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山新杨高效遗传转化体系的建立及蒙古柳FOX山新杨抗性植株的获得

摘要第1-7页
Abstract第7-18页
1 绪论第18-38页
   ·杨树简介第18页
   ·国内外建立杨树组织培养再生体系研究进展第18-22页
     ·国外杨树组织培养再生体系研究进展第18-20页
     ·国内杨树组织培养再生体系研究进展第20-22页
   ·植物基因工程研究的意义第22页
   ·杨树遗传转化受体系统研究进展第22-23页
   ·建立杨树遗传转化体系研究进展第23-25页
     ·农杆菌介导法简介第23-24页
     ·DNA直接导入技术第24-25页
   ·杨树遗传转化的影响因素研究第25-30页
     ·杨树基因型的不同对遗传转化效率的影响第25-26页
     ·农杆菌的类型对转化效率的影响第26页
     ·选择压对杨树转化效率的影响第26-27页
     ·外界因素对杨树转化效率的影响第27-28页
     ·转化受体对杨树转化效率的影响第28页
     ·Vir基因的活化对杨树转化效率的影响第28页
     ·其他因素第28-30页
   ·杨树转基因存在的问题和应用前景第30-31页
   ·植物功能基因筛选技术和方法第31-36页
     ·抑制性差减杂交技术第31页
     ·表达序列标签技术第31-32页
     ·蛋白质组学技术第32页
     ·基因芯片技术第32-33页
     ·FOX hunting system技术第33-36页
   ·立体依据及研究目的意义第36-38页
     ·立体依据第36-37页
     ·研究目的意义第37-38页
2 山新杨再生体系的建立第38-52页
   ·材料第39-40页
     ·植物材料第39页
     ·培养基第39-40页
     ·植物激素第40页
   ·实验方法第40-42页
     ·外植体的消毒第40页
     ·叶片外植体不定芽诱导培养基的筛选第40-41页
     ·不定芽的壮苗培养基的筛选第41-42页
     ·生根培养基的筛选第42页
     ·炼苗与移栽第42页
     ·统计指标与数据分析第42页
   ·结果与分析第42-49页
     ·外植体的消毒实验结果分析第42-43页
     ·最佳分化培养基筛选结果分析第43-45页
     ·山新杨最佳壮苗培养基的筛选结果分析第45-47页
     ·最佳生根培养基的筛选结果分析第47-49页
     ·炼苗与移栽第49页
   ·讨论第49-50页
   ·本章小结第50-52页
3 山新杨遗传转化体系的建立第52-77页
   ·材料第53页
     ·植物材料第53页
     ·菌株及载体第53页
     ·实验试剂第53页
   ·实验方法第53-61页
     ·遗传转化方法(叶盘法)第53-54页
     ·遗传转化条件的优化第54-56页
     ·扫描电镜样品制作方法第56页
     ·透射电镜样品制作方法第56-57页
     ·GFP的鉴定第57页
     ·十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法提取DNA第57-58页
     ·CTAB法提取植物总RNA第58页
     ·探针的制备第58-59页
     ·Southern blot杂交实验方法第59-60页
     ·DNA沉淀纯化实验方法第60页
     ·Northern blot杂交实验方法第60-61页
     ·数据统计及分析第61页
   ·结果与分析第61-75页
     ·不同浓度的Kan对山新杨叶片再生及试管苗生根的影响第61-62页
     ·不同浓度的Cef对山新杨叶片分化再生的影响第62-65页
     ·不同菌液浓度和侵染时间对遗传转化效率的影响第65-67页
     ·AS对山新杨遗传转化效率的影响第67-68页
     ·叶龄对山新杨遗传转化效率的影响第68-72页
     ·其他影响因素第72页
     ·转基因植株的获得第72-74页
     ·Southern Blot实验结果分析第74页
     ·Northern Blot实验结果分析第74-75页
   ·讨论第75-76页
   ·本章小结第76-77页
4 利用蒙古柳cDNA农杆菌表达文库获得蒙古柳FOX山新杨抗性植株及其耐盐碱性初步筛选第77-86页
   ·材料第77-78页
     ·遗传转化实验植物材料第77页
     ·蒙古柳FOX山新杨抗性植株离体叶片耐盐碱初步筛选实验植物材料第77页
     ·实验药品和培养基第77-78页
   ·实验方法第78-79页
     ·蒙古柳cDNAs农杆菌表达文库构建简介第78页
     ·遗传转化方法第78-79页
     ·蒙古柳FOX山新杨抗性植株的耐盐碱性初步筛选第79页
   ·结果与分析第79-84页
     ·蒙古柳FOX山新杨抗性植株的获得第79-82页
     ·蒙古柳FOX山新杨抗性植株耐盐碱性初步筛选实验结果第82-84页
   ·讨论第84-85页
   ·本章小结第85-86页
5 综合讨论第86-90页
   ·组织培养中的玻璃化现象第86页
   ·组培操作过程中需注意的问题第86-87页
   ·遗传转化过程中的“嵌合”现象第87页
   ·遗传转化过程中植物外植体的选择第87-88页
   ·农杆菌的附着和侵入与遗传转化效率关系的思考第88页
   ·构建cDNA文库的重要性第88-89页
   ·FOX-Hunding-System技术在木本植物山新杨中应用的展望第89-90页
结论第90-91页
参考文献第91-103页
附录第103-104页
攻读学位期间发表的学术论文第104-105页
致谢第105-106页

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