摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-18页 |
1 绪论 | 第18-38页 |
·杨树简介 | 第18页 |
·国内外建立杨树组织培养再生体系研究进展 | 第18-22页 |
·国外杨树组织培养再生体系研究进展 | 第18-20页 |
·国内杨树组织培养再生体系研究进展 | 第20-22页 |
·植物基因工程研究的意义 | 第22页 |
·杨树遗传转化受体系统研究进展 | 第22-23页 |
·建立杨树遗传转化体系研究进展 | 第23-25页 |
·农杆菌介导法简介 | 第23-24页 |
·DNA直接导入技术 | 第24-25页 |
·杨树遗传转化的影响因素研究 | 第25-30页 |
·杨树基因型的不同对遗传转化效率的影响 | 第25-26页 |
·农杆菌的类型对转化效率的影响 | 第26页 |
·选择压对杨树转化效率的影响 | 第26-27页 |
·外界因素对杨树转化效率的影响 | 第27-28页 |
·转化受体对杨树转化效率的影响 | 第28页 |
·Vir基因的活化对杨树转化效率的影响 | 第28页 |
·其他因素 | 第28-30页 |
·杨树转基因存在的问题和应用前景 | 第30-31页 |
·植物功能基因筛选技术和方法 | 第31-36页 |
·抑制性差减杂交技术 | 第31页 |
·表达序列标签技术 | 第31-32页 |
·蛋白质组学技术 | 第32页 |
·基因芯片技术 | 第32-33页 |
·FOX hunting system技术 | 第33-36页 |
·立体依据及研究目的意义 | 第36-38页 |
·立体依据 | 第36-37页 |
·研究目的意义 | 第37-38页 |
2 山新杨再生体系的建立 | 第38-52页 |
·材料 | 第39-40页 |
·植物材料 | 第39页 |
·培养基 | 第39-40页 |
·植物激素 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-42页 |
·外植体的消毒 | 第40页 |
·叶片外植体不定芽诱导培养基的筛选 | 第40-41页 |
·不定芽的壮苗培养基的筛选 | 第41-42页 |
·生根培养基的筛选 | 第42页 |
·炼苗与移栽 | 第42页 |
·统计指标与数据分析 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-49页 |
·外植体的消毒实验结果分析 | 第42-43页 |
·最佳分化培养基筛选结果分析 | 第43-45页 |
·山新杨最佳壮苗培养基的筛选结果分析 | 第45-47页 |
·最佳生根培养基的筛选结果分析 | 第47-49页 |
·炼苗与移栽 | 第49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
·本章小结 | 第50-52页 |
3 山新杨遗传转化体系的建立 | 第52-77页 |
·材料 | 第53页 |
·植物材料 | 第53页 |
·菌株及载体 | 第53页 |
·实验试剂 | 第53页 |
·实验方法 | 第53-61页 |
·遗传转化方法(叶盘法) | 第53-54页 |
·遗传转化条件的优化 | 第54-56页 |
·扫描电镜样品制作方法 | 第56页 |
·透射电镜样品制作方法 | 第56-57页 |
·GFP的鉴定 | 第57页 |
·十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法提取DNA | 第57-58页 |
·CTAB法提取植物总RNA | 第58页 |
·探针的制备 | 第58-59页 |
·Southern blot杂交实验方法 | 第59-60页 |
·DNA沉淀纯化实验方法 | 第60页 |
·Northern blot杂交实验方法 | 第60-61页 |
·数据统计及分析 | 第61页 |
·结果与分析 | 第61-75页 |
·不同浓度的Kan对山新杨叶片再生及试管苗生根的影响 | 第61-62页 |
·不同浓度的Cef对山新杨叶片分化再生的影响 | 第62-65页 |
·不同菌液浓度和侵染时间对遗传转化效率的影响 | 第65-67页 |
·AS对山新杨遗传转化效率的影响 | 第67-68页 |
·叶龄对山新杨遗传转化效率的影响 | 第68-72页 |
·其他影响因素 | 第72页 |
·转基因植株的获得 | 第72-74页 |
·Southern Blot实验结果分析 | 第74页 |
·Northern Blot实验结果分析 | 第74-75页 |
·讨论 | 第75-76页 |
·本章小结 | 第76-77页 |
4 利用蒙古柳cDNA农杆菌表达文库获得蒙古柳FOX山新杨抗性植株及其耐盐碱性初步筛选 | 第77-86页 |
·材料 | 第77-78页 |
·遗传转化实验植物材料 | 第77页 |
·蒙古柳FOX山新杨抗性植株离体叶片耐盐碱初步筛选实验植物材料 | 第77页 |
·实验药品和培养基 | 第77-78页 |
·实验方法 | 第78-79页 |
·蒙古柳cDNAs农杆菌表达文库构建简介 | 第78页 |
·遗传转化方法 | 第78-79页 |
·蒙古柳FOX山新杨抗性植株的耐盐碱性初步筛选 | 第79页 |
·结果与分析 | 第79-84页 |
·蒙古柳FOX山新杨抗性植株的获得 | 第79-82页 |
·蒙古柳FOX山新杨抗性植株耐盐碱性初步筛选实验结果 | 第82-84页 |
·讨论 | 第84-85页 |
·本章小结 | 第85-86页 |
5 综合讨论 | 第86-90页 |
·组织培养中的玻璃化现象 | 第86页 |
·组培操作过程中需注意的问题 | 第86-87页 |
·遗传转化过程中的“嵌合”现象 | 第87页 |
·遗传转化过程中植物外植体的选择 | 第87-88页 |
·农杆菌的附着和侵入与遗传转化效率关系的思考 | 第88页 |
·构建cDNA文库的重要性 | 第88-89页 |
·FOX-Hunding-System技术在木本植物山新杨中应用的展望 | 第89-90页 |
结论 | 第90-91页 |
参考文献 | 第91-103页 |
附录 | 第103-104页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第104-105页 |
致谢 | 第105-106页 |