摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第1章 引言 | 第9-28页 |
·MicroRNA 介绍 | 第9-17页 |
·miRNA 的发现 | 第9页 |
·miRNA 的命名 | 第9-10页 |
·miRNA 的产生及作用机理 | 第10-11页 |
·miRNA 的生物学功能 | 第11-15页 |
·miRNA 靶基因的预测 | 第15-17页 |
·E3 泛素连接酶 CHIP 的研究进展 | 第17-19页 |
·CHIP 的结构特点 | 第17页 |
·CHIP 的功能 | 第17-19页 |
·Runx2 在骨分化中的研究简介 | 第19-21页 |
·成骨细胞分化 | 第21-27页 |
·间充质干细胞 | 第21-22页 |
·成骨细胞的分化过程 | 第22页 |
·成骨细胞分化的调控 | 第22-27页 |
·本论文的研究目的及主要内容 | 第27-28页 |
第2章 实验材料与方法 | 第28-37页 |
·菌种及细胞 | 第28页 |
·抗体及底物 | 第28页 |
·质粒构建 | 第28-29页 |
·引物信息 | 第29-30页 |
·细胞转染 | 第30页 |
·稳定细胞系的建立 | 第30页 |
·小鼠颅骨细胞的分离与培养 | 第30-31页 |
·成骨细胞分化实验及鉴定 | 第31-32页 |
·Westren Blot | 第32页 |
·材料 | 第32页 |
·实验方法 | 第32页 |
·总 RNA 的提取、miRNA 反转录及定量 PCR | 第32-33页 |
·材料 | 第32-33页 |
·实验方法 | 第33页 |
·萤光素酶报告分析 | 第33页 |
·材料 | 第33页 |
·实验方法 | 第33页 |
·RNA 结合蛋白免疫共沉淀(RNP-IP) | 第33-35页 |
·材料 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-35页 |
·原位杂交 | 第35-37页 |
·材料 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-37页 |
第3章 miR-764-5p 在成骨分化过程中的表达 | 第37-42页 |
·引论 | 第37页 |
·结果与分析 | 第37-41页 |
·前成骨细胞的诱导分化 | 第37-38页 |
·miR-764-5p 和 CHIP 在成骨细胞分化过程中的表达呈负相关 | 第38-41页 |
·小结 | 第41-42页 |
第4章 miR-764-5p 调控 CHIP 的分子机制 | 第42-48页 |
·引论 | 第42页 |
·结果与分析 | 第42-47页 |
·miR-764-5p 能够调控 CHIP 的表达 | 第42-43页 |
·miR-764-5p 通过结合 CHIP 3’-UTR 调控 CHIP 蛋白表达 | 第43-45页 |
·miR-764-5p 和 CHIP mRNA 存在于同一个 RISC | 第45-47页 |
·小结 | 第47-48页 |
第5章 miR-764-5p 促进成骨细胞的分化 | 第48-51页 |
·引论 | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-50页 |
·miR-764-5p 通过抑制 CHIP 的表达增强 Runx2 转录活性 | 第48页 |
·miR-764-5p 通过抑制 CHIP 的表达调控 Runx2 蛋白表达 | 第48-50页 |
·小结 | 第50-51页 |
第6章 miR-764-5p 促进成骨细胞分化 | 第51-56页 |
·引论 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-55页 |
·miR-764-5p 过量表达促进成骨细胞分化 | 第51-53页 |
·CHIP 能够抑制 miR-764-5p 引起的成骨细胞分化 | 第53-55页 |
·小结 | 第55-56页 |
第7章 结论 | 第56-59页 |
·全文讨论 | 第56-57页 |
·研究总结 | 第57-58页 |
·需进一步开展的工作 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-71页 |
致谢 | 第71-73页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第73页 |