| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| ·D—苹果酸的研究进展 | 第11-13页 |
| ·D—苹果酸的理化性质 | 第11-12页 |
| ·D—苹果酸的应用 | 第12-13页 |
| ·作为手性前体合成药物 | 第12-13页 |
| ·在手性拆分试剂中的应用 | 第13页 |
| ·D—苹果酸作为配体在不对称合成中的应用 | 第13页 |
| ·D—苹果酸的制备方法 | 第13-17页 |
| ·化学物理方法合成D—苹果酸 | 第13-14页 |
| ·生物方法生产D—苹果酸 | 第14-17页 |
| ·微生物拆分法 | 第15页 |
| ·酶法生产D—苹果酸 | 第15-17页 |
| ·马来酸水合酶的研究进展 | 第17-18页 |
| ·动物和植物来源的马来酸水合酶 | 第17页 |
| ·微生物来源的马来酸水合酶 | 第17-18页 |
| ·不同来源的马来酸水合酶的比较 | 第18页 |
| ·同工酶的背景 | 第18-20页 |
| ·常用的同工酶的分离和测定方法 | 第19页 |
| ·常用的同工酶的鉴定方法 | 第19-20页 |
| ·本课题研究的意义和内容 | 第20-22页 |
| ·研究意义 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-22页 |
| 第二章 马来酸水合酶的分离纯化 | 第22-38页 |
| ·酶的纯化方法 | 第22-25页 |
| ·粗酶的制备 | 第22-24页 |
| ·石英砂研磨法 | 第22-23页 |
| ·超声波破碎法 | 第23页 |
| ·酶解法 | 第23页 |
| ·细胞破碎器 | 第23-24页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第24页 |
| ·离子交换层析 | 第24页 |
| ·疏水层析 | 第24页 |
| ·PEG透析浓缩 | 第24-25页 |
| ·SDS—PAGE电泳 | 第25页 |
| ·实验试剂 | 第25-26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·马来酸水合酶的分离纯化 | 第27-37页 |
| ·产酶菌株的发酵 | 第27页 |
| ·酶活测定 | 第27-28页 |
| ·蛋白量的测定 | 第28页 |
| ·电泳纯度分析 | 第28-29页 |
| ·纯化流程图 | 第29-31页 |
| ·纯化结果与讨论 | 第31-37页 |
| ·细胞破碎 | 第31-32页 |
| ·DEAE SepharoseTM Fast Flow离子交换柱层析 | 第32-33页 |
| ·硫酸铵沉淀 | 第33页 |
| ·疏水层析 | 第33-34页 |
| ·疏水洗脱活性组分PEG透析浓缩 | 第34页 |
| ·发酵时间对马来酸水合酶同工酶比例影响 | 第34-35页 |
| ·纯化结果讨论 | 第35-37页 |
| ·本章小结 | 第37-38页 |
| 第三章 马来酸水合酶的酶学性质研究 | 第38-63页 |
| ·实验仪器 | 第38-39页 |
| ·实验试剂 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-41页 |
| ·温度对酶活的影响 | 第39页 |
| ·pH值对酶活的影响 | 第39页 |
| ·马来酸水合酶耐盐性实验 | 第39-40页 |
| ·DTT对酶活的影响 | 第40页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第40页 |
| ·酶的稳定性以及保存条件的实验 | 第40页 |
| ·马来酸水合酶的底物专一性 | 第40-41页 |
| ·基本动力学常数K_m及最大反应速度V_m的测定 | 第41页 |
| ·实验结果 | 第41-61页 |
| ·酶的最适合反应温度 | 第41-43页 |
| ·酶的最适合反应pH值 | 第43-47页 |
| ·马来酸水合酶的耐盐性 | 第47-51页 |
| ·DTT对酶活的影响 | 第51-52页 |
| ·金属离子对酶活的影响 | 第52页 |
| ·酶的稳定性以及保存条件的实验 | 第52-56页 |
| ·马来酸水合酶的底物专一性 | 第56-57页 |
| ·基本动力学常数K_m及最大反应速度V_m的测定 | 第57-61页 |
| ·本章小结 | 第61-63页 |
| 第四章 总结与展望 | 第63-65页 |
| ·结论 | 第63页 |
| ·展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 致谢 | 第70页 |