| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-25页 |
| ·全细胞生物传感器的概述及其研究进展 | 第14-19页 |
| ·全细胞生物传感器概述 | 第14-15页 |
| ·全细胞生物传感器的研究进展 | 第15-19页 |
| ·金属硫蛋白概述及其调控机制研究进展 | 第19-22页 |
| ·金属硫蛋白概述 | 第19-20页 |
| ·金属硫蛋白调控机制研究进展 | 第20-22页 |
| ·论文设计及思路 | 第22-25页 |
| ·课题内容及意义 | 第22页 |
| ·实验方案及流程 | 第22-23页 |
| ·课题可行性分析 | 第23-24页 |
| ·课题立题的创新点 | 第24-25页 |
| 第二章 含荧光素酶四膜虫全细胞生物传感器的构建 | 第25-40页 |
| ·材料 | 第25-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第25页 |
| ·试剂及酶 | 第25-26页 |
| ·主要试剂配制 | 第26-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-36页 |
| ·Fluc和Rluc基因的优化及克隆 | 第27-30页 |
| ·过表达重组质粒pBX-Fluc和pBX-Rluc的构建及鉴定 | 第30-33页 |
| ·四膜虫细胞的培养 | 第33页 |
| ·四膜虫细胞的饥饿 | 第33页 |
| ·四膜虫细胞的转化 | 第33-34页 |
| ·重组四膜虫阳性克隆细胞的筛选 | 第34-35页 |
| ·四膜虫基因组的快速提取 | 第35-36页 |
| ·实验结果 | 第36-38页 |
| ·Fluc和Rluc基因的优化及克隆 | 第36-37页 |
| ·过表达重组质粒pBX-Fluc和pBX-Rluc的重组鉴定 | 第37页 |
| ·重组四膜虫细胞株B2086-Fluc和CU428-Rluc的鉴定 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 第三章 重组四膜虫全细胞生物传感器对重金属离子的检测 | 第40-48页 |
| ·材料与仪器 | 第40-42页 |
| ·细胞株 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40-41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·主要试剂的配置 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·重组四膜虫B2086-Fluc和CU428-Rluc的培养 | 第42页 |
| ·四膜虫细胞株B2086-Fluc和CU428-Rluc对不同重金属离子的检测 | 第42-43页 |
| ·数据分析 | 第43页 |
| ·HA-Fluc和HA-Rluc蛋白的Western Blot分析 | 第43页 |
| ·实验结果 | 第43-46页 |
| ·四膜虫B2086-Fluc和CU428-Rluc对重金属的监测 | 第43-45页 |
| ·Western Blot检测HA-Fluc和HA-Rluc蛋白的表达 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第四章 嗜热四膜虫金属硫蛋白两个亚族对Cr(Ⅵ)的不同响应 | 第48-57页 |
| ·材料与仪器 | 第48-49页 |
| ·细胞株 | 第48页 |
| ·试剂 | 第48-49页 |
| ·主要仪器 | 第49页 |
| ·主要试剂的配制 | 第49页 |
| ·实验方法 | 第49-52页 |
| ·四膜虫的培养 | 第49页 |
| ·Cr(Ⅵ)和Cr(Ⅲ)对嗜热四膜虫繁殖速度的影响 | 第49页 |
| ·Cr(Ⅵ)胁迫及Cr(Ⅵ)与Cd(Ⅱ)/Cu(Ⅱ)双重胁迫处理四膜虫细胞 | 第49页 |
| ·Tatol RNA的提取 | 第49-50页 |
| ·cDNA的合成 | 第50-51页 |
| ·实时荧光定量PCR引物设计 | 第51页 |
| ·MTs基因表达分析 | 第51-52页 |
| ·实验结果 | 第52-55页 |
| ·Cr(Ⅵ)和Cr(Ⅲ)对嗜热四膜虫繁殖速度的影响 | 第52页 |
| ·Cr(Ⅵ)胁迫条件下CdMTs和CuMTs的表达 | 第52-54页 |
| ·Cr(Ⅵ)与Cd(Ⅱ)/Cu(Ⅱ)双重胁迫下CdMTs的表达 | 第54页 |
| ·Cr(Ⅵ)与Cd(Ⅱ)/Cu(Ⅱ)双重胁迫下CuMTs的表达 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 总结 | 第57-58页 |
| 展望 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-66页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 个人简况及联系方式 | 第69-71页 |
