| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-24页 |
| ·棉花黄萎病概况 | 第11页 |
| ·黄萎病的致病机制 | 第11-12页 |
| ·毒素 | 第11-12页 |
| ·酶类 | 第12页 |
| ·微菌核的研究 | 第12-13页 |
| ·黑色素 | 第13-17页 |
| ·性质 | 第13-14页 |
| ·黑色素作用机制 | 第14-16页 |
| ·合成及相关基因 | 第16-17页 |
| ·大丽轮枝菌的功能基因组研究现状 | 第17-20页 |
| ·研究方法 | 第20-22页 |
| ·TAIL-PCR | 第20-22页 |
| ·ATMT 转化 | 第22页 |
| ·研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 第二章 棉花黄萎菌聚酮合成酶基因的克隆与序列分析 | 第24-31页 |
| ·材料和方法 | 第24-26页 |
| ·供试菌株及质粒 | 第24页 |
| ·真菌的培养和 DNA 提取 | 第24-25页 |
| ·PCR 扩增、克隆并测序 | 第25-26页 |
| ·序列比对及系统关系树的构建 | 第26页 |
| ·结果分析 | 第26-29页 |
| ·棉花黄萎菌 PKS 基因的检测与克隆 | 第26页 |
| ·棉花黄萎菌 PKS 基因的的特征 | 第26-28页 |
| ·棉花黄萎菌 PKS 基因的系统进化分析 | 第28-29页 |
| ·讨论与结论 | 第29-31页 |
| 第三章 棉花黄萎菌 T-DNA 插入黑色素形成突变体的筛选及 T-DNA 侧翼序列的克隆 | 第31-39页 |
| ·材料与方法 | 第31页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·常规试剂及配置 | 第31页 |
| ·实验方法 | 第31-35页 |
| ·白化体的获得 | 第31页 |
| ·基因组 DNA 提取 | 第31页 |
| ·Southern 印迹杂交 | 第31-33页 |
| ·TAIL-PCR | 第33-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-37页 |
| ·稳定遗传阳性白化体的筛选及检测 | 第35-36页 |
| ·突变体基因组中 T-DNA 插入拷贝数的检测分析 | 第36页 |
| ·T-DNA 插入侧翼序列的获得及分析 | 第36-37页 |
| ·结论与讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 棉花黄萎病菌黑色素合成相关基因敲除载体的构建 | 第39-48页 |
| ·材料和方法 | 第39-44页 |
| ·供试菌株 | 第39页 |
| ·供试质粒 | 第39页 |
| ·大肠杆菌超级感受态的制备及热击转化 | 第39-40页 |
| ·农杆菌感受态的制备及电击转化 | 第40页 |
| ·质粒的扩繁及提取 | 第40页 |
| ·目标基因的 PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·DNA 片段的连接测序 | 第41-42页 |
| ·限制性内切酶（RE）消化及连接反应 | 第42-43页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化(ATMT) | 第43页 |
| ·候选基因敲除载体的构建 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-46页 |
| ·目的基因上下游基因的获得 | 第44-45页 |
| ·中间载体的连接与转化 | 第45页 |
| ·目的条带在中间载体上的酶切验证 | 第45-46页 |
| ·目的片段在表达载体上的酶切验证 | 第46页 |
| ·电击转化农杆菌及 PCR 验证 | 第46页 |
| ·结论与讨论 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60-61页 |
| 导师评阅表 | 第61页 |
