| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-36页 |
| ·基因治疗 | 第13-26页 |
| ·基因治疗的概念 | 第13页 |
| ·基因治疗的发展及研究现状 | 第13-15页 |
| ·基因治疗的方法和步骤 | 第15-16页 |
| ·基因传递过程 | 第16-22页 |
| ·基因传递过程的障碍 | 第16-20页 |
| ·基因传递过程复合物跨越障碍的可能的方法和途径 | 第20-22页 |
| ·基因治疗的应用 | 第22-23页 |
| ·基因治疗在肿瘤疾病中的应用 | 第22页 |
| ·基因治疗在组织工程中的运用 | 第22-23页 |
| ·基因治疗中待解决的关键问题 | 第23页 |
| ·基因治疗载体的种类及理想载体的特征 | 第23-26页 |
| ·病毒载体 | 第23-24页 |
| ·非病毒载体 | 第24-26页 |
| ·阳离子聚合物载体PAMAM | 第26-31页 |
| ·PAMAM的研究背景 | 第26-28页 |
| ·PAMAM的性质及在生物医药领域的应用 | 第28-30页 |
| ·PAMAM作为基因载体的研究现状 | 第30-31页 |
| ·聚酰胺-胺型树状大分子包裹的纳米金颗粒(Dendrimer-Entrapped GoldNanoparticles,Au DENPs) | 第31-32页 |
| ·疏水化修饰载体研究进展 | 第32-33页 |
| ·叶酸靶向的基因治疗 | 第33-35页 |
| ·本文的研究意义与目标 | 第35-36页 |
| 第二章 烷基化PAMAM树状大分子的修饰及复合物的制备与表征 | 第36-47页 |
| ·引言 | 第36-37页 |
| ·实验材料和方法 | 第37-42页 |
| ·实验试剂和设备 | 第37页 |
| ·烷基化PAMAM树状大分子的合成 | 第37-38页 |
| ·烷基化PAMAM树状大分子的表征 | 第38页 |
| ·~1H NMR表征 | 第38页 |
| ·末端氨基定量 | 第38页 |
| ·质粒抽提与标记 | 第38-41页 |
| ·G5.NH_2-Cn/pDNA复合物的制备与表征 | 第41-42页 |
| ·G5.NH_2-Cn/pDNA复合物的制备 | 第41页 |
| ·凝胶阻滞试验 | 第41-42页 |
| ·粒径与Zeta电势的测定 | 第42页 |
| ·实验结果与讨论 | 第42-46页 |
| ·~1H NMR表征 | 第42页 |
| ·末端氨基定量 | 第42-43页 |
| ·质粒抽提与标记 | 第43页 |
| ·凝胶阻滞试验 | 第43-44页 |
| ·粒径与Zeta电势 | 第44-46页 |
| ·小结 | 第46-47页 |
| 第三章 烷基化PAMAM树状大分子的细胞毒性以及转染效率的研究 | 第47-55页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·实验试剂和仪器设备 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-49页 |
| ·MTT细胞毒性实验 | 第48页 |
| ·细胞转染实验 | 第48-49页 |
| ·荧光素酶表达实验 | 第48-49页 |
| ·绿色荧光蛋白表达实验 | 第49页 |
| ·细胞内吞实验 | 第49页 |
| ·实验结果与讨论 | 第49-54页 |
| ·细胞毒性 | 第49-50页 |
| ·细胞转染效率评价 | 第50-52页 |
| ·荧光素酶表达实验 | 第50-51页 |
| ·绿色荧光蛋白表达实验 | 第51-52页 |
| ·细胞内吞实验 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第54-55页 |
| 第四章 包裹纳米金颗粒的叶酸功能化聚酰胺-胺树状大分子(Au DENPs-FA)的制备及Au DENPs-FA/DNA复合物的制备与表征 | 第55-65页 |
| ·引言 | 第55-56页 |
| ·实验材料和方法 | 第56-59页 |
| ·实验试剂和设备 | 第56-57页 |
| ·Au DENPs与AuDENPs-FA的合成 | 第57页 |
| ·Au DENPs-FA与Au DENPs的表征 | 第57-58页 |
| ·UV-Vis和1H NMR表征 | 第57-58页 |
| ·末端氨基定量 | 第58页 |
| ·透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM) | 第58页 |
| ·质粒抽提与标记 | 第58页 |
| ·不同比例Au DNEPs-FA/DNA复合物的制备 | 第58页 |
| ·Au DENPs-FA/DNA复合物的凝胶阻滞试验 | 第58页 |
| ·粒径与Zeta电势的测定 | 第58-59页 |
| ·实验结果与讨论 | 第59-63页 |
| ·UV-Vis和~1H NMR表征结果 | 第59-60页 |
| ·氨基定量 | 第60-61页 |
| ·透射电子显微镜(Transmission Electron Microscope,TEM) | 第61页 |
| ·Au DENPs-FA与pDNA的结合情况 | 第61-62页 |
| ·粒径分布 | 第62-63页 |
| ·电势分布 | 第63页 |
| ·小结 | 第63-65页 |
| 第五章 Au DENPs-FA的细胞毒性以及转染效率的研究 | 第65-74页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·实验试剂和仪器设备 | 第65-66页 |
| ·实验方法 | 第66-67页 |
| ·MTT细胞毒性实验 | 第66页 |
| ·细胞转染实验 | 第66-67页 |
| ·荧光素酶表达实验 | 第66页 |
| ·绿色荧光蛋白表达实验 | 第66-67页 |
| ·细胞内吞实验 | 第67页 |
| ·叶酸受体屏蔽实验 | 第67页 |
| ·结果与讨论 | 第67-72页 |
| ·细胞毒性实验 | 第67-68页 |
| ·细胞转染评价 | 第68-70页 |
| ·荧光素酶表达实验 | 第68-69页 |
| ·绿色荧光蛋白表达实验 | 第69-70页 |
| ·细胞内吞实验 | 第70-72页 |
| ·细胞靶向转染的评价 | 第72页 |
| ·小结 | 第72-74页 |
| 第六章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-82页 |
| 攻读硕士期间发表的文章 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
