| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一部分 文献综述及研究目的和意义 | 第12-28页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-27页 |
| 1 猪繁殖与呼吸综合征病毒理化、培养特性及免疫学研究进展 | 第13-17页 |
| ·PRRSV理化及培养特性 | 第13-15页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫学研究进展 | 第15-17页 |
| 2 NF-κB信号转导途径的研究进展 | 第17-21页 |
| ·NF-κB信号转导途径成员简介 | 第17-18页 |
| ·NF-κB信号转导途径的活化 | 第18-19页 |
| ·NF-κB信号转导途径的调节 | 第19-20页 |
| ·NF-κB信号转导途径活化的异常与疾病的关系 | 第20-21页 |
| 3 NF-κB在PRRSV的感染机制中的作用研究 | 第21-27页 |
| ·NF-κB与PRRSV感染导致ADE现象 | 第22-23页 |
| ·NF-κB与PRRSV感染早期无力的先天性免疫应答 | 第23页 |
| ·NF-κB与PRRSV感染中后期导致的肺损伤 | 第23-24页 |
| ·NF-κB与PRRSV感染导致的肺泡巨噬细胞凋亡 | 第24-25页 |
| ·PRRSV非结构蛋白(Nsp)抑制NF-kB信号通路的激活 | 第25-27页 |
| 第二章 研究目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二部分 试验研究 | 第28-70页 |
| 第三章 猪NF-κB p65/p50的克隆、序列鉴定、原核表达及多克隆抗体的制备 | 第28-41页 |
| 摘要 | 第28页 |
| 1 材料与方法 | 第28-33页 |
| ·试验材料与试验仪器 | 第28-29页 |
| ·试验方法 | 第29-33页 |
| 2 结果 | 第33-38页 |
| ·NF-κB p65/p50原核表达载体的构建及鉴定 | 第33-35页 |
| ·猪核转录因子p65/p50序列分析 | 第35-37页 |
| ·NF-κB p65/p50重组蛋白的诱导表达及Western-Blot鉴定 | 第37-38页 |
| ·兔抗NF-κB p65/p50/p50-RHD多克隆抗体的制备 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-41页 |
| 第四章 PRRSV感染Marc145细胞NF-κB p65/p50 mRNA转录时相及核易位的影响分析 | 第41-51页 |
| 摘要 | 第41页 |
| 1 材料与方法 | 第41-44页 |
| ·试验细胞及毒株 | 第41-42页 |
| ·试验材料 | 第42页 |
| ·试验方法 | 第42-44页 |
| 2 结果 | 第44-48页 |
| ·荧光定量引物的普通PCR扩增及鉴定 | 第44页 |
| ·p50、p65检测引物的Real-time FQ-PCR扩增条件优化 | 第44-45页 |
| ·p50、p65和β-actin Real-time FQ-PCR标准曲线的建立 | 第45-46页 |
| ·敏感性、重复性检测 | 第46-47页 |
| ·PRRSV感染Macr145细胞不同时期转录表达差异变化 | 第47-48页 |
| ·PRRSV感染Macr145不同时期细胞核内p50/p65表达水平变化 | 第48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 4 结论 | 第50-51页 |
| 第五章 猪NF-κB p65/p50原核表达产物对PRRSV复制的影响研究 | 第51-61页 |
| 摘要 | 第51页 |
| 1 材料与方法 | 第51-53页 |
| ·毒株与菌株、细胞 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51页 |
| ·NF-κB p65/p50重组蛋白对Marc-145细胞的毒性试验 | 第51-52页 |
| ·NF-κB p65/p50重组蛋白对PRRSV体外增殖活力的影响 | 第52-53页 |
| 2 结果 | 第53-57页 |
| ·NF-κB p65/p50对Marc145细胞的毒性试验 | 第53-54页 |
| ·NF-κB p65/p50对PRRSV体外增殖活力的影响 | 第54-57页 |
| 3 讨论 | 第57-60页 |
| 4 总结 | 第60-61页 |
| 第六章 猪NF-κB p65/p50真核载体的构建及其转染Marc145细胞对PRRSV复制的影响研究 | 第61-70页 |
| 摘要 | 第61页 |
| 1 材料与方法 | 第61-64页 |
| ·试验毒株、菌株及细胞 | 第61页 |
| ·试验材料 | 第61-62页 |
| ·试验方法 | 第62-64页 |
| 2 结果 | 第64-67页 |
| ·猪NF-κB p65、p50亚基真核表达载体的构建及鉴定 | 第64页 |
| ·猪NF-κB p65、p50真核表达载体转染Marc145 p65、p50的表达 | 第64-65页 |
| ·猪NF-κB p65、p50真核表达载体转染Marc145细胞对PRRSV感染CPE的影响 | 第65-66页 |
| ·猪NF-κB p65、p50真核表达载体转染Marc145细胞对PRRSV增殖的影响 | 第66-67页 |
| 3 结论 | 第67-69页 |
| 4 总结 | 第69-70页 |
| 第三部分 结论 | 第70-71页 |
| 第四部分 参考文献 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
