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棉花根响应黄萎病菌侵染的转录组分析

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
縮略语表第9-10页
1 前言第10-21页
   ·植物抗黄萎病研究进展第10-11页
   ·植物抗病基因的克隆与鉴定第11-15页
     ·利用转座子标签技术克隆植物抗病基因第11-12页
     ·利用图位克隆法克隆植物抗病基因第12-13页
     ·利用同源序列法克隆植物抗病基因第13页
     ·通过表达谱测序分离植物抗病基因第13-15页
       ·构建抑制消减杂交文库(SSH)分离植物抗病基因第13-14页
       ·通过RNA-seq表达谱测序分离植物抗病基因第14-15页
   ·454转录组测序方法介绍第15-18页
     ·454转录组测序的实验步骤第16页
     ·454转录组测序的运用第16-18页
       ·对物种进行基因组测序及重测序第16-17页
       ·通过转录组测序发掘新基因、研究基因的表达调控模式第17-18页
       ·SNP位点,挖掘分子标记第18页
       ·发现sRNA第18页
   ·植物类受体蛋白及其研究进展第18-19页
   ·病毒介导的基因沉默技术(Virus-induced gene silencing,VIGS)第19-21页
     ·植物转录后的基因沉默现象(PTGS)第19-20页
     ·VIGS机制及其应用研究进展第20-21页
   ·研究的目的与意义第21页
2 实验材料与方法第21-27页
   ·实验材料第21-22页
     ·棉花材料和菌种第21页
     ·培养基第21页
     ·实验试剂第21-22页
   ·实验方法第22-27页
     ·转录组的制备第22-23页
       ·黄萎病菌活化及培养第22页
       ·棉花接菌处理第22页
       ·RNA提取及纯化第22-23页
     ·转录组的测序与分析第23-24页
       ·测序和拼接第23-24页
       ·数据分析第24页
       ·转录组中根特异基因的分析及组织表达验证第24页
       ·基于Gene Ontology基因功能富集分析第24页
     ·棉花类受体蛋白的分离与分析第24-27页
       ·类受体蛋白的进化树分析第24页
       ·类受体蛋白基因表达模式分析第24-25页
       ·棉花类受体蛋白对黄萎病和激素响应的表达分析第25页
       ·用VIGS方法验证类受体蛋白的基因功能第25-27页
3 结果与分析第27-42页
   ·454转录组测序及拼接结果分析第27-28页
   ·转录组数据的生物注释分析第28-33页
     ·转录组拼接数据与棉花纤维表达数据比对分析第28-29页
     ·454拼接的contigs与拟南芥数据库TAIR10、棉花unique sequence、NCBI非冗余蛋白(Nt)比对分析第29-30页
     ·根转录组数据中根特异基因的分离与验证第30-31页
     ·转录组中来自Verticillium dahliae的表达序列及其分析第31-32页
     ·基于Gene Ontology基因功能富集分析第32-33页
   ·棉花类受体蛋白(RLP)基因的分离与分析第33-42页
     ·棉花类受体蛋白(RLP)基因的分离第33页
     ·棉花类受体蛋白(RLP)基因与棉花D基因组同源基因的比对分析第33-34页
     ·10个棉花类受体蛋白的结构分析第34-36页
     ·棉花类受体蛋白与番茄Vel和其他植物类受体蛋白基因的聚类分析第36-38页
     ·棉花类受体蛋白基因的组织表达模式分析和诱导表达模式分析第38-41页
     ·在棉花中验证VIGS技术第41-42页
4 讨论第42-47页
   ·根转录组测序的应用第42-43页
   ·根转录组数据的分析第43-44页
   ·棉花类受体蛋白的分离鉴定第44-45页
   ·VIGS技术的运用第45-46页
   ·下一步实验计划第46-47页
附录第47-51页
参考文献第51-60页
致谢第60页

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