XB3-like 蛋白的分类第78-79页
     ·XB3-like 基因在拟南芥、水稻、玉米和大豆中的表达模式第79-82页
     ·在拟南芥和玉米中分析 XB3-like 基因对多种激素和分生物胁迫的响应第82-84页
     ·XBAT31 生物学功能的初探第84-95页
       ·XBAT31 同源基因进化关系分析第84-85页
       ·XBAT31 启动子分析第85-86页
       ·XBAT31 组织定位和亚细胞定位第86-87页
       ·XBAT31 受多种激素和模拟非生物胁迫的诱导第87-88页
       ·突变体、超表达拟南芥及 XBAT31 抗体的获得第88-90页
       ·XBAT31 突变体不耐盐胁迫第90-93页
       ·XBAT31 泛素连接酶活性的鉴定第93-95页
4 讨论第95-100页
   ·异源二十碳二烯酸和二十碳三烯酸对拟南芥生理影响第95-97页
   ·植物 XB3-like 蛋白家族功能研究第97-100页
5 结论第100-102页
   ·异源二十碳二烯酸和二十碳三烯酸对拟南芥生理影响第100页
   ·植物 XB3-like 蛋白家族功能研究第100-102页
参考文献第102-112页
附录第112-116页
致谢第116-117页
攻读学位期间发表论文情况第117页

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